多种抗体检测在自身免疫性甲状腺疾病中的临床应用

王秋波 刘君茹 聂 兴



多种抗体检测在自身免疫性甲状腺疾病中的临床应用

王秋波 刘君茹 聂 兴

【摘要】目的 探讨多种抗体检测在自身免疫性甲状腺疾病（AITD）中的临床应用。方法 选取2013年7月至2015年7月辽宁锦州市中心医院收治的AITD患者123例，根据疾病类型分为弥漫性毒性甲状腺疾病组65例（A组）和桥本甲状腺炎组58例（B组），同时选取同期单纯性甲状腺肿患者40例为C组，自身免疫性疾病患者42例为D组，体检的健康者40例为对照组，比较各组患者的甲状腺过氧化酶抗体（TPOAb）、促甲状腺激素受体抗体（TRAb）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体（AMA）的水平。结果 A组、B组患者的TPOAb、TRAb、TGAb阳性率及水平明显高于C组、D组、对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；A组、B组、C组、D组患者ANA阳性率及AMA阳性率明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），各组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 通过对TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平测定，可以对AITD免疫紊乱进行观察，TPOAb、TRAb、TGAb水平检测可以作为诊断AITD的重要依据。

【关键词】自身免疫性甲状腺疾病；抗体检测；临床应用

辽宁锦州市中心医院检验科，辽宁锦州 121000

弥漫性毒性甲状腺疾病（GD）、桥本甲状腺炎（HD）是较为常见的一类在环境因素与遗传因素共同作用下发生的自身免疫性疾病，属于器官特异性自身免疫性甲状腺疾病（AITD），本病的共同点是患者血清中出现了很多针对甲状腺组织的自身抗体[1]。为了进一步了解这些抗体对甲状腺疾病的诊疗价值，本研究就AITD患者的相关抗体进行检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年7月至2015年7月辽宁锦州市中心医院收治的AITD患者123例，根据疾病类型分为两组：弥漫性毒性甲状腺疾病（GD）组65例（A组），其中女30例，男35例，年龄28～56岁，平均（37±10）岁；桥本甲状腺炎（HD）组58例（B组），其中女25例，男33例，年龄27～56岁，平均（37±10）岁。选取同期单纯性甲状腺肿患者40例为C组，其中女19例，男21例，年龄26～57岁，平均（36±10）岁；自身免疫性疾病患者42例为D组，其中女18例，男24例，年龄27～58岁，平均（38±11）岁；健康体检者40例为对照组，其中女20例，男20例，年龄29～59岁，平均（39±11）岁。各组受试者性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法 各组受试者均抽取空腹静脉血4～5 ml，采用罗氏E601电化学发光仪及配套试剂，采用电化学发光法测定甲状腺过氧化酶抗体（TPOAb）、促甲状腺激素受体抗体（TRAb）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）水平，操作步骤：运用电化学发光仪观察抗体标志物，以此明确其性质。采用欧蒙进口试剂，用免疫荧光法对受试者抗核抗体（ANA）及抗线粒体抗体（AMA）水平进行测定，操作步骤：①准备：检查加样板，恢复生物载片的室温状态，并予以标记；②稀释：稀释血清，并设阴性对照和阳性对照；③加样：在泡沫塑料板上放置加样板，添加25 μl稀释后的血清，防止出现气泡，然后开始温育；④温育：在加样板的凹槽上盖生物薄片，开始反应后温育30 min；⑤冲洗：冲洗生物薄片，然后浸入PBS缓冲液中至少1 min；⑥加样：滴加20 μl荧光素标记的抗人球蛋白，加完后温育，然后冲洗1 min；⑦封片：将盖片置于泡沫塑料板的凹槽内，滴加磷酸缓冲盐溶液（PBS缓冲液），每个反应区10 μl，然后用纸擦干四周与背面，将其置于盖玻片上，继续制作下1个载片；⑧在荧光显微镜下进行观察。

1.3 观察指标 观察并记录各组受试者的TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平。

1.4 统计学分析 采用SPSS 22.0统计软件进行数据处理，TPOAb、TRAb、TGAb水平以±s表示，组间比较采用t检验，各抗体阳性率以百分率表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TPOAb、TRAb、TGAb阳性率及水平比较 A组、B组患者的TPOAb、TRAb、TGAb阳性率及水平明显高于C组、D组、对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1　各组TPOAb、TRAb、TGAb阳性率及水平比较(?±s)

