视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN表达的变化

孟海洋

(太康县人民医院，河南 周口 461400)



视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN表达的变化

孟海洋

(太康县人民医院，河南 周口 461400)

[摘要]目的探讨视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN表达的变化及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测97例视网膜母细胞瘤和28例正常视网膜组织中Ki-67、PTEN的表达水平，并分析两者与视网膜母细胞瘤临床病理参数的关系。结果视网膜母细胞瘤组织中Ki-67的阳性率为66.0%(64/97)，高于正常视网膜组织的14.3%(4/28)(χ2=23.406，P<0.05)；视网膜母细胞瘤组织中PTEN的阳性率为53.6%(52/97)，低于正常视网膜组织的92.9%(26/28)(χ2=14.266，P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达均与患者的分化程度、临床分期有关(P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达呈负相关关系(r=-0.493，P<0.05)。结论Ki-67、PTEN的异常表达参与了视网膜母细胞瘤的侵袭和病程进展。

[关键词]视网膜母细胞瘤；Ki-67；PTEN

视网膜母细胞瘤是一种多见于婴幼儿的眼部恶性肿瘤，发病率在婴幼儿期仅次于白血病，该病对患者的视力造成严重危害，严重者甚至危及患者的生命。视网膜母细胞瘤的发生、发展由多种基因的参与，过程非常复杂。Ki-67是一种反映细胞增殖活性的标志物，在恶性肿瘤患者体内主要用于恶性肿瘤的发展、恶化、转移等生物学行为的评估[1]。PTEN属于抑癌基因，具有双重磷酸酶活性，正常情况下能够维持机体正常组织的生理行为，一旦表达缺失则可能促进细胞的癌变[2]。本研究采用免疫组化S-P法检测视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN蛋白的表达，现将结果报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料入组河南省人民医院和太康县人民医院2010年1月至2015年9月收治的经病理学确诊的视网膜母细胞瘤患者97例，男56例，女41例；年龄6个月～12岁，中位年龄3.5岁；组织分化程度：分化型53例，未分化型44例；临床分期：眼内期37例，青光眼期35例，眼外扩展期25例。并选取同期收治的因外伤摘除眼球的正常视网膜患者28例作为对照，其中男20例，女8例，年龄6个月～13岁，中位年龄3.2岁。2组患者的性别、年龄等基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2主要试剂Ki-67鼠抗人单克隆抗体、PTEN鼠抗人单克隆抗体、S-P免疫组化试剂盒及DAB显色剂等均购自北京中山金桥生物技术有限公司。

1.3免疫组化法检测Ki-67、PTEN的表达情况采用免疫组化S-P法检测97例视网膜母细胞瘤和28例正常视网膜组织中Ki-67、PTEN蛋白的表达，以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知Ki-67、PTEN阳性切片作为阳性对照。

1.4免疫组化结果判定Ki-67、PTEN均定位于细胞浆或细胞核中，以细胞浆或细胞核染成棕黄色为阳性信号，选取至少5个高倍镜(×400)视野，计数阳性细胞数,并观察染色强度，进行综合评估，判断阳性率[3]。参考文献进行免疫组化染色结果的判断。

1.5统计学处理采用SPSS 17.0进行统计学分析，Ki-67、PTEN的阳性率等计数资料比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearmen相关性分析法，检验水准α=0.05。

2结果

2.1视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达视网膜母细胞瘤组织中Ki-67的阳性率为66.0%(64/97)，高于正常视网膜组织的14.3%(4/28)(χ2=23.406，P<0.05)；视网膜母细胞瘤组织中PTEN的阳性率为53.6%(52/97)，低于正常视网膜组织的92.9%(26/28)(χ2=14.266，P<0.05)。

2.2视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达与其临床病理参数的关系视网膜母细胞瘤组织中E-cadherin、VEGF的表达均与患者的分化程度、临床分期有关(P<0.05)。见表1。

表1视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、

PTEN的表达与其临床病理参数的关系

项目nKi-67阳性χ2PPTEN阳性χ2P组织分化程度 分化型53304.576<0.05369.629<0.05 未分化型443416临床分期 眼内期371925 青光眼期35238.929<0.05197.599<0.05 眼外扩展期25228

2.3视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN表达的相关性视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达呈负相关关系(r=-0.493，P<0.05)。见表2。

