心脉康颗粒对腹主动脉狭窄致心衰大鼠心脏血流动力学的影响

2016-04-06陈玉兴曾巧煌黄雪君曾晓会黄丹娥甘海宁

中成药 2016年1期

关键词：血流动力学心力衰竭

陈玉兴，曾巧煌，黄雪君，曾晓会，姚楠，黄丹娥，甘海宁

（1.广东省中医药工程技术研究院，广东省中医药研究开发重点实验室，广东广州510095；2.广州中医药大学，广东广州510405）

心脉康颗粒对腹主动脉狭窄致心衰大鼠心脏血流动力学的影响

陈玉兴1，曾巧煌2，黄雪君1，曾晓会1，姚楠1，黄丹娥1，甘海宁1

（1.广东省中医药工程技术研究院，广东省中医药研究开发重点实验室，广东广州510095；2.广州中医药大学，广东广州510405）

摘要：目的观察心脉康颗粒对腹主动脉狭窄所致大鼠心力衰竭模型心功能的作用。方法选用SD大鼠50只，采用腹主动脉狭窄诱导法复制心衰大鼠模型，造模4周后随机分为模型组，芪苈强心胶囊组，心脉康颗粒高、中、低剂量组，并另设假手术组（对照组），开始给药，连续12周。然后，观察各组大鼠左心室收缩压（LVSP）、左室舒张末期压（LVEDP）、左室等容期压力变化速率峰值（±d p/d tmax）及大鼠血清中N-末端脑钠肽前体（NT-pro BNP）、肌钙蛋白I（cTnI）含有量，测定心脏指数。结果心脉康颗粒明显升高心衰大鼠LVSP和+d p/d tmax，以及LVEDP和-d p/ d tmax，降低心衰大鼠血清中NT-pro BNP、cTnI含有量和心脏指数。结论心脉康颗粒具有明显改善心衰大鼠心力衰竭的作用。

关键词：心脉康颗粒；心力衰竭；血流动力学

心力衰竭是各种心脏疾病导致心功能不全的一种综合征，该病患病率高，死亡率高，五年存活率与恶性肿瘤相仿，且其患病率在近期内仍将继续增长，是21世纪最重要的心血管病症之一［1］。中医认为久病使心之气阴不足或阳气受损，无力鼓动血脉，从而使血脉瘀阻，而痰、水、瘀等病理产物又进一步损及心之阴阳，从而形成恶性循环，因而心衰多属本虚标实，气虚、阳虚为本虚；标实以瘀血、水饮、痰浊居多［2］。心脉康颗粒由桂附理中丸加减而成，组方有人参、附子、肉桂、丹参、五味子、枳实、茯苓、罗布麻叶，具有益气温阳、活血利水等功效，临床用于气虚血瘀型心衰的治疗取得较好疗效。本实验主要对心脉康颗粒的强心作用进行动物实验观察，为心脉康颗粒临床治疗心衰提供实验依据。

1 材料与仪器

1.1 药品与试剂心脉康颗粒，由人参、附子、肉桂、丹参、五味子、枳实、茯苓、罗布麻叶中药饮片组成，由广东省中医研究所制剂室制备成颗粒剂提供使用，制剂折算成人日处方量24 g饮片，3.484 g饮片/g颗粒，批号20130316；芪苈强心胶囊（石家庄以岭药业股份有限公司，批号130405）；ELISA Kit for Rat NT-pro BNP、ELISA Kit forRat cTnI（上海西唐生物科技有限公司，批号1210252、1210251）；水合氯醛（成都市科龙化工试剂厂，批号20120611）；肝素钠注射液（江苏万邦生化医药股份有限公司，批号1203129-B）。

1.2 动物 SPF级SD大鼠，雄性，由广东省医学实验动物中心提供，合格证号44007200002932。饲养于广东省中医研究所SPF级动物实验室，批号SCXK（粤）2010-0059。1.3 仪器 JJ3000动物电子秤（中国和恒仪器公司产品）；BS224S电子天平（万分之一，德国SARTORIUS产品）；HH-6数显恒温水浴锅（金坛市富华仪器有限公司产品）；3K30离心机（德国SIGMA公司产品）；5424型小型高速离心机（德国Eppendorf公司产品）；-80℃超低温冰箱（美国Thermo公司产品）；多导生理记录仪（澳大利亚PowerLab公司产品）；Bio-RAD 680酶标仪（美国伯乐公司产品）。

