大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药性研究

张美玲　丁健芳　邱淼林

【摘要】 目的：探究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药性的研究。方法：收集笔者所在医院2012年7月-2014年6月住院患者的标本，采用梅里埃vitek 2 compact全自动微生物分析仪对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行鉴定并行药敏试验，探讨大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药性变化。结果：近两年来，产ESBLs大肠埃希菌的检出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的检出率由20.0%下降到12.9%；大肠埃希菌平均耐药率为0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐药率为2.06%，两者均呈上升趋势；产ESBLs多耐肠杆菌科菌株仍对亚胺培南保持高度敏感性，但是非产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率却呈上升趋势，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趋势较为显著。结论：产ESBLs的大肠埃希菌检出率呈上升趋势，肺炎克雷伯菌检出率呈下降趋势；但非产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率却呈上升趋势，尤其是肺炎克雷伯菌。因此，院内应根据检测结果指导临床合理、逐级选用抗菌药物，并加强多重耐药菌监测，防止交叉感染。

【关键词】 超广谱β-内酰胺酶； 亚胺培南； 碳青霉烯酶； KPC酶

中图分类号 R446.1 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）8-0051-03

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.8.028

近两年来，福建省人民医院因肛肠科大量送检脓液和分泌物标本，使医院临床检出的细菌分布始终以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主，并常检出产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的多药耐药菌株及耐亚胺培南的广泛耐药菌株。随着亚胺培南在临床中的广泛使用，对亚胺培南耐药的菌株快速增加，目前，国内外均有报道肺炎克雷伯菌对碳青酶烯类抗菌药物的耐药现象[1]。近年来研究指出，产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌已成为临床最常见的多重耐药菌[2]。为探究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药性变化情况，为临床医生提供合理选择抗生素依据，控制耐药菌扩散，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本选择

选取福建省人民医院2012年7月-2014年6月住院患者标本分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌。

1.2 仪器与试剂

仪器为梅里埃vitek 2 compact全自动微生物鉴定分析仪，GN13检测卡，由法国生物梅里埃公司生产。标准菌株为大肠埃希菌ATCC25922，培养基由郑州安图生物工程有限公司提供。

1.3 菌株分离与鉴定

选取临床标本，按照常规方法分离菌株，严格按照卫生部检验操作规程进行。获纯培养后采用梅里埃vitek 2 compact全自动微生物鉴定分析仪对病菌菌种进行鉴定，并做药物敏感试验。菌株鉴定由检验科经验丰富的医师严格按照操作说明进行。

2 结果

2.1 产ESBLs菌株检出情况

近两年来，产ESBLs大肠埃希菌的检出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的检出率由20.0%下降到12.9%，详见表1。

2.2 大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药情况

近两年来，大肠埃希菌平均耐药率为0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐药率为2.06%，两者均呈上升趋势，详见表2。

2.3 产ESBLs与非产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药情况

近两年来，产ESBLs多耐肠杆菌科菌株仍对亚胺培南保持高度敏感性，但是非产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率却呈上升趋势，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趋势较为显著，详见表3。

3 讨论

研究指出，医院内临床检出率最高病菌为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，主要原因为检查分泌物和脓液标本增加，两种病菌检出率约占整个病菌50%[3]。本次研究得出，近两年来，产ESBLs大肠埃希菌检出率呈逐年上升趋势，2014年上半年检出率达到45.0%，而产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率呈逐年下降趋势，由20.0%下降为12.9%。两者检出率总和虽占主要临床主要检出率，但表明产ESBLs大肠埃希菌检出率呈上升趋势，而产ESBLs肺炎克雷伯菌检查率呈下降趋势。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为产超广谱β-内酰胺酶的代表病株，近年来随着大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床检出率增加，产ESBLs的多耐药菌株也随之增加。临床研究指出，亚胺培南对ESBLs革兰氏阴性杆菌有强效杀灭作用，被作为控制多重耐药菌的最后防线[4]。因此，亚胺培南是临床中作为治疗ESBLs和头孢菌素酶（AmpC）等多重耐药菌株的首选药物[5]。但亚胺培南在临床中应用不合理，导致部分细菌产生可水解β-内酰胺类抗生素的碳青霉烯酶，消灭药物作用，从而产生耐药性，同时也导致耐碳青霉烯酶类肠杆菌科呈上升趋势。本次研究得出，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性均呈上升趋势，分别为0.12%、2.06%；产ESBLs多耐肠杆菌科菌株对亚胺培南保持高度敏感性，但非产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率却呈上升趋势，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趋势较为显著。

肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制较为复杂，结合国内外研究总结主要为以下原因：（1）产生碳青霉烯酶，如VIM型、IMP型金属酶及KPC型碳青霉烯酶等；（2）AmpC酶和/或ESBL在过度表达的同时导致外膜孔蛋白严重丢失；（3）外排泵呈高表达形成膜屏障作用[6]；（4）药物靶位改变。但大量研究指出，产碳青霉烯酶为肠杆菌科细菌对碳青霉烯酶类耐药最主要的机制[7-9]。但研究表明，我国对亚胺培南耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌主要为肺炎克雷伯菌所产生的碳青霉烯酶（KPC）[10]。KPC可抵抗碳青霉烯类抗生素的杀菌作用，且可将该酶基因编码于线粒体上，KPC编码质粒可单独或在细菌细胞间转移引起碳青霉烯类耐药。

综上所述，肠杆菌科细菌检出率呈逐年上升趋势，并对亚胺培南耐药性逐年升高，给临床抗生素治疗感染性疾病带来严重挑战。对于感染患者，临床医师应及时送检标本进行细菌培养鉴定，并根据药敏试验进行抗生素选择，降低耐药性。同时临床中应加大对各种细菌进行抗菌药物分析，根据研究结果指导临床医师对抗生素的选择。最后，加强多重耐药菌监测和防控，减少耐药菌株产生与扩散。

参考文献

[1]杨俊钧，严子禾.41株大肠埃希菌和克雷伯菌耐药性的研究[J].东南大学学报（医学版），2012，31（4）：467-470.

[2]周秀岚，张叶毛，武芳，等.产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2012，22（7）：1489-1491.

[3]杨启文，陈民钧，王瑶，等.腹腔感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2012，12（4）：285-290.

[4]郭健莲，江先海，刘惠娜，等.产超广谱β内酰胺酶检测及药敏分析[J].国际检验医学杂志，2012，33（18）：2254-2255.

[5]裴碧娜.产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的检测和耐药性分析[J].中国医师进修杂志，2013，36（6）：43-44.

[6]肖幸华，陈先来.亚胺培南对医院内革兰阴性菌的抗菌活性分析[J].国际病理科学与临床杂志，2012，32（4）：281-286.

[7]杨伟业，吴秀荣，林焕泽，等.亚胺培南对革兰阴性杆菌的耐药性变迁[J].中华医院感染学杂志，2013，23（4）：897-899.

[8]温鸿，章虹霞，石娜，等.医院感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分析及耐药监测[J].温州医学院学报，2013，43（11）：757-759，763.

[9]徐羽中，李孜，何臣，等.下呼吸道感染标本中产ESBLs酶的大肠埃希氏菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析[J].海南医学，2013，24（18）：2690-2692.

[10]马芳.我院2010年临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性分析[J].中国误诊学杂志，2012，12（13）：3223.

（收稿日期：2015-11-13）