蜂蜜中的抗生素的研究意义及检验方法分析

2016-03-27姚焕洁额敏县质量与计量检测所

食品安全导刊 2016年21期

□ 姚焕洁　额敏县质量与计量检测所

蜂蜜中的抗生素的研究意义及检验方法分析

□ 姚焕洁额敏县质量与计量检测所

在最近几年中，蜂蜜产品存在许多抗生素残留问题。这种抗生素残留不仅不利于人体的健康，还阻碍了蜂产品的出口。所以，社会广泛关注蜂蜜中的抗生素的问题。本文论述了蜂蜜中抗生素的研究意义、蜂蜜中的抗生素种类以及检验蜂蜜中的抗生素的一些主要方法，最后预测了蜂蜜中抗生素检测技术的未来发展趋势。

蜂蜜中抗生素的研究意义

蜂蜜属于天然营养佳品，受到了很多人的青睐。2002年以来，欧盟因为我国的抗生素残留超标，禁止我国蜂蜜进入欧盟市场，极大地影响了我国蜂产品的出口。目前，大多数国家都对抗生素残留含量进行了严格要求，同时，发达国家相对于发展中国家来说，有较为严格的技术标准来限制蜂蜜的进口。所以，食品安全领域中最重要的研究课题就是要对蜂蜜中的抗生素进行检测。

蜂蜜中常见抗生素的种类

氯霉素

氯霉素对于大多数的病原菌都有较强的抑制作用，是首次用化学合成法生产的抗生素。因为其较高的效用和较低的价格，可以对蜜蜂传染性疾病进行有效地治疗与预防。但是，氯霉素也存在较大的毒副作用，潜在威胁人类的健康，因此，国家及地区都急切关注蜂蜜中氯霉素的残留问题。在近几年，欧盟、美国等发达国家或地区严格要求动物源性食品中不能出现氯霉素，并明确指出限量为不得检出氯霉素，我国农业部规定农业也不能使用氯霉素。

四环素类

管谱抗菌是四环素类抗生素中的最大特性，由天然品与半合成品两类组成。天然品包括金霉素、土霉素、四环素等其他因素，半合成品包括多西环素和米诺环素等因素。土霉素、金霉素、四环素是四环素类最常用的抗生素，主要对由蜜蜂幼虫感染的腐臭病有很大用途，所以蜂产品中有可能会存在四环素类药物。欧盟、日本对蜂蜜中四环素的要求为总量均小于100 ng/g。

磺胺类

磺胺类抗生素的应用非常广泛，经肝脏代谢完成后，磺胺类形成乙酰化代谢物然后随着尿液排出。但代谢产物的溶解度会有所下降，容易在尿液中析出，极大可能会损坏血尿、结晶尿及肾脏。欧美等国家规定食品中磺胺的含量不得超过100 μg/kg。

硝基呋喃类

硝基呋喃类药物属于广谱抗菌药物，由人工合成。硝基呋喃类抗生素是由呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因等因素组成，但硝基呋喃类药物会潜伏在人体中，对人体有一定的危害，现在对此类药物已经明令禁止。

其他类抗生素

上述抗生素除外，蜂蜜中还会有泰乐菌素、林可胺类、大环内脂类和羟甲基糠醛等抗生素。

蜂蜜中的抗生素的检测方法

微生物检测法

微生物检测方法的相应原理：依据蜂蜜中的抗生素使微生物有一定的生理转化、生物代谢功能，在采用定量或定性的方法对抗生素药物的残留进行检验。方法主要有氯化三苯基三氮唑法又称为TTC法、纸片法又称为PD法等。

氯化三苯基三氮唑法的特点是实验成本较低，不足之处是需要的时间较长，并且实验人员应该具有较高的专业知识和能力，实验中会用到一定的菌液和水，对于它们的制备过程要严格操作，以免出现较大的误差，影响实验结果的准确性。纸片法检测的极限是0.008～0.01 IU/ml，检测结果大多情况下在4 h内得到。纸片法的特点是实验成本低，缺点是需要的检测时间长，而结果也容易成为伪阳性来干扰正确结果，所以需要做进一步的检测才能确定是否为真正的阳性。

理化检测法

利用抗生素中基因的特殊反应、性质来测定蜂蜜中抗生素的含量是理化检测法的原理所在。蜂蜜的残留抗生素检测中应用方法一般有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、液相色谱-质谱法（LC-MS）、气相色谱-质谱法（GC-MS）等分析方法，这些方法的特点是灵敏度高、准确性强、不会出现伪阳性的结果，但是也存在许多缺点。--蜂蜜中含有大量的蛋白、脂肪等，如果对样品提取不好将会直接影响实验的结果，因此在实验之前必须将样品充分混合，再按照实验的步骤进行实验，经过净化得到实验所需的溶液。

有研究学者将四环素、土霉素、多西环素、金霉素和氯霉素5种常用的抗生素进行了分离实验。实验结果显示，在合理的浓度范围内，峰面积和样品浓度呈现相关关系。这些方法在抗生素残留检验中不太常用，但是由于各有各的特性，灵敏度又高，所以也不失为几种不错的检测方法。这些方法的不足之处也是实验的成本比较高、对人员的要求严格，操作过程复杂，并且只能对单个样本进行检验。

免疫分析法

利用抗体的特异结合特性来测定物质中抗生素的方法称为免疫分析法。免疫分析法在食品的检测中应用广泛。当前，对物质中残留抗生素的检测技术中大体分为两类，一种是免疫测定法，这是一种相对独立的检测方法。第二种是免疫分析技术与常规理化分析技术结合分析的方法。蜂蜜的残留抗生素检测方法中经常采用酶联免疫吸附分析法（ELISA）、胶体金免疫层析法、蛋白芯片法，酶联免疫吸附分析法是国内外使用最多的一种方法，胶体金免疫层析法常常被用于需要尽快得到结果的情况，蛋白芯片法是以后免疫检测的发展方向。