118株肺炎链球菌的耐药性分析

曾金红，曾小青，李培敏

(东莞市石排医院检验科，广东东莞 523330)



·临床研究·

118株肺炎链球菌的耐药性分析

曾金红，曾小青，李培敏

(东莞市石排医院检验科，广东东莞 523330)

摘要:目的监测该院肺炎链球菌的耐药性，为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采集该院2010年1月至2014年12月门诊与住院感染患者痰液及咽拭子标本，培养、分离和鉴定肺炎链球菌。用法国生物梅里埃公司的ATB细菌鉴定及药敏仪进行菌种鉴定和药敏试验。结果共分离出118株肺炎链球菌，来自儿童患者肺炎链球菌70株，占59.3%，来自成人患者肺炎链球菌48株，占40.7%。分离自儿童的肺炎链球菌对青霉素不敏感率80.3%[耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)占28.6%；低耐青霉素肺炎链球菌(PISP)占57.1%]，高于分离自成人的肺炎链球菌70.8%的不敏感率(PRSP占41.6%，PISP占29.2%)，青霉素不敏感的菌株与青霉素敏感的菌株相比，容易表现出更多的耐药性。分离自儿童的肺炎链球菌对四环素、红霉素、克林霉素、复方磺胺甲噁唑的耐药率分别为 100.0%、100.0%、87.1%、75.7%，而分离自成人的肺炎链球菌对以上4种抗菌药物的耐药率均达到100.0%。结论该院分离的肺炎链球菌对青霉素的耐药性呈上升趋势，四环素、红霉素、克林霉素和复方磺胺甲噁唑已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。

关键词:肺炎链球菌；耐药性；青霉素不敏感菌

肺炎链球菌存在于人的喉部和鼻腔后部，大约40.0%的人携带此菌，能引发肺炎、菌血症和脑膜炎，对人类健康构成了一定威胁。近年来肺炎链球菌对抗菌药物耐药性呈上升趋势，并已出现多重耐药菌株，是临床感染控制中棘手的难题。为进一步做好本院感染管理及预防工作，了解本院肺炎链球菌感染及耐药状况，本研究分析了本院2010年1月至2014年12月临床分离的118株肺炎链球菌的耐药情况，为临床用药提供依据，现将结果报道如下。

1材料与方法

1.1菌株来源本院2010年1月至2014年12月分离出的118株肺炎链球菌，均来自痰液及咽拭子标本，其中70株来自成人患者，48株来自儿童患者(14岁以下)。

1.2质控菌株采用的质控菌株肺炎链球菌ATCC49619由原国家卫生部临检中心提供。

1.3仪器与试剂法国梅里埃生物分析仪ATB及配套试剂RapidID32STREP链球菌快速鉴定试剂条、ATBSTREP5药敏板。哥伦比亚血琼脂由广州迪景公司提供。

1.4肺炎链球菌的鉴定与药敏试验将标本种植于哥伦比亚血琼脂，置于35 ℃5%CO2培养和孵育18～24 h，挑选草绿色溶血、脐窝状的可疑菌落进行革兰染色、奥普托欣(Optochin)试验作初步鉴定，Optoehin试验阳性者采用链球菌快速鉴定试剂条进行鉴定。药敏试验按相关操作规程进行[1]，采用琼脂稀释，使用链球菌药敏板，按其操作指南进行，分别检测青霉素、阿莫西林、头孢噻肟、左氧氟沙星、四环素、红霉素、氯霉素、万古霉素等11种药物最低抑菌浓度(MIC)。肺炎链球菌ATCC49619标准菌进行质控。按照2010年美国临床和实验室标准协会(CLSI) M100-S20文件进行结果判断[2]：肺炎链球菌非脑膜炎，青霉素(胃肠道外)MIC≥8.00 g/L，为耐药(R)，称耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)；MIC=4.00 mg/L，为中介(I)，称低耐青霉素肺炎链球菌(PISP)；MIC≤2.00 mg/L，为敏感(S)，称青霉素敏感肺球菌(PSSP)。肺炎链球菌性脑膜炎，青霉素(胃肠道外)MIC>2.00 mg/L为R；MIC≤0.06 mg/L为S。PRSP和PISP为青霉素不敏感菌株。

