布地奈德对支气管哮喘患者肺泡灌洗液TGF-β1表达的影响

张天翼　　卢艳萍　　叶宏波　　管敏昌　　杭金国　　汤卫红.浙江省台州市恩泽医疗集团路桥医院呼吸科，浙江台州　38050；.浙江省台州市恩泽医疗集团路桥医院儿科，浙江台州　38050



布地奈德对支气管哮喘患者肺泡灌洗液TGF-β1表达的影响

张天翼1卢艳萍1叶宏波1管敏昌2▲杭金国2汤卫红2
1.浙江省台州市恩泽医疗集团路桥医院呼吸科，浙江台州318050；2.浙江省台州市恩泽医疗集团路桥医院儿科，浙江台州318050

[摘要]目的探讨布地奈德对BA患者气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中TGF-β1表达影响。方法选择我科2010年2月～2014年2月住院AABA患者按就诊时间分为常规组和治疗组各45例。常规组予综合治疗，治疗组在此基础上予布地奈德吸入，疗程均为3周，对两组治疗前后BALF中TGF-β1水平进行检测。结果常规组治疗前、治疗1周、治疗3周BALF中TGF-β1浓度分别为（223.98±58.48）ng/L、（189.04±44.57）ng/L、（158.33±37.66）ng/L，治疗组治疗前、治疗1周、治疗3周BALF中TGF-β1浓度分别为（231.60±61.11）ng/L、（170.31±32.19）ng/L、（135.20±17.94）ng/L；治疗1周后，治疗组与常规组差异有统计学意义（P＜0.05），治疗3周后，治疗组与常规组比较，差异有高度统计学意义（P＜0.01）；BALF中TGF-β1水平与BA分级呈正相关（r=0.938，P＜0.01）。结论BALF中TGF-β1能反映BA气道炎症情况，布地奈德能显著降低BALF中TGF-β1水平。

[关键词]支气管哮喘；支气管肺泡灌洗液；TGF-β1；布地奈德

支气管哮喘（bronchial asthma，BA）是由多种细胞参与的气道慢性炎症性疾病，具有气道可逆性和高反应性等特点，反复发作可导致气道重塑。目前全球哮喘发病率为5％～6％，患病率和病死率呈不断上升趋势[1]。研究显示，转化生长因子-β1（transforming growth fac tor β1，TGF-β1）是气道慢性炎症及气道重塑主要介质，具有刺激气道平滑肌细胞增殖和促进肺纤维化等作用[2]。吸入糖皮质激素（inhaled corticosteroid，ICS）能有效地缓解哮喘急性发作和减轻气道慢性炎症，达到良好的抗炎效果。为阐明TGF-β1在BA中作用机制，我们通过对支气管哮喘急性发作（acute attack of bronchial asthma，AABA）患者ICS治疗前后BALF中TGF-β1水平进行检测，探讨TGF-β1在BA中的作用，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

2010年2月～2014年2月我院确诊BA患者，均签署知情同意书。所有患者均符合2013年中华医学会《中国支气管哮喘防治指南》BA的诊断标准[3]，年龄18～50岁，按就诊时间分为常规组45例，轻度14例，中度19例，重度12例；男24例，女21例，病程（18.07± 6.39）年，（35.9±6.5）岁；治疗组45例，轻度14例，中度20例，重度11例；男23例，女22例；病程（16.87± 4.86）年；平均（35.4±7.2）岁，对照组45例为同期怀疑支气管异物而进行支气管镜检查者，其中男22例，女23例，平均年龄（34.4±7.6）岁。三组性别、年龄、病程、病情等比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2纳入标准

①所有病例均符合2013年《中国支气管哮喘防治指南》中AABA的诊断标准[3]；②年龄18～50岁；③近2个月未曾接受过糖皮质激素和（或）其他免疫抑制剂等治疗者；④所有研究对象均经医院伦理委员会审批，且患者和家属知情同意；⑤研究对象能耐受支气管镜操作。

1.3排除标准

①除BA外的慢性呼吸道疾病如支气管扩张、慢性阻塞性肺病、支气管肺癌等；②近2个月曾接受过糖皮质激素或免疫调节剂等治疗者；③病情严重需有创通气者；④能引起TGF-β1水平改变者如糖尿病、肾病和心血管疾病等；⑤不能耐受支气管镜检查者；⑥风湿免疫性疾病者如类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等；⑦拒绝或未按研究方案完成者。