2方法

2.1 心衰大鼠动物模型建立［3］取50只雄性SD大鼠，体质量250～280 g，采用腹主动脉缩窄法制作充血性心力衰竭大鼠模型。腹腔注射10％水合氯醛麻醉，无菌条件下于大鼠剑突下腹正中切口，逐层打开腹腔，小心在肾动脉分支以上方0.5 cm处钝性分离腹主动脉，把针头磨钝的8号注射器紧贴平行置于腹主动脉上，用4号手术丝线将腹主动脉和注射器针头一同结扎，然后小心将注射器针头撤出，分层缝合腹腔。另取同批次大鼠10只作为假手术组，除不结扎外同法操作。术后予腹腔注射青霉素5 d预防感染。

2.2 动物分组及给药造模4周后将50只造模大鼠按体质量随机分为5组，分为模型组，芪苈强心胶囊组，心脉康颗粒高、中、低剂量组，每组10只。芪苈强心胶囊剂量0.324 g/kg；心脉康颗粒高剂量1.24 g/kg、中剂量0.62 g/kg、低剂量0.31 g/kg，其中中剂量为临床等效剂量，为成人用剂量的5.4倍。各给药组按剂量灌胃给药，假手术组、模型组给予蒸馏水，10 mL/kg灌胃，每天1次，连续给药12周。

2.3 血流动力学测定［4-6］给药12周后，各组大鼠禁食不禁水12 h，称重，并用10％水合氯醛经腹腔注射麻醉，仰卧固定，消毒并钝性分离左颈总动脉约1 cm，在近心端处用动脉夹夹紧，小心在动脉管壁上剪一很小斜口，向心脏方向插入内充满肝素的导管，用手术线将动脉壁与导管轻轻扎紧固定。松开动脉夹继续将导管缓慢插入，当电脑屏幕波形由动脉压力波形变为左室压力波形时，停止插管，测量左室内压。8/30 PowerLab多导生理记录仪系统记录大鼠的左心室收缩压（LVSP）、左室舒张末期压（LVEDP）、左室等容期压力变化速率峰值（±d p/d tmax）。

2.4 检测血流动力学参数测定完成后，腹主动脉取血测定大鼠血清中NT-pro BNP、cTnI含有量。取心脏，滤纸吸干血液，称重，计算心脏指数（g/100 g）。

3 结果

3.1 对心力衰竭大鼠血流动力学的影响表1表明，与假手术组比较，模型组大鼠LVSP、+d p/d tmax明显降低（P＜0.01），LVEDP、-d p/d tmax显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，心脉康颗粒组高、中、低剂量大鼠LVSP、+d p/ d tmax明显上升（P＜0.01或P＜0.05），LVEDP、-d p/d tmax显著降低（P＜0.01）。

表1　对心力衰竭大鼠血流动力学的影响（±s，n=10）

注：与假手术组比较，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01

-d p/d tmax/ （mmHg.s-1）假手术组　　—　139.670±4.557　-11.188±2.367　 7 882.516±1 482.584　 -6 238.719±1 030.337模型组　　—　92.786±6.340**　9.925±3.492**　3 781.581±790.939**　-3 086.891±546.065**芪苈强心胶囊组　0.324　 115.250±16.105##　-0.673±5.627##　5 327.399±1 076.329#　-4 095.961±1 084.111#心脉康颗粒高剂量组　1.240　 121.247±14.074##　-5.816±4.019##　6 554.411±1 209.224##　-5 363.666±688.655##心脉康颗粒中剂量组　0.620　 112.299±10.550##　1.769±3.495##　5 119.781±1 641.030#　-4 014.076±423.682#心脉康颗粒低剂量组　0.310　 104.042±8.470#　6.508±4.002　 5 248.357±1 186.590#组别　　剂量/ （g.kg-1）　LVSP/mmHg　LVEDP/mmHg　+d p/d tmax/ （mmHg.s-1）-3 534.454±604.782

3.2 对心力衰竭大鼠血清NT-pro BNP、cTn I含有量及心脏指数的影响表2表明，与假手术组比较，模型组大鼠NT-pro BNP、cTnI含有量明显升高（P＜0.01），心脏指数明显增大（P＜0.01）。与模型组比较，心脉康颗粒组高、中、低剂量大鼠NT-pro BNP、cTnI含有量明显降低（P＜0.01 或P＜0.05），心脏指数明显减小（P＜0.01或P＜0.05）。

