鲍鱼菇1号菌株耐硒特性研究

张柏松，宫志远，万鲁长，张海兰，郭惠东，黄春燕

（山东省农业科学院农业资源与环境研究所，山东省植物营养与肥料重点实验室，山东济南250100）

鲍鱼菇1号菌株耐硒特性研究

张柏松，宫志远，万鲁长，张海兰，郭惠东，黄春燕

（山东省农业科学院农业资源与环境研究所，山东省植物营养与肥料重点实验室，山东济南250100）

鲍鱼菇1号菌丝在不同培养基上对硒的耐受力不同，在PDA培养基上添加5ug/mlNa2SeO3·5H2O，对其菌丝生长基本没有影响，而添加10ug/mlNa2SeO3·5H2O，就可抑制其菌丝生长；在液体培养基中添加1ug/ml Na2SeO3·5H2O，可以提高菌丝体产量，超过2 ug/ml即可抑制菌丝产量；而在棉籽壳固体培养基中添加200-600mg/kg Na2SeO3，菌丝生长速度与对照相似，但现蕾时间提前2-3天，Na2SeO3浓度超过1200mg/ kg，则可显著抑制菌丝生长，延迟现蕾。

鲍鱼菇1号；耐硒特性

硒是人体不可缺少的微量元素之一,耕作土壤缺硒是全世界广泛存在的问题，在我国有72%的国土为不同程度的缺硒区，形成食物链的普遍低硒状态[1，2]。鲍鱼菇作为一种食、药兼用的珍稀食用菌，适合夏季栽培，高抗病虫害，以鲍鱼菇作为富硒载体，培养富硒鲍鱼菇，即可避免夏季栽培普通食用菌易生病虫害、产量低、品质差、或被迫施药造成农药残留的缺点，又可提供富硒功能产品，成为餐桌新选择。不同的鲍鱼菇菌株对硒的耐受能力不同，本研究对前期研究筛选出的耐硒能力强，生物学效率较高的鲍鱼菇1号菌株进行了耐硒特性及驯化研究，为进一步开发利用该菌株提供科学的理论依据[3]。

1 材料和方法

1.1 供试菌种鲍鱼菇1号，由本所选育。

1.2 供试培养基

PDA培养基:土豆200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，蒸馏水1000mL。

液体培养基：土豆200g，葡萄糖20g，KH2PO41.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，蛋白胨3g，蒸馏水1000mL。

固体培养料：棉籽壳88g，麦麸10g,石灰1g,石膏1g,水130mL供试试剂 Na2SeO3·5H2O及其他化学试剂均为国产分析纯。

1.3 试验处理

1.3.1 平板培养：在PDA培养基中添加不同量的Na2SeO3·5H2O制成不同浓度的富硒培养基，用试管定量分装20mL，灭菌后倾倒于直径90mm的培养皿中，制成富硒培养基平板，备用。

取供试保藏菌种，挑取一小块转接至PDA平板培养基上，置于28℃下培养。当菌落直径长至6～ 7cm时，在菌落边缘打取直径为5mm的菌圆片接种于各处理培养基平板上，置28℃恒温培养箱培养。

1.3.2 液体培养：将系列浓度的Na2SeO3·5H2O溶液与定量液体培养基混匀,制成Na2SeO3·5H2O含量分别为：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9ug/mL的培养基，分装三角瓶，100 mL /250mL, 25℃，120rpm振荡培养7天。

1.3.3 不同富硒固体培养料对鲍鱼菇菌丝生长的影响

将系列浓度的Na2SeO3溶液与定量固体培养料混匀，制成Na2SeO3含量分别为：0、200、400、600、800、1000、1200、1400、1600mg/Kg的培养基。分装入22*200mm的大试管中，每支试管装湿料20g。灭菌接种后置28℃恒温箱培养，菌丝发满试管后，置25-32℃下自然光照继续培养，观察各处理现蕾时间。

1.4 数据测定与统计

平板培养各处理于恒温培养箱培养至第3天时在菌落边缘划一条起始生长线，继续培养至菌落边缘距培养皿边缘约0.5-1cm时，在菌落边缘再划一条终止线，量取两线之间的距离，计算菌丝日均生长速度并观察菌丝长势。

液体培养7天后，过滤收集菌丝体并烘干称重、测定菌丝含硒量、计算硒回收率。

硒回收率=（富硒菌丝中含硒量-空白对照菌丝中含硒量）×富硒菌丝干重/（培养基中硒浓度*培养基体积）×100%

棉籽壳固体培养，当菌丝封面并长入料内1-2cm时，沿着菌丝前端划一条起始生长线后，继续培养，当菌丝前段距培养料底部约1cm时，再划一条终止线。测量起始线与终止线之间的距离，计算菌丝日均生长速度。

2 结果与分析

2.1 鲍鱼菇在不同浓度富硒平板培养基上的耐受力

由表1可以看出，在PDA培养基上添加5ug/ mlNa2SeO3·5H2O对鲍鱼菇菌丝生长基本没有影响，添加10ug/mlNa2SeO3·5H2O即可抑制鲍鱼菇菌丝生长，随着硒浓度的继续增加，受抑制作用越大。

