小儿增食灵口服液质量标准研究

刘 滢，石丽君，窦 霞

甘肃中医药大学附属医院，甘肃 兰州 730020

小儿增食灵口服液质量标准研究

刘 滢，石丽君，窦 霞

甘肃中医药大学附属医院，甘肃 兰州 730020

目的：制备小儿增食灵口服液，并制定其质量控制方法。方法：用薄层色谱法对方中苍术及茯苓进行鉴别，HPLC法测定甘草酸含量。结果：建立的薄层色谱法能够对方中苍术及茯苓准确定性，甘草酸的含量测定法能够快速准确地对方中甘草定量测定，加样回收率为99.09%，RSD为0.87%。结论：该方法可用于小儿增食灵口服液的质量控制。

小儿增食灵口服液；质量标准；甘草酸胺

小儿增食灵口服液是在国家级名老中医张士卿教授多年临床经验方的基础上研制而成，是张士卿教授将厌食症机理与“脾健不在补而贵在运”的指导思想相结合,经过多年临床应用创制而成。其临床效果良好，使用广泛。为更好控制本制剂质量，课题组开展了小儿增食灵口服液质量标准研究。

1 仪器与试剂

Agilent 1100高效液相色谱仪(美国安捷伦科技公司)；MWD型紫外可见检测器(美国安捷伦科技公司)；Waters XTerra RP18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色谱柱；甘草酸铵对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110731-200205，供含量测定用)；甲醇、色谱纯(美国天地公司)；其余试剂均为分析纯。小儿增食灵口服液(甘肃中医药大学附属医院自制，批号：121010)。

2 方法与结果

2.1 处方 苍术、茯苓、鸡内金、乌梅、槟榔、甘草。

2.2 工艺制备［1］按处方称取以上6味药材，加水浸泡8～10小时后，用水蒸气蒸馏法收集蒸馏液300 mL，继续煎煮2小时，滤过，药渣再煎煮2次，1 h/次，合并3次煎煮液，滤过，滤液浓缩至600 mL，离心10分钟(3 000 r/min)，静置，取上清液，加苯甲酸钠，单糖浆搅拌溶解，加蒸馏水至1 000 mL，检验分装即得。

2.3 质量标准研究

2.3.1 性状 本品为棕色液体，味酸甜，略涩。

2.3.2 鉴别

2.3.2.1 苍术的薄层鉴别 取本品30 mL，加盐酸10 mL，置水浴上加热30分钟，立即冷却用30 mL氯仿提取2次，合并氯仿提取液，蒸干，加正己烷2 mL滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。另取除苍术以外的其他药材按制备工艺制成空白对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述新制备的供试品溶液、对照药材溶液、空白对照溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(20∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，并显有相同的污绿色主斑点(苍术素)，空白对照无干扰。

2.3.2.2 茯苓的薄层鉴别 取本品10 mL，浓缩至2 mL，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1 g，加水5 mL回流提取30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。取除茯苓以外的其他药材按制备工艺制成空白对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液、空白对照溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60～90℃)-乙醚(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，空白对照无干扰。2.3.3 检查［2］按合剂(《中国药典》2010年版一部附录IJ)项下有关规定，对小儿增食灵口服液进行装量差异及微生物限度等项目检查，结果符合相关规定。

2.3.4 小儿增食灵口服液中甘草酸含量测定

2.3.4.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；流动相为甲醇-0.2 mol/L醋酸铵-冰醋酸(67∶33∶1)；检测波长为250 nm。理论板数按甘草酸峰计算，应不低于5 000。

2.3.4.2 溶液的制备 对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含136 μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：精密量取装量差异项下本品10 mL，置25 mL容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。阴性对照品溶液制备：取阴性样品(缺青风藤)，按供试品溶液制备方法制备阴性供试品溶液。

2.3.4.3 系统适用性研究 在上述条件下，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，结果表明，阴性供试品对甘草酸峰无干扰。甘草酸峰理论塔板数大于5 000，分离度大于1.5，已达到基线分离，拖尾因子符合要求。见图1。

