胃癌组织Survivin、RHAMM表达及意义

李冬斌，许香梅，张伟，茹丽娜，郑志刚，刘津

(1 河北医科大学第二医院，石家庄050000；2 石家庄市第一医院；3 邯郸市中心医院)

胃癌组织Survivin、RHAMM表达及意义

李冬斌1，许香梅2，张伟3，茹丽娜4，郑志刚1，刘津2

(1 河北医科大学第二医院，石家庄050000；2 石家庄市第一医院；3 邯郸市中心医院)

目的 探讨Survivin、透明质酸受体介导的细胞游走受体(RHAMM)在胃癌发生、发展中的作用。方法 选择胃癌患者79例(观察组)、体检健康者120例(对照组)，取观察组胃癌组织标本、对照组正常胃组织标本，采用免疫组化法检测两组组织标本中Survivin、RHAMM的表达，并分析Survivin、RHAMM表达与胃癌患者临床病理参数的关系及二者的相关性。结果 观察组Survivin、RHAMM阳性表达率分别为70.89%(56/79)、68.35%(54/79)，对照组分别为9.17%(11/120)、2.50%(3/120)；两组比较P均<0.05。胃癌组织中Survivin、RHAMM阳性表达与肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期均有关(P均<0.05)，与患者性别、年龄、组织分化程度均无关(P均>0.05)。 胃癌组织Survivin阳性表达与RHAMM阳性表达呈正相关(r=0.452，P<0.05)。结论 Survivin、RHAMM参与了胃癌的发生、发展及转移过程，其在胃癌组织中的表达可作为胃癌早期诊断、治疗及评估预后的指标之一。

胃癌；Survivin；透明质酸受体介导的细胞游走受体

胃癌的早期确诊率较低，多数患者就诊时已出现不同程度的淋巴结转移或远处转移[1]。因此，探寻胃癌的生物学标志物对其早期诊断具有重要意义[2]。Survivin是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的新成员之一， 在人类许多的肿瘤组织中均有表达；透明质酸受体介导的细胞游走受体(RHAMM)是继CD44之后发现的一种可溶性透明质酸结合蛋白。近年来研究发现，RHAMM通过介导透明质酸对肿瘤细胞迁移的作用，参与多种肿瘤的发生、发展过程，与细胞增殖、迁移、信号转导、黏附、转移密切相关[3，4]。但目前国内外鲜见关于Survivin、RHAMM在胃癌组织中表达情况及二者关系的报道。本研究观察胃癌组织中Survivin、RHAMM的表达，并分析其与患者临床病理参数的关系，探讨二者在胃癌发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2012年2月～2014年2月河北医科大学第二医院胃肠外科收治的胃癌患者79例(观察组)，均经术后组织病理检查明确诊断，术前均未接受过放化疗及其他药物治疗。其中男51例、女28例，年龄43～76(57.9±10.3)岁；TNM分期(2009年国际抗癌联盟分期标准)：Ⅰ期9例，Ⅱ期23例，Ⅲ期36例，Ⅳ期11例；组织分化程度：低分化37例，中分化28例，高分化14例；伴有淋巴结转移51例。同期另选在该院体检健康者120例(对照组)，男83例、女37例，年龄38～77(58.6±9.2)岁。两组性别、年龄具有可比性。本研究经医院医学伦理学委员会批准，患者及家属均知情同意。

1.2 Survivin、RHAMM表达检测 采用免疫组化法。观察组取手术切除的胃组织标本、对照组取胃镜活检胃组织标本，标本经甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，二甲苯常规脱蜡，不同浓度梯度乙醇水化，3%双氧水阻断过氧化物酶，最后在pH 6.0的枸橼酸缓冲液中高温煮沸进行抗原修复。按照说明书常规行SP染色，DAB显色，苏木素复染。以已知阳性组织作为阳性对照，以PBS替代一抗作为阴性对照。Survivin、RHAMM阳性表达定位于细胞膜和(或)细胞质内，呈棕黄色颗粒[5]。随机计数5个高倍镜视野或1 000个细胞，根据染色强度和阳性细胞百分比综合计分。染色强度：不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。阳性细胞百分比[6]：无阳性细胞为0分，阳性细胞≤10%为1分，>10%～≤50%为2分，>50%～≤80%为3分，>80%为4分。两项积分相乘≥6分为高表达、<6分为低表达。分析Survivin、RHAMM表达与胃癌患者临床病理参数的关系及二者表达的相关性。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件。计数资料以率表示，比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman相关分析法。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

观察组Survivin、RHAMM阳性表达率分别为70.89%(56/79)、68.35%(54/79)，对照组分别为9.17%(11/120)、2.50%(3/120)，两组比较P均<0.05。胃癌组织Survivin、RHAMM阳性表达与患者性别、年龄、组织分化程度均无关(P>0.05)，均与肿瘤体积、浸润深度、淋巴结转移、病理分期均有关(P均<0.05)，见表1。Spearman相关分析显示，胃癌组织中Survivin阳性表达与RHAMM阳性表达呈正相关(r=0.452，P<0.05)。

表1 胃癌组织中Survivin、RHAMM表达与患者临床病理参数的关系(例)

3 讨论

胃癌是多种基因共同作用的复杂生物学过程[7]。随着分子生物学技术的发展，胃癌的发生、发展及其转移的分子机制成为当前研究的热点。

Survivin是IAPs中结构较为独特的一员，具有抑制细胞凋亡、调节细胞周期和细胞分裂的功能[8]。Survivin参与抗凋亡的作用机制主要包括：通过抑制caspase-3、caspase-7等不同凋亡蛋白酶的活性以阻止凋亡信号来避免细胞凋亡；在细胞有丝分裂发生的前期与纺锤体的微管特异性结合，避免细胞周期G2/M期检测点对肿瘤细胞的监控，继而抵抗DNA损伤和突变所致的细胞凋亡，最终促进肿瘤细胞的异常分裂和增殖[9]。RHAMM作为透明质酸的促转移受体，主要分布在细胞膜的表面及细胞质和细胞核中。有研究显示，RHAMM在乳腺癌、结直肠癌等恶性肿瘤组织中均有不同程度表达，说明RHAMM参与了恶性肿瘤的发生及发展过程[10]。但目前关于二者在胃癌组织中表达的报道较少。

本研究结果显示，观察组Survivin、RHAMM阳性表达率明显高于对照组，说明Survivin、RHAMM可能均参与了胃癌的发生、发展过程，与其他相关研究[11～14]结果一致。本研究还发现，胃癌组织Survivin、RHAMM阳性表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期有关，与患者性别、年龄、组织分化程度无关；即肿瘤直径越大、浸润程度越深、临床病理分期越高，Survivin、RHAMM阳性表达率越高，伴有淋巴结转移者Survivin、RHAMM阳性表达率明显升高，与其他相关研究[15，16]结果一致。本研究结果显示，Survivin与RHAMM在胃癌组织中的阳性表达呈正相关，说明Survivin、RHAMM在胃癌的发生、发展过程中具有协同作用，但其具体机制仍需进一步深入研究。

综上所述，胃癌组织中Survivin、RHAMM表达升高，二者的表达变化参与胃癌的发生、发展及转移过程，二者可作为胃癌早期诊断、治疗及评估预后的指标之一。

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河北省卫生厅指导计划项目(201000298)。

刘津(E-mail： liujin123123@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.28.018

R575.5

B

1002-266X(2016)28-0053-03

2016-04-26)