2.2 ANA及AMA阳性率比较 A组、B组、C组、D组患者的ANA阳性率及AMA阳性率明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组、B组、C组、D组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2　各组ANA阳性率及AMA阳性率比较(％)

3 讨论

甲状腺功能亢进症患者中约85％为GD患者，多集中于成年女性，其发病率约为女性群体的1.9％，男女比例为1:6～1:4，多见于20～40岁女性。GD是一种器官特异性自身免疫性疾病，在遗传因素、环境因素的相互作用下，机体免疫系统对自身发生免疫应答的疾病状态。发生GD时，患者体内可查出TRAb、TGAb等多种自身抗体，其中TRAb的作用最重要[2]。TRAb主要由甲状腺内淋巴细胞产生，作用于促甲状腺激素受体上，在环磷腺苷的介导下，增加T3、T4的合成和分泌。因此，随着TRAb活性的增强，T3、T4浓度也越来越高，致使Grave病患者系统兴奋性增强，表现出代谢亢进。

HD与GD一样，均为与遗传有关的一种AITD，两者发病机制大致相同，其临床表现与GD基本一致，很难鉴别。血清TPOAb及TRAb对HD的诊断价值非常高，凡是患者具有典型的临床症状，只要血清中TPOAb或TRAb显示为阳性，即可以确诊[3]。

AITD作为一种典型的器官特异性自身免疫性疾病，可以在患者血清中测定出多种自身抗体，但AMA、ANA等部分抗体的阳性率较低，临床研究价值不高[4]。本研究结果显示，AITD患者血清TPOAb、TRAb、TGAb阳性率及水平明显高于单纯性甲状腺肿患者、自身免疫性疾病患者与健康对照组，差异有统计学意义；ANA阳性率及AMA阳性率明显高于健康对照组，差异有统计学意义；而与其他疾病相比，差异无统计学意义。在AITD的发生、发展、转归、诊断等方面，上述抗体均发挥了一定的作用，值得进行深入研究[5]。

本研究显示，在AITD患者血清中，TPOAb阳性率为87.7％～96.6％，与既往研究[6]结果基本一致。在AITD患者中，TPOAb是细胞毒性作用的主要抗体，能够借助补体依赖的细胞毒性作用损伤甲状腺细胞。此外，在甲状腺素合成过程中，甲状腺过氧化酶发挥着十分重要的作用，而甲状腺过氧化酶与TPOAb结合之后，就会产生抑制效果，导致甲状腺素合成逐渐下降，在负反馈的作用下，使机体促甲状腺激素分泌不断增多，因此两者的变化是同步的[7]。本研究发现，TPOAb和TGAb有密切的联系，两者变化十分相似，在临床诊断中，两者联用的价值非常高。

综上所述，通过对TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平测定，可以对AITD免疫紊乱进行观察，TPOAb、TRAb、TGAb水平检测可以作为诊断AITD的重要依据。

参考文献

[1] 马慧英.自身免疫性甲状腺疾病多种抗体检测的临床探讨[J].军医进修学院学报,2011,32(9):937-938,940.

[2] 胡华杰.血清抗甲状腺过氧化物酶抗体检测在自身免疫性甲状腺疾病诊断中的意义[J].现代实用医学,2010,22(5):527-528.

[3] 刘学军.血清甲状腺过氧化物酶抗体检测在孕妇自身免疫性甲状腺功能紊乱中的价值[J].现代中西医结合杂志,2014,23(19): 2148-2150.

[4] 左文标,杜安业,曹玉芝,等.甲状腺抗体检测在GD病与桥本甲状腺炎诊断中的意义[J].中国基层医药,2014,21(21):3301-3302.

[5] 刘超,陈立立,董吉祥,等.甲状腺过氧化物酶抗体检测的临床意义[J].中华内分泌代谢杂志,2010,26(2):171-174.

[6] 黄红,唐静.自身免疫性甲状腺疾病诊断中血清促甲状腺受体抗体检测的意义[J].临床医学,2012,32(6):14-15.

[7] 黄慧,王婷玉.抗甲状腺球蛋白抗体及抗甲状腺过氧化物酶抗体检测自身免疫性甲状腺疾病的临床意义[J].中国保健营养(下旬刊),2013,23(9):4858-4859.

【中图分类号】R581

【文献标志码】A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.04.091