气相色谱-质谱法检测食品中胆固醇含量的研究

□ 董晓尉　金华市食品药品检验检测研究院

气相色谱-质谱法检测食品中胆固醇含量的研究

□ 董晓尉金华市食品药品检验检测研究院

胆固醇作为人体中维持个人机体正常生理功能所必须的重要物质，而人体内所需的胆固醇含量约为140 g，若人体每天摄入胆固醇的量过高则会形成高脂血症，从而引起动脉粥样硬化，进而诱发冠心病、高血压等一系列心脑血管疾病，预防动脉粥样硬化及心脑血管疾病的重要措施是适度控制外源性胆固醇摄入。

气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）具有色谱分离效率高，定性、定量准确及质谱的灵敏度高、进样量少、分析速度快等特点，适用于易挥发或易衍生化合物的检测和分析。由于色谱的高分离能力和质谱的鉴别特性，对复杂的混合物样品进行分离、定性和定量分析一次完成，是一种完美的现代检测分析方法。

食品中的胆固醇

胆固醇的介绍

胆固醇是一种环戊烷多氢菲的衍生物，其又称为胆甾醇。化学式为C27H46O，是存在动物组织中的一种白色蜡状物质。胆固醇不溶于水，易溶于氯仿、乙醚等溶剂，其溶解性与脂肪类似。胆固醇是动物不可缺少的重要物质，不仅参与形成组织细胞的细胞膜，而且是合成维生素D，胆汁酸以及甾体激素的主要原料。胆固醇同时也是合成几种重要荷尔蒙及胆酸的材料。

高胆固醇的危害

人体每天都需要摄入大量的各类食品，如果长期食用胆固醇含量极高的食品会使人体血液中胆固醇的含量升高。人体每天摄入胆固醇的正常值在0～5.2mmol/L，如果超过这个水平就表现为高胆固醇，而高胆固醇会诱发高血压、心脑血管疾病、肾衰竭疾病、心脏病和牙周病等疾病的发生。

气相色谱-质谱技术

基本原理

气相色谱是利用被测物质各组分在不同两相间的微小化学性质差异对物质进行分离的一种方法，这些物质在两相作相对运动时进行反复多次的分配，使不同组分由于原来只有微小的性质差异产生很大的效果而得到分离。实际为通过样品组分沸点之间的差异先后进柱，然后在气体流动相和固定相之间分配系数的差异进一步分离。各组分分子会被柱子保留，随后在不同的保留时间内流出柱子，流出的分子被质谱吸收并测定其离子化。

特点

气相色谱-质谱联用技术可以将待测样品进行高效分离后直接导入质谱进行检测，满足了对样品单一性的要求，还可以避免样品的制备和转移的复杂过程，极大地减少了对样品的污染，同时最大限度地提高了对化合物的分离程度和定性、定量的分析效率。气相色谱-质谱联用技术中的多种电离方式可使各种分子得到有效的电离，所得的离子经质量分析器分离后均可以被检测。气相色谱-质谱联用技术具有高效分离、高灵敏度、高准确度及操作简便的特点。

气相色谱-质谱法对食品中胆固醇含量的检测分析

彭春喜等建立一种简单、快速而又重现性好的胆固醇测定方法，以监测食品中胆固醇的确切含量。气相色谱的条件：色谱柱选择DB-5MS其柱长30 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm的不分流模式，不分流时间1.00 min；进样口温度280℃，流量为2 mL/ min；初始温度设定为220℃并保持1 min，随后以30℃/ min的速度上升至280℃并保持8 min；载气为He，载气流量2 mL/min。质谱条件为EI电离方式，70 eV电子能量，450 V电子倍增器电压，设定离子源的温度为250 ℃；质谱扫描的范围在50～650 u；传输线温度为270℃。

实验过程：样品经石油醚萃取后用50% KOH-乙醇进行皂化，然后用乙醚二次萃取，氮气吹干后用正己烷溶解，注入GC-MS进行定量分析。研究结果显示，该方法胆固醇的回收率在96.64%～100.13%，此方法的检出限为0.065 9 μg/mL，定量限为0.22 μg/mL。

喻文娟 等建立了外标-气相色谱-质谱法测定食品中胆固醇的简易方法。通过单因素实验，优化了实验过程的前处理条件，确定乙醚为提取剂，设定皂化温度为70 ℃，皂化时间为50 min。色谱柱的选择条件：DB-5MS其柱长30 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm；保持进样的温度为290 ℃；进样量为1 μL；载气为He；流量为1 mL/min；设定初始柱温为150 ℃并保持5 min，并以20℃/min的速度升至300 ℃，保持12.5 min；接口温度设定为260 ℃；离子源温度设定为200 ℃；采用EI电离方式，使用70 eV的电子能量，450 V的关电倍增管电压；质谱范围在33～500 u；溶剂延迟4 min。实验结果表明，测定样品的检出限为1.05 μg/g、相对标准偏差RSD小于7.0%、不同水平的回收率大于76.0%。

总结

综上所述，气相色谱-质谱法主要用于多种组分组成的混合物分离及检测，在混合物分离分析方面具有十分重要的地位，对于食品中胆固醇含量的检测是可行的。气相色谱-质谱法具有快速、操作简便、环保，并具有高效分离、高灵敏度、高精密度等的优点，满足了现代分析方法的要求。气相色谱-质谱法在分析检测和研究中起着越来越重要的作用，是许多有机化合物常规检测分析工作中的一种必备的工具。气相色谱-质谱法在食品的检测中也将发挥着重大的作用。