特种毛皮动物真菌性皮肤病主要的诊断技术



特种毛皮动物真菌性皮肤病主要的诊断技术

由于饲养密度过大、环境潮湿、饮食不科学等饲养管理方面的诸多问题，导致近年来狐、貉、貂等特种毛皮动物的真菌性皮肤病逐渐增多，一旦发生这类疾病，对毛皮的质量影响较大，造成严重的经济损失。其中还涉及到人畜共患病，动物的真菌和螨虫均可传染给人，因此这类皮肤病越来越受到人们的重视。准确的诊断真菌性皮肤病极为重要，因此特种动物真菌性皮肤病的诊断技术备受临床执业兽医师的关注。

1　伍氏灯检查

伍氏灯又称滤过性紫外线检查，用伍氏灯在暗室照射病变区域皮屑，小孢子菌感染的毛发可发出苹果绿色荧光，而石膏样小孢子菌和须毛癣菌感染的毛发无荧光或荧光颜色不同。这种检测方法因操作简单、快捷，易于掌握，且属于无伤害检测技术，在临床实践中被广泛应用，是目前动物医院检测皮肤真菌病的最为主要的方法。

应该注意皮肤鳞屑、药膏、乳油及细菌性毛囊炎在紫外线的照射下可能也会发出荧光，但其颜色与犬小孢子菌感染的荧光不同。伍氏灯检查只能作为筛选手段，不能进行确诊。另外，在检查前1周应停止使用外用药膏。

2　直接检查毛发

从炎症部位拔毛，最好取断裂、被擦损的毛发或选取伍氏灯下有荧光的毛发，置于载玻片上，滴加10%～20% KOH，加盖玻片，作用30 min或加热15 s，待样本透明后，先用低倍镜（10倍物镜）找出擦损、胀大、淡色的毛发，然后用高倍镜（20～40倍物镜）检查真菌孢子和菌丝。如果在毛发干周边有发外孢子型孢子，呈圆形或卵圆形、绿色透明串珠状，发干内有菌丝则可诊断为皮肤癣菌病。

3　真菌培养

培养皮肤癣菌的培养基为皮肤癣菌试验培养基（DTM），也可选用沙氏（沙氏葡萄糖琼脂）培养基。将毛发等病料接种于培养基上，25℃培养，皮肤癣菌的生长可使DTM变红，或根据沙氏培养基上菌落的颜色和形态以及显微镜检查等做进一步鉴定。

4　组织病理学检查

组织病理学检查是一种较为准确的检查方法。对病料进行PAS染色，孢子表面及菌丝染色后成红色，毛发角层内的发鞘的孢子和菌丝较易被发现，便于进行诊断。在表皮角质层、毛囊、被毛等处较易出现PAS阳性反应。

5　免疫学检查

当前免疫学方法还较少应用于动物皮肤真菌病的诊断，由于该法具有特异性强、灵敏性高等优点，有一定推广应用前景。相关研究表明采用间接ELISA法检测感染真菌的实验兔体液中的特异性抗体，应用免疫标记技术检测感染患病兔血清中的IgG，结果显示出为8个条带；采用聚丙烯酰胺十二烷基磺酸钠凝胶电泳法（SDS-PAGE），结果显示出3个条带。

6　分子生物学检查

随着分子生物学的快速发展，PCR检测技术、限制性酶切片段长度多态性分析（RFLP）、分子探针、随机扩增DNA多态性（RAPD）、DNA指纹图谱等方法已广泛应用于深部真菌病的诊断。此类方法特异性极强、敏感性极高。随着分子生物学技术在临床的应用及发展，将大幅提高真菌病诊断和鉴定的准确性。

7　其　他

近年来采用G-TEST法，主要检测深部真菌感染患者体液中或致病性真菌的多糖与G因子都可以产生阳性反应，这是一种较新有效诊断真菌疾病的方法。

（黑龙江省萝北县畜牧兽医局，张卓，梁新江；东北农业大学动物医学学院，李蓓，陈永平，陈悦，范宏刚）