4 讨论

在中医学中并无心力衰竭之名，根据心衰的临床表现，本病当归属于中医学“水肿”、“喘证”、“心悸”、“痰饮”等范畴。本病是一个本虚标实的病证，其中虚证以心气亏虚、肾阳不足为主，实证以水湿内停、心脉瘀滞为主，临床大多虚实夹杂［7］。治疗心衰，应采用益气温阳药为治络强心之本，辅以活血通络、利水消肿药以治标，代表性药物如芪苈强心胶囊［8］。现代医学认为心力衰竭的发病原因主要是缺血性心肌病、风心病、高心病、扩张型心肌病、肺梗死、先心病、营养代谢性心脏病等［9］。其机制为（1）机械-神经内分泌机制：心肌刺激是导致心肌肥厚的主要触发机制之一；（2）氧化应激反应：在衰竭的心肌细胞中活性氧簇（ROS）的产生增加导致DNA和线粒体的损伤，进而导致心肌细胞凋亡；（3）炎症机制：通过促炎症细胞因子参与心衰的发生发展；（4）细胞凋亡：与凋亡或程序性细胞死亡导致心肌细胞不可逆的丢失有关［10］。卫生部药政司所发《中药新药治疗充血性心力衰竭的临床研究指导原则》规定心衰的中医分型为心肺气虚证、气阴两亏证、心肾阳虚证、气虚血瘀证、阳虚水泛证、痰饮阻肺证、阴竭阳脱证等7个证型［11-12］。心脉康颗粒由具有益气温阳、活血利水等功效的人参、附子、肉桂、丹参、五味子、枳实、茯苓、罗布麻叶组成，临床用于气虚血瘀证型心衰有较好效果。本次实验开展了心脉康颗粒对腹主动脉狭窄所致大鼠实验性心衰心功能的作用研究，结果表明心脉康颗粒明显升高心衰大鼠LVSP、+dp/dtmax数值，降低心衰大鼠LVEDP、-dp/dtmax数值，结果提示心脉康颗粒能有效改善心力衰竭大鼠的血流动力学［13］。

NT-proBNP是脑钠肽（BNP）的前体肽链结构的氮末端产物，与BNP同属钠尿肽家族，为心脏分泌的肽类激素，在心衰的早期诊断中，广泛应用于心力衰竭的诊断、危险分层，指导治疗和判定预后的最强风险因子，NT-proBNP是更简单、方便、快捷的用来评价心功能的检测方法，其升高对于心力衰竭的预测是一个很有价值的标记物，反映出心力衰竭的严重程度，也是心力衰竭患者预后的重要标志物［14-15］。cTnI是心肌组织特有的一种调节蛋白，当心肌受损时游离型cTnI首先逸出细胞进入血循环而被检出，并随心肌损伤加重，cTnI血清浓度逐渐升高［16］。升高程度与心衰程度成正比，与临床指标有着强相关性，并对预后的判断有一定的价值［17］。

本实验研究显示，心脉康颗粒明显降低心衰大鼠NT-proBNP和cTnI含有量，降低心脏指数，提示心脉康颗粒可有效治疗心力衰竭大鼠并改善其预后状态。

本实验初步研究了心脉康颗粒的强心作用，其作用相关机制有待深入进行。

表2　对心力衰竭大鼠血清NT-pro BNP、cTnI含有量及心脏指数的影响（±s，n=10）

组别　　剂量/ （g.kg-1）　NT-proBNP/（pg.mL-1）　cTnI/（ng.mL-1）　　心脏指数/ （g/100 g）假手术组　　—　35.267±10.906　128.162±9.008　0.367±0.042模型组　　—　141.177±16.166**　200.663±7.558**　0.455±0.031**芪苈强心胶囊组　0.324　88.364±35.622##　175.067±7.691##　0.400±0.028##心脉康颗粒高剂量组　1.240　78.702±38.222##　172.776±2.742##　0.407±0.020##心脉康颗粒中剂量组　0.620　92.529±48.840##　170.828±7.575##　0.397±0.025##心脉康颗粒低剂量组　0.310　102.193±39.156#　181.541±13.277##　0.422±0.033#

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