1.5统计学处理采用梅里埃生物ATB NEW1.1软件进行数据处理及统计分析。

2结果

2.1呼吸道标本中肺炎链球菌分离率118株肺炎链球菌均分离自4 380份痰液及咽拭子标本，检出率为2.69%。

表1　　儿童患者肺炎链球菌对11种抗菌药物的

2.2成人与儿童患者肺炎链球菌耐药性差异70株肺炎链球菌来自儿童患者，占59.3%，青霉素不敏感菌株检出率为80.3%(PRSP占28.6%，PISP占57.1%)，儿童患者肺炎链球菌对11种抗菌药物耐药率见表1。48株肺炎链球菌来自成人患者，占40.7%，青霉素不敏感菌株检出率为70.8%(PRSP占41.6%，PISP占29.2%)，成人患者肺炎链球菌对11种抗菌药物的耐药率见表2。

表2　　成人患者肺炎链球菌对11种抗菌药物的

3讨论

长期以来青霉素都是治疗肺炎链球菌感染的首选药物，而近年来，由于抗菌药物在临床治疗上的大量使用及不当使用，导致肺炎链球菌对青霉素的耐药率不断增长，给临床治疗带来了一定的困难。

本研究结果显示儿童感染肺炎链球菌比率(59.3%)高于成人感染肺炎链球菌比率(40.7%)。儿童与成人感染肺炎链球菌对青霉素耐药率分别为28.6%、41.6%，对青霉素不敏感率分别为80.3%、70.8%，肺炎链球菌对青霉素不敏感率高于肖素坤等[3]和杨启文等[4]的报道；成人肺炎链球菌对青霉素、阿莫西林、头孢噻肟的耐药率高于儿童肺炎链球菌，与相关文献报道有差异[5-6]，可能是地区差异所导致。

本研究结果显示，儿童患者肺炎链球菌对万古霉素、左氧氟沙星、阿莫西林、头孢噻肟耐药率分别为100.0%、100.0%、28.6%、7.2%。万古霉素的不良反应较多，限制了其在临床上的应用，而左氧氟沙星可对儿童软骨发育造成损伤，因此，阿莫西林和头孢噻肟是治疗儿童肺炎链球菌的首选药物。分离自成人患者的肺炎链球菌对阿莫西林、头孢噻肟的耐药率分别为47.9%、31.3%，高于儿童患者肺炎链球菌，左氧氟沙星可作为治疗成人肺炎链球菌的首选药物[7]。儿童患者肺炎链球菌与成人患者肺炎链球菌对四环素、红霉素、克林霉素和复方磺胺甲噁唑的耐药率都非常高，表明这4种抗菌药物已不适合用于治疗肺炎链球菌感染。

肺炎链球菌对β-内酰胺类药物的耐药性主要由青霉素结合蛋白变异所致，非pbp基因突变也会导致对β-内酰胺类药物的耐药。肺炎链球菌耐大环内酯类抗菌药物的主要原因是ermB编码的23SrRNA甲基化酶致靶位改变。tetM基因编码蛋白质的核糖体保护作用,是肺炎链球菌四环素耐药的重要机制。DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ基因突变引起的靶位改变导致肺炎链球菌对氟喹诺酮类药物耐药。肺炎链球菌也存在氟喹诺酮耐药性主动外排系统，pmrA基因编码了外排PmrA。接合性转座子Tn1545的存在与菌株的红霉素和四环素耐药关系密切,可能是肺炎链球菌多重耐药的重要机制之一。

了解肺炎链球菌对抗菌药物的耐药状况及耐药机制，微生物室应当及时准确地对肺炎链球菌做出检测，并报告药敏结果，为临床合理使用抗菌药物提供依据。

参考文献

[1]叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程[M]．3版．南京：东南大学出版社，2006：767-768．

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.M100-S20 Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;Twentieth informational[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2010.

[3]肖素坤，赵春江，刘春林，等．我国成人和儿童中分离的肺炎链球菌的耐药性与血清型研究[J]．中华结核和呼吸杂志，2010，33(8)：601-607．

[4]杨启文，王瑶，陈民均，等．中国14家教学医院2005～2008年临床分离肺炎链球菌耐药性分析[J]．中华检验医学杂志，2011，34(6)：511-516．

[5]朱旭慧，孙自镛，李丽，等．肺炎链球菌的分布及耐药性分析[J]．现代检验医学杂志，2010，25(2)：100-102．

[6]张勇昌，张九进，陈月新，等．成人及儿童社区与医院获得肺炎链球菌的耐药性分析[J]．中华医院感染学杂志，2014，24(15)：3661-3662．

[7]张敏，朱小燕，王四利，等．肺炎链球菌感染的分布及耐药性分析[J]．检验医学，2013，28(12)：1147-1149．

(收稿日期：2015-12-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.049

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)06-0824-03