食品理化检验标准中对荧光法的实际应用

□ 邹诗婷　广东省惠州市质量计量监督检测所

食品理化检验标准中对荧光法的实际应用

□ 邹诗婷广东省惠州市质量计量监督检测所

近些年，国内食品工业化程度日益扩大与迅猛提升，广泛应用了更多新添加剂与工业技术，导致国内屡次发生食品安全事件。食品安全已升级为现阶段全社会重点关注的重点话题。从根本上说，食品安全问题一方面与国民生命安全、身体健康有着直接相关性，另一方面还会对社会长期发展与安全产生直接性影响。荧光检测技术是以辐射跃迁原理为基础的一种特异性检测工艺，该技术的出现和原子、分子结构的相关性极强，而且具有较强的选择性、较高灵敏度以及精准定量等诸多优势，在复杂基质中分析与检测相关化合物较为适用。

食品检测标准中对分子荧光法的应用

荧光分光光度法

充分粉碎、净化、提取以及浓缩定容待测基质之后，无需其他手段，将样液直接导入检测比色皿中，通过其所出现的荧光强度进行定量检测，此为当前标准中应用比较广泛的一种分光光度检测模式。因为选择无分离检测模式，所以通常具有较高前处理净化要求，一般会结合应用层析净化。现阶段国内食品安全检测标准中，选择这一方法检验的主要物质包括黄曲霉毒素、伏马毒素、噻菌灵和腹泻型贝类毒素等，所涉及主要基质有乳制品、粮油、果蔬、茶叶、水质以及饲料等。该法的优势在于：不需要分离，人工操作方便，因采用比色皿作为检测池，具有较大的光程，有较高的灵敏度。

薄层色谱-荧光法

该方法是基于初步分离而实现的半定量检测方法。前处理试样后，在薄层色谱板中点样，以标准溶液为参比，其定量依据是：若试样点荧光强度比标准溶液点强，那么必须适度稀释试样，直到试样点强度等同于标准溶液点，同时依照稀释倍数对具体浓度进行计算；若荧光强度比标准溶液点弱，那么其具体含量比检出限低。定性依据是：标准溶液点和试样点迁移距离具有一致性；标准溶液点和试样点具有相同的荧光色度，那么能够判断试样内部存在目标化合物。现阶段，国内食品安全检测标准中，选择这一方法展开检验的相关物质包括玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素以及T-2毒素等，涉及到的相关基质有奶油、配合饲料、新鲜猪组织和牛乳制品等。该法的优势在于：仪器简单，引入分离设置，增加Rf值作为定性依据，对试样中的荧光杂质进行分离，降低干扰。

高效液相色谱-荧光法

该方法是现阶段国内食品安全标准中广泛应用的分子荧光检测法，普遍应用于真菌毒素、兽药残留以及人工色素等相关检验中。

1.兽药残留检测

所选药物为阿维菌素类药物，主要有多拉菌素、阿维菌素以及伊维菌素等，属于大环内酯类兽药，其功效主要包括杀螨、杀菌等。现阶段标准中所选检测方式主要是甲醇-乙腈提取，通过N-甲基咪唑啉衍生化，结合液相色谱-荧光检测系统，475 nm的发射波长，365 nm的激发波长。现阶段，选择这一方法的有农业部公告与国家标准等，样品基质主要包括牛、乳制品、水产品、鸡组织以及牛组织等。

2.色素染料检测

应用比较常见的一种人工色素就是碱性桃红T，区域标准所选检测方法是：碱化甲醇提取样品，正己烷加以净化、二氯甲烷加以萃取，由高效液相色谱荧光检测器展开检测，572 nm的发射波长，271 nm的激发波长，4 μg/kg的检出限。结晶紫与孔雀石绿均为兼具杀菌剂与燃料功能的两种化学药品，而且普遍应用于水产品中。国际检测方法是：对于样品内部所残留结晶紫或者孔雀石绿，通过氰化钾将其还原成代谢产物隐性结晶紫或者孔雀石绿，乙酸铵-乙腈混合液加以提取，酸性氧化铝-丙基磺酸加以净化，进入荧光检测器展开高效检测，360 nm的发射波长，265 nm的激发波长，0.5 μg/kg的检出限。

食品检测标准中对原子荧光法的应用

原子荧光法就是在原子吸收光谱与原子发射光谱间介入的一种光谱分析技术。其基本原理是原子化待测元素，对原子蒸气进行光源辐射到高能态，将特征波长荧光发射出来，通过荧光波长定性与强度定量，被广泛应用于检测食品重金属含量中。此处主要介绍原子荧光法中的微波消除-原子荧光光谱法，该方法是将特定酸与样品置于消解罐中，放入微波消解仪内部，高温增压环境下根据设定消解程序确保样品能够及时消化与溶解，与以往消解方法相比，该法的优势在于：充分消解样品，具有较高回收率；较低空白值，便于消化、无交叉污染与元素损失，能够同时完成多元素联测。被广泛应用于检验检疫行业与农业部标准中，选择这一方法检验的主要物质包括硒、砷以及锑等，涉及主要基质有食品接触材料、稻米以及饲料等。

展望

随着近些年电子学与材料学的进步与发展，使得很多新型光源的激发光强度得到很大程度的提升，进而提升荧光检测灵敏度，微型化与小型化成为荧光检测的主流。而且在联用技术领域，芯片电泳与毛细管电泳等技术得到广泛应用，同时也为定量与定性工作奠定技术型支持，随着近些年食品理化检验标准的逐渐成熟，具有更为优越性能的分离联用技术与新型光源技术必然成为食品安全领域发展的主流趋势。