门诊患者血培养病原菌分布及耐药性分析

吴庆，陈栎江，徐春泉，周翠，张雪青，余方友，周铁丽（温州医科大学附属第一医院　医学检验中心，浙江　温州　325015）



门诊患者血培养病原菌分布及耐药性分析

吴庆，陈栎江，徐春泉，周翠，张雪青，余方友，周铁丽
（温州医科大学附属第一医院医学检验中心，浙江温州325015）

[摘 要]目的：了解本院门诊患者血培养阳性标本的病原菌分布及耐药情况，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法：采用BacT/Alert 3D全自动血培养仪进行血培养，VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析系统进行菌株的鉴定和药敏试验，使用Whonet 5.6软件进行耐药率分析。结果：从7 774瓶门诊血培养送检标本中共分离出病原菌1 221株，培养阳性率为15.7%，剔除重复株后阳性菌株为569株。其中革兰阴性菌325株（占57.1%），包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌，分别占25.0%、12.8%和3.3%，并检出沙门菌12株、创伤弧菌5株和布鲁氏菌3株；革兰阳性菌237株（占41.7%），包括表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和人葡萄球菌等，分别占10.5%、6.2%和5.1%；真菌7株（占1.2%）。病原菌的耐药率相对来说较低，肺炎克雷伯菌的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性率为11.1%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离率为28.6%，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药率小于1.0%，未发现耐万古霉素葡萄球菌。结论：门诊患者血培养的主要病原菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌，并且这些细菌对临床常用抗菌药物有较好的敏感性。

[关键词]血培养；血流感染；病原菌；耐药性

血流感染（bloodstream infection，BSI）属严重感染性疾病，病情凶险，病死率高。血培养是BSI诊断、治疗和病情监测的关键，对临床医师合理使用抗菌药物，控制BSI病原菌耐药株的产生和发展，具有十分重要的临床意义[1]。为此，本研究对温州医科大学附属第一医院2011年7月-2014年6月期间从门诊BSI患者的血培养标本中分离到的非重复病原菌569株，对其菌群分布及耐药性进行回顾性分析。现将结果报告如下。

1　材料和方法

1.1菌株来源 收集2011年7月-2014年6月期间温州医科大学附属第一医院门诊送检的7 774瓶血培养标本。

1.2仪器与试剂 BacT/Alert 3D全自动血培养仪及其配套血培养瓶，VITEK 2 COMPACT型全自动微生物分析仪及配套用细菌鉴定卡和药敏卡均购自法国生物梅里埃公司。头孢哌酮-舒巴坦和替考拉宁药敏纸片购自英国Oxoid公司。

1.3菌株培养鉴定及药敏 按《全国临床检验操作规程》进行操作。无菌操作抽取静脉血10～20 mL迅速注入到血培养瓶（需氧瓶和厌氧瓶）中（有条件者，可采集两套或三套的血培养），立即送检，将血培养瓶置于全自动血培养仪中进行培养，对阳性报警标本接种分离细菌。使用全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验。头孢哌酮-舒巴坦和替考拉宁的药敏试验采用纸片扩散法（K-B法），药敏结果判断根据CLSI 2011年标准[2]判读，质量控制以金黄色葡萄球菌ATCC 25923、大肠埃希菌ATCC 25922和铜绿假单胞菌ATCC 27853（均购自卫生部临床检验中心）为标准菌株。

1.4统计学处理方法 使用Whonet5.6软件进行耐药率分析。

2　结果

2.1病原菌的检出与分布 从7 774瓶门诊患者血培养标本中培养分离病原菌1 221株，阳性率为15.7%，剔除重复菌株后为569株。其分布及构成比见表1。

2.2多药耐药菌检出率 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检出率分别为49.6%和11.9%；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林的表皮葡萄球菌和耐甲氧西林人葡萄球菌的检出率分别为28.6%、57.1%和76.0%。

2.3耐药率 主要革兰阴性菌及革兰阳性菌对常用抗菌药物的耐药率见表2-3。

3　讨论

BSI是一种严重的全身感染性疾病，如果不及时治疗，患者的病死率高，危害重。国内外有很多文献关于血培养病原菌的菌株分布及耐药性分析，但很少有提到门诊患者血培养的情况。

本研究结果显示，7 774例门诊患者血培养中，共检出病原菌1 221株，检出率为15.7%，远高于国内一些文献[3-4]的报道；革兰阴性菌的检出率高于革兰阳性菌，与文献[5-7]报道血培养分离病原菌的分布趋势较为一致。其中，检出的革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、沙门菌属为主；革兰阳性菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及人葡萄球菌为主，表皮葡萄球菌和人葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌是导管相关性血流感染（catheter related blood stream infection，CRBSI）的主要病原菌，因为门诊患者大多没有留置导管，并且这些凝固酶阴性葡萄球菌都是以单瓶血培养报阳性为主，所以笔者认为从门诊患者血培养中检到的凝固酶阴性葡萄球菌大部分是由于消毒不完全而导致的污染菌，而并非正常的病原菌；共检出了7株真菌，只占所有病原菌的1.2%，这提示门诊患者由真菌引起的BSI的比例是比较低的。