1.4肺功能检测及BA分级

应用德国耶格肺功能仪对所有研究对象进行监测，内容主要包括：第1秒用力呼气容积（forced expi ratory volume in one second，FEV1）、用力肺活量（forced vital capacity，FVC）、第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比（FEV1/FVC）。BA分级标准：依据中华医学会制定的《支气管哮喘诊治指南》标准[4]，分为轻度、中度、重度和危重，即轻度：FEV1/FVC＜70％，FEV1占预计值％≥80％；中度：FEV1/FVC＜70％，50％≤FEV1占预计值％＜80％；重度：FEV1/FVC＜70％，30％≤FEV1占预计值％＜50％；危重：FEV1 /FVC＜70％，FEV1占预计值％＜30％或FEV1占预计值％＜50％伴有慢性呼吸衰竭。

1．5支气管肺泡灌洗（BAL）

应用富士能EB-270S型电子支气管镜，按照中华医学会制定的《诊断性可弯曲支气管镜应用指南（2008年版）》[5]进行操作，支气管镜嵌顿于右侧中叶开口处，注入生理盐水10 mL，并回收约50％，置-30℃冰箱内保存。

1.6ELISA检测BALF中TGF-β1含量

采用ELISA法检测BALF中TGF-β1水平，ELISA试剂盒由晶美生物技术北京有限公司提供，严格按说明书进行操作。

1.7治疗方法

常规组按AABA临床路径（吸氧、大环内酯类抗菌素抗炎5～7 d，并予氨茶碱0.25 g静滴解痉等对症治疗），并予雾化吸入平喘[硫酸特布他林雾化溶液（2 mL：5 mg，阿斯利康公司，批号H20090134）]；治疗组在此基础上予增加布地奈德溶液（1 mg：2 mL，阿斯利康公司，批号300500）雾化吸入，两组疗程均为3周。

1.8统计学方法

采用SPSS18.0统计学软件对资料进行分析，各组数据检验前均进行方差齐性和正态分布检验，计量资料采用（±s）表示，并进行t检验；多组间的比较采用单因素方差分析，计数资料采用χ2检验，相关性采用直线回归分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1BA不同治疗时间和不同发作程度BALF中TGF-β1比较

常规组治疗前、治疗1周、治疗3周BALF中TGF-β1浓度比较，差异有高度统计学意义（F=56.55，P＜0.01）；而治疗组治疗前、治疗1周、治疗3周BALF中TGF-β1浓度比较，差异有高度统计学意义（F=74.78，P＜0.01），提示两组治疗后BALF中TGF-β1浓度均有显著下降。治疗前常规组与治疗组与BALF中TGF-β1浓度比较，差异均有高度统计学意义（t=11.49；11.84，P＜0.01），而常规组与治疗组BALF中TGF-β1浓度无显著差异（t=0.61，P＞0.05）。治疗第1周BALF中TGF-β1浓度比较，治疗组显著低于常规组（t=2.28，P＜0.05）；而治疗第3周BALF中TGF-β1浓度比较，治疗组显著低于常规组更明显（t=3.72，P＜0.01）。见表1。

2.2AABA不同喘息程度BALF中TGF-β1比较

常规组和治疗组哮喘患者不同喘息程度BALF中TGF-β1浓度比较，差异均有高度统计学意义（F= 490.02；104.31，P＜0.01），而两组哮喘不同喘息程度BALF中TGF-β1浓度两两比较，常规组和治疗组轻度与中度患者比较差异具有统计学意义（t=13.91；7.44，P＜0.01）；常规组和治疗组中度与重度患者比较差异具有高度统计学意义（t=19.92；10.13，P＜0.01），提示随着BA加重，BALF中TGF-β1浓度显著升高（P＜0.01）（表2）。

表1　两组不同治疗时间BALF中TGF-β1比较（±s，ng/L）

表1　两组不同治疗时间BALF中TGF-β1比较（±s，ng/L）

注：对照组BALF中TGF-β1为（123.33±5.62）ng/L

223.98±58.48 231.60±61.11 0.61 ＞0.05 189.04±44.57 170.31±32.19 2.28 ＜0.05 158.33±37.66 135.20±17.94 3.72 ＜0.01 56.55 74.78 ＜0.01 ＜0.01治疗前　　治疗第1周　治疗第3周　F值　P组别　n常规组治疗组t值P 45 45

表2　AABA不同喘息程度BALF中TGF-β1比较（±s，ng/L）

表2　AABA不同喘息程度BALF中TGF-β1比较（±s，ng/L）

14 14 218.63±11.43 236.05±29.09 19 20 308.08±12.63 311.27±11.88 12 11组别常规组治疗组159.14±12.64 162.64±27.79例数　　中度例数　　重度例数喘息程度轻度