图1 本品HPLC色谱图

2.3.4.4 线性关系考察 精密称取甘草酸铵对照品15.70 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀。得浓度为628 μg/mL的标准品储备液，分别精密吸取上述溶液0.5，1.0，2.0，4.0，10 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别进样10 μL，以进样浓度为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。结果表明甘草酸在31.4～628 μg/mL范围内呈良好线性关系，回归方程为Y=4.859 2X+4.449 1，r=0.999 9。

2.3.4.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液(125.6 μg/mL)10 μL，重复进样6次，测得峰面积积分值，计算RSD=0.92%。

2.3.4.6 稳定性试验 取本品按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10 μL，分别于第0、1、2、4、8、12小时各进样一次，共进样6次，测得峰面积积分值，计算RSD=1.38%。结果表明供试品溶液在12小时内稳定。

2.3.4.7 重复性试验 精密量取本品6份，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10 μL，进行测定，计算含量，甘草酸平均含量为0.37 mg/mL，RSD=1.48%，结果表明该法测定甘草酸含量重复性良好。

2.3.4.8 加样回收率试验 精密量取本品6份，每份约5 mL，置25 mL容量瓶内，分别精密加入约2.0 mg的甘草酸铵对照品溶液2 mL，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，进行含量测定，并计算回收率。结果表明回收率符合要求(95%～105%)，表明该方法回收率良好，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

2.3.4.9 样品含量测定 取本品3批(批号：121010、121101、130103、)制剂样品，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，测定，计算，结果见表2。

表2 样品中甘草酸的含量测定结果

3 讨论

小儿厌食症是儿科常见病、多发病。中医理论认为，脾以运为健，胃以和为贵，小儿厌食，不仅责之脾气虚弱，脾运不健，同时还存在胃有食积，中焦气滞，湿困热郁，兼或虫症内扰等，以致胃失和降的病理变化。小儿增食灵口服液方中苍术味微苦，芳香悦胃，功能醒脾助运，开郁宽中，疏化水湿，正合脾之习性，故为君药；茯苓性平，作用和缓，可健脾补中，与苍术相配燥湿而不伤脾,补脾而不敛湿，又补中有运，补运结合；鸡内金消食化积；槟榔下气杀虫，二药配合，理气和胃，是谓臣药；乌梅助槟榔以安蛔，合甘草而化阴，故能生津而护胃，3药相合共为佐使。全方攻守相宜，动静相和，能使中焦调畅，健脾和胃，水谷精微得到运化，从而使厌食得愈。且现代药理研究亦表明［1］，苍术、茯苓含有丰富的多糖，能促进胃液分泌，增加胃肠激素分泌；鸡内金、槟榔能促进消化液分泌，增强胃肠蠕动；诸味合用，可促进胃肠消化功能，因而小儿厌食症得以治愈［3-5］。

本研究建立的薄层色谱法能够对方中苍术及茯苓准确定性，甘草酸的含量测定法能够快速准确地对方中甘草定量测定，加样回收率为99.09%，RSD为0.87%，该方法可用于小儿增食灵口服液的质量控制。

［1］ 董昆山.现代临床中药学［M］.北京：中国中医药出版社，1998：307-569.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：附录9.

［3］ 吴丽萍，王艳丽.小儿增食灵合剂对小儿厌食症动物模型胃蛋白酶活性和胃酸分泌量的影响［J］.中医儿科杂志，2007，3(3)：26-28.

［4］ 王晓玲，徐银伍，陈运峰.健儿消食口服液的质量标准研究［J］.中国药事，2004，18(10)：630-632.

［5］ 吴丽萍，任耀全，王艳丽.小儿增食灵合剂对小儿厌食症大鼠促胃液素水平的影响［J］.中国中西医结合消化杂志，2010，18(5)：297-299.

Study on Quality Standard of Children ZengShiLing Oral Liquid

LIU Ying,SHI Lijun,DOU Xia Affiliated Hospital of Gansu University of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730020,China

A

1004-6852(2016)11-0021-03

2015-12-27

刘滢(1963—)，女，主任药师。研究方向：医院药学。