表1　血培养阳性病原菌的分布及构成比

本次研究还检出了5株创伤弧菌和3株布鲁氏菌。创伤弧菌所致的败血症病死率超过50.0%，所以如果检到创伤弧菌一定要及时通知临床，为患者的及时治疗提供病原学依据。布鲁氏菌是布鲁氏菌病的病原体，布鲁氏菌病主要发生在我国西部和北部的牧区，而我们本次研究的所在地为温州市，属

于我国的东南沿海城市，过去很少发现布鲁氏菌病，而近3年，我院门诊发现了3例该病例，因此临床医师尤其是感染科的医师对此一定要特别关注。布鲁氏菌对人有极强致病力，常导致实验室获得性感染。为了减少实验室感染的发生，所有的血培养阳性标本的操作都应在生物安全柜内进行。

表2　主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

表3　主要革兰阳性球菌对抗菌药物的耐药率

本次研究的药敏结果显示，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物高度敏感，对厄他培南和亚胺培南的耐药率均小于1.0%，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs检出率分别为49.6%和11.9%，远低于卫生部全国细菌耐药监测网的数据[8]。除了大肠埃希菌对部分临床常用的抗菌药物的耐药率在50.0%以上，其他的肠杆菌科细菌如肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和沙门菌属细菌的耐药率大部分都在20.0%以下。提示临床常用抗菌药物对门诊BSI患者分离到的肠杆菌科细菌具有较好的抗菌活性。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率为28.6%，也远低于卫生部全国细菌耐药监测网的数据[8]；金黄色葡萄球菌除了对青霉素、克林霉素和红霉素的耐药率较高外，对于其他的临床常用抗菌药物都有较好的敏感性。

综上所述，门诊BSI患者的常见病原菌以肠杆菌科细菌和金黄色葡萄球菌为主，并且这些病原菌的耐药率远低于住院BSI患者的病原菌，所以临床医师应根据药敏试验结果合理选择抗菌药物，从而减缓或避免耐药菌株的出现。

参考文献:

[1]RIEDEL S,CARROLL K C.Blood cultures:key elements for best practices and future directions[J].J Infect Chemother,2010,16(5):301-316.

[2]Clinical Laboratory Standard Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].CLSI,2011.

[3]郑卫东,袁仕伟,李莲.1368例血培养标本病原菌种类及耐药性分析[J].国际检验医学杂志,2011,32( 18):2099 -2101．

[4]李学文,孙伏喜,赵水娣,等.2008-2011年495份血培养标本病原菌分布及其耐药性[J].中华医院感染学杂志,2012,22(23):5396-5398.

[5]夏涵,刘智勇,任章银,等.24141份血培养病原菌的分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2012,22(20):4607-4610.

[6]强雪芹,张爽,辛力华,等.2011-2012年血培养病原菌分布及耐药性变迁[J].中华医院感染学杂志,2014,24(1):36-38.

[7]姚丹,余方友,黄晓颖,等.引起血流感染的大肠埃希菌的耐药谱分析[J].温州医科大学学报,2014,44(12):917 -919.

[8]吕媛,李耘,薛峰,等.卫生部全国细菌耐药监测网(Mohnarin)2011-20 12年度血流感染细菌耐药监测报告[J].中国临床药理学杂志,2014,30(3 ):278-288.

（本文编辑：吴昔昔）

·消息·

Distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in outpatients

WU Qing,CHEN Lijiang,XU Chunquan,ZHOU Cui,ZHANG Xueqing,YU Fangyou,ZHOU Tieli.Center for Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou,325015

Abstract:Objective:To investigate distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in outpatients,to provide reference for the clinical rational use of antibiotics.Methods:Blood samples were cultured by BacT/Alert 3D automated system,the identification of strains and the drug susceptibility testing were performed by VITEK 2 COMPACT system,the data were analyzed with Whonet 5.6 software.Results:Totally 1 221 strains were isolated from 7 774 blood culture specimens in outpatients,with the positive rate of 15.7%,there were 569 positive cultures after the repeated strains were get rid of.Among the bacterial strains ,the percentages of the gram-negative bacteria,gram-positive bacteria and fungi were 57.1% (325 strains),41.7% (237 strains) and 1.2% (7 strains),respectively.Pathogenic bacteria resistance rate was relatively low,the positive rate of ESBLs in Klebsiella pneumoniae was 11.1%,resistance of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolation rate was 28.6%; separation of Enterobacteriaceae to carbapenem antibacterial drug resistance＜1.0%,vancomycin resistant Staphylococcus aureus did not be found.Conclusion:The main pathogens of outpatient blood culture are Staphylococcus aureus,Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae,and these bacteria are better sensitivity to commonly used antibiotics in clinical practice.

Key words:blood culture; bloodstream infection; pathogen; drug resistance

作者简介：吴庆（1979-），男，浙江温州人，主管技师。

基金项目：温州市科技局科研基金资助项目（Y20130286）。

收稿日期：2015-05-19

[中图分类号]R378

[文献标志码]B

DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.03.014