表1 不同浓度富硒平板培养基对鲍鱼菇菌丝生长的影响

2.2 不同浓度富硒液体培养基对鲍鱼菇菌丝生长的影响

由表2可知，培养液中添加1ug/mlNa2SeO3· 5H2O对鲍鱼菇菌丝生长有促进作用，当Na2SeO3· 5H2O浓度高于2ug/ml时，即可抑制鲍鱼菇菌丝生长。鲍鱼菇对硒具有较强的富集能力，随培养液Na2SeO3·5H2O浓度的增加，菌丝含Se4+量增加，但同时菌丝产量降低，硒回收率亦降低。

表2 不同含硒量液体培养基对鲍鱼菇菌丝生长的影响

2.3 鲍鱼菇在不同浓度富硒棉籽壳固体培养基上的耐受力

由表3可以看出当Na2SeO3浓度为200mg/kg时对鲍鱼菇菌丝生长基本无影响，Na2SeO3浓度为400-1000mg/kg时，对菌丝生长有轻微抑制作用，高于1200mg/kg时则有明显抑制作用，Na2SeO3浓度为200-600 mg/kg时，可以促进现蕾，超过1200 mg/kg则现蕾期延长。

表3 鲍鱼菇在富硒固体培养料上的生长特性

3 结论与讨论

本研究表明鲍鱼菇菌丝在不同培养基中对硒的耐受力不同，在液体培养基中，鲍鱼菇对硒的耐受力较低，在固体培养基中，对硒的耐受力较高。在PDA培养基上添加5ug/mlNa2SeO3·5H2O对鲍鱼菇1号菌丝生长基本没有影响，添加10ug/mlNa2SeO3· 5H2O即可抑制鲍鱼菇1号菌丝生长；在液体培养基中添加1ug/ml Na2SeO3·5H2O可以提高菌丝体产量，超过2 ug/ml即可抑制菌丝产量；在棉籽壳固体培养基中添加200-600mg/kg Na2SeO3，菌丝生长速度与对照相似，但现蕾时间提前2-3天，亚硒酸钠浓度超过1200mg/kg，则可显著抑制菌丝生长，延迟现蕾。实际生产中可根据生产目的选用不同培养基配方进行生产，以栽培获得鲜食鲍鱼菇子实体的栽培料中Na2SeO3添加量以10mg/kg为宜，此时子实体硒含量在0.25mg/kg左右，每人每日食用富硒鲍鱼菇子实体200-1000g可满足需求，每日食用不超过1600g可保证安全[3]。

经硒驯化培养的菌种，能使其耐硒能力发生显著的提高，因此若要提高鲍鱼菇的富硒能力可先在低硒培养基上培养，再进行富硒栽培[4，5]

[1]胡锦心.硒的生物学作用及临床意义[J].药学通报,1988 （4): 203-206.

[2]谭见安.中国的医学地理研究[M].北京:中国医药科技出版社, 1994，14-15.

[3]黄春燕，万鲁长，宫志远等.鲍鱼菇富硒栽培适宜菌株筛选[J].山东农业科学，2014,46（11）：54-56

[4]魏华，谢俊杰，傅金衡.灵芝富硒培养研究［J］.食用菌，1996,18（3）：7-8.

[5]凌宏通，曾振基，宋斌，等.蛹虫草的富硒栽培技术初步研究［J］.中国食用菌，2006，25（4):52-53.

Exploration Selenite tolerance of Pleurotus abalones strain1

ZHANG Baisong，GONG zhiyuan，WAN Luzhang，ZHANG Hailan，GUO Huidong，HUANG Chunyan
（Institute of Agricultural Resources and Environment, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100, China Key Laboratory of Agro-Environment in Huang-Huai-Hai Plain, Ministry of Agriculture, Jinan Shandong 250100, China）

The Selenite tolerance of mycelium of Pleurotus ostreatus in different culture medium was investigated. The growth of mycelium in Potato-Dextrose-Agar solid medium with 5ug/ml Na2SeO3·5H2O was not influenced, while inhibited in solid medium with 10 ug/ml Na2SeO3·5H2O; the growth of mycelium in liquid medium with 1 ug/ml Na2SeO3·5H2O was promoted, while inhibited in medium with 2 ug/ml Na2SeO3·5H2O; The growth of mycelium in cotton seed hull solid medium with 200-600mg/kg Na2SeO3· 5H2O was similar as the control group, but the budding stage was delayed 2-3 days. However, the growth of mycelium in cotton seed hull solid medium with above 1200 mg/kg was inhibited obviously, and the budding stage was also delayed.

Pleurotus abalones strain 1;Selenite tolerance

Q-3

A

2095-7327（2016）-03-0026-03

张柏松（1962－），男，山东菏泽人，山东省农业科学院研究员，从事食用菌栽培、病虫害防治、农业微生物等方面的研究。通讯作者：黄春燕。

山东省农业良种工程项目“食用菌新品种选育”（2011LZ006-04)；山东省济南市科技计划专项“高温富硒食用菌标准化高效栽培技术研究与开发”（20100426）。

冯惟榘