表2视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN表达的相关性

Ki-67PTEN阳性阴性合计阳性234164阴性29433合计524597

注：r=-0.493，P<0.05

3讨论

视网膜母细胞瘤是婴幼儿常见的原发于视网膜的恶性肿瘤，具有较高的致盲率和致死率，严重危害了婴幼儿的生命健康安全。目前视网膜母细胞瘤的主要治疗手段是局部治疗联合全身化疗，但是由于目前的化疗方案疗效有限且毒副反应重，严重影响了其化疗疗效的进一步提高。临床上为进一步探讨视网膜母细胞瘤的发病机制，寻找其有效的治疗方案或治疗靶点，进行了大量研究。本研究在视网膜母细胞瘤的机制探讨中选择了Ki-67、PTEN这2种肿瘤相关因子。Ki-67与多种肿瘤的发生、发展、浸润、转移关系密切[4-5]。PTEN是一种多功能蛋白，具有蛋白磷酸酶和脂质磷酸酶双重活性，能够维持正常细胞的生长、增殖、分裂等[6-7]。本文结果显示：视网膜母细胞瘤组织中Ki-67的阳性率为66.0%(64/97)，高于正常视网膜组织的14.3%(4/28)(χ2=23.406，P<0.05)；视网膜母细胞瘤组织中PTEN的阳性率为53.6%(52/97)，低于正常视网膜组织的92.9%(26/28)(χ2=14.266，P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达均与患者的分化程度、临床分期有关(P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN的表达呈负相关关系(r=-0.493，P<0.05)。这与有关文献[8-9]研究结果一致。总之，视网膜母细胞瘤组织中Ki-67、PTEN存在异常表达，且可能参与了视网膜母细胞瘤的疾病进展、浸润、转移等生物学行为过程。

参考文献：

[1]Taran K,Wysocka A,Sitkiewicz A,et al.Evaluation of potential prognostic value of Bmi-1 gene product and selected markers of proliferation (Ki-67) and apoptosis (p53) in the neuroblastoma group of tumors[J].Postepy Hig Med Dosw (Online),2016,70(0):110-116.

[2]Durmaz I,Guven EB,Ersahin T,et al.Liver cancer cells are sensitive to Lanatoside C induced cell death independent of their PTEN status[J].Phytomedicine,2016,23(1):42-51.

[3]Vranic S,Marchiò C,Castellano I,et al.Immunohistochemical and molecular profiling of histologically defined apocrine carcinomas of the breast[J].Hum Pathol,2015,46(9):1350-1359.

[4]Wang YL,Liui HL,Fu RG,et al.HDAC Inhibitor Oxamflatin Induces Morphological Changes and has Strong Cytostatic Effects in Ovarian Cancer Cell Lines[J].Curr Mol Med,2016,16(3):232-242.

[5]Meier V,Guscetti F,Roos M,et al.Hypoxia-Related Marker GLUT-1,CAIX,Proliferative Index and Microvessel Density in Canine Oral Malignant Neoplasia[J].PLoS One,2016,11(2):e0149993.

[6]Pugliese D,Palermo G,Totaro A,et al.Clinical,pathological and molecular prognostic factors in prostate cancer decision-making process[J].Urologia,2016,82(1):14-20.

[7]McCann SM,Jiang Y,Fan X,et al.Quantitative Multiparametric MRI Features and PTEN Expression of Peripheral Zone Prostate Cancer: A Pilot Study[J].AJR Am J Roentgenol,2016,206(3):559-565.

[8]白海霞,白淑玮,李彬，等.视网膜母细胞瘤PAX6、Ki-67和MMP-9的表达及其与组织病理学的关系[J].眼科,2014,23(5):343-347.

[9]张萌，单保恩，李军，等.视网膜母细胞瘤组织中Livin、PTEN表达变化及意义[J].山东医药,2012,52(18):90-91.

Expressions of Ki-67 and PTEN in the Retinoblastoma

Meng Haiyang

(ThePeople’sHospitalofTaikang,Zhoukou461400,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expressions of Ki-67 and PTEN in the retinoblastoma and the significance.MethodsImmunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of Ki-67 and PTEN in the 97 patients with retinoblastoma and 28 patients with normal retina tissues,their relationship with clinicopathological parameters were analyzed.ResultsThe positive rate of Ki-67 was 66.0%(64/97) in the retinoblastoma,and was 14.3%(4/28) in the normal retina tissues (χ2=23.406，P<0.05).The positive rate of Ki-67 was 53.6%(52/97) in the retinoblastoma,and was 92.9%(26/28) in the normal retina tissues (χ2=14.266，P<0.05).The expressions of Ki-67 and PTEN in the retinoblastoma were related with cell differentiation degree and clinical stage (P<0.05).In the retinoblastoma,the expression of Ki-67 was negatively related with PTEN (r=-0.493,P<0.05).ConclusionAbnormal expressions of Ki-67 and PTEN may be related to the infiltration and development of retinoblastoma.

[Key words]retinoblastoma; Ki-67; PTEN

(收稿日期：2015-10-20)

[中图分类号]R739.7；R730.23

[文献标识码]A

[文章编号]1673-5412(2016)02-0124-03

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2016.02.010

作者简介：孟海洋(1979-),男,主治医师,主要从事眼科疾病的临床诊治工作。E-mail：90475046848@qq.com