2.3AABA患者BALF中TGF-β1水平与BA发作程度相关性

两组AABA患者BALF中TGF-β1水平与BA发作程度呈正相关（r=0.938，P＜0.01）。见封三图1。

3　讨论

BA是由多种细胞和细胞因子参与的气道慢性炎症性疾病。但BA确切发病机制尚未完全明了。肺功能在一定程度上可评估BA病情，但不适合BA严重患者。炎症介质可趋化各种炎症细胞，并释放各种酶，导致肺功能逐步恶化[6]。细胞因子是指由免疫细胞或某些非免疫细胞分泌的具有生物学效应的小分子蛋白物质，具有介导炎症反应和参与免疫应答等功能[7]。多项研究表明[8-9]，炎症介质如IL-8、IL-5、IL-25等参与BA病理过程。因此，阻断炎症介质的活性，对于抑制哮喘的炎性反应、控制哮喘症状及复发有积极临床意义[10]。由于外周血和诱导痰均不能直接反应小气道炎症情况，存在一定的局限性。BALF主要来自支气管亚段，可直接的反映小气道炎症，BALF炎性介质水平有助于判断BA衡量病情和转归[11]。

TGF-β1是一种重要致纤维化细胞因子之一，与BA气道重塑密切相关[12]。动物实验发现[13]，哮喘大鼠BALF及肺组织中TGF-β1的表达增多，加重了气道重塑；布地奈德雾化吸入可减少气道局部TGF-β1的表达，在一定程度上干预BA气道重塑[14]。刘永生等[15]研究发现，血清TGF-β1的表达与BA患者FEV1、FEV1/FVC％呈负相关，提示TGF-β1参与BA气道重塑。范大平等[16]进一步AABA患者血清和诱导痰中TGF-β1浓度进行检测，结果亦发现血清和诱导痰中TGF-β1浓度与BA发作程度密切相关。本研究也发现BA急性发作期BALF中TGF-β1水平显著升高（P＜0.01），且随着BA发作加重，BALF中TGF-β1水平增高明显；直线回归显示，BALF中TGF-β1浓度与BA发作程度均呈显著正相关（r=0.938，P＜0.01），提示BALF中TGF-β1浓度可反映了BA气道炎症。布地奈德是一种吸入型的糖皮质激素，具有明显抗炎和抑制炎症介质释放的作用[17]，且在支气管哮喘中的疗效已得到肯定[18]，且具有局部浓度高、所用剂量小和不良反应小等优点[19]。本研究发现，布地奈德吸入可显著降低AABA患者BALF中TGF-β1水平（P＜0.05）（治疗第1周），并随着治疗时间延长下降更明显（P＜0.01）（治疗第3周），提示布地奈德吸入能显著降低BALF中TGF-β1的浓度。

综上所述，TGF-β1是参与BA气道炎症重要炎症介质[20]，布地奈德吸入能显著降低BALF中TGF-β1的浓度，该生化提标有望早期识别AABA，并且对AABA临床疗效评价有参考价值。

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Impaction of budesonide on the expression of TGF-β1in patients with bronchoalveolar lavage of asthma

ZHANG Tianyi1LU Yanping1YE Hongbo1GUAN Minchang2HANG Jinguo2TANG Weihong2
1.Department of Respiratory, Taizhou Enze Medical Center, Luqiao Hospital, Taizhou 318050, China; 2.Department of Pediatrics, Taizhou Enze Medical Center, Luqiao Hospital, Taizhou 318050, China

[Abstract]Objective To observe the impaction of budesonide on the expression of TGF-β1 in bronchoalveolar lavage of asthma. Methods The patients hospitalized in our department from February 2010 to February 2014 for the acute attack of asthma were selected and divided into the conventional group and the treatment group according to visiting time, with 45 cases each. The conventional group was treated with comprehensive therapy and the treatment group was treated with budesonide inhalation therapy on basis of the conventional group, and the course of treatment were 3 weeks. The levels of TGF-β1in BALF were measured before treatment and after treatment. Results The level of TGF-β1before treatment, 1 week, 3 weeks of treatment were（223.98±58.48）ng/L,（189.04±44.57）ng/L,（158.33±37.66）ng/L in the conventional group respectively, and（231.60±61.11）ng/L,（170.31±32.19）ng/L,（135.20±17.94）ng/L in the treatment group respectively. There were significant differences between the treatment group and conventional group after 1 week of treatment（P＜0.05）and the same after 3 weeks of treatment（P＜0.01）. And the concentration of TGF-β1in BALF were positively correlated with classification of asthma（r=0.938, P＜0.01）. Conclusion The level of TGF-β1can reflect airway inflammation of asthma, which can be significantly decrease by budesonide.

[Key words]Asthma; Bronchoalveolar lavage; TGF-β1; Budesonide

收稿日期：（2015-08-07）

通讯作者▲

［基金项目］浙江省医药卫生一般研究计划（2015KYB446）；台州恩泽医疗中心（集团）科研基金项目（15EZA2）；浙江省第一批台州市科技计划项目（1301ky49）

[中图分类号]R562.2

[文献标识码]A

[文章编号]1673-9701（2016）01-0016-03