2013年至2014年医院革兰阴性杆菌耐药监测情况分析

石艳红，黄 民，石志红

（湖北省荆门市第二人民医院，湖北 荆门 448000）

2013年至2014年医院革兰阴性杆菌耐药监测情况分析

石艳红，黄 民，石志红

（湖北省荆门市第二人民医院，湖北 荆门 448000）

目的 通过对医院细菌耐药监测情况的分析，为临床医师制订合理、有效的抗感染治疗方案提供参考。方法 采用纸片扩散法（K－B法）对医院2013年至2014年临床分离菌株进行药物敏感性试验(药敏试验)及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检测，按美国临床实验室标准化协会CLSI2009－CLSI2012(M100－S19)年标准判定药物敏感性结果。结果 在分离出的472株革兰阴性杆菌中，大肠埃希菌占首位。大肠埃希菌、克雷伯菌中ESBLs的检出率分别为64．41%和34．05%，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感，耐药率小于1%，对其他抗菌药物的敏感率低于80%，铜绿假单胞菌对各种抗菌药物的敏感率大多低于70%，鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物敏感率大多低于70%。结论 大肠埃希菌为医院肠杆菌科感染的重要致病菌。应加强监测细菌耐药性，为制订合理、有效抗感染治疗方案提供参考。

耐药性；药物敏感性试验；革兰阴性菌；抗菌药物

细菌耐药性严重影响着感染性疾病的治疗效果，是全球关注的重要公共卫生问题[1]。随着抗菌药物的大量使用，细菌耐药菌株相应增多[2]。为加强我院合理使用抗菌药物，现对我院病原菌的分布及耐药动向进行监测分析，指导临床合理用药。笔者收集了2013年至2014年在院患者感染性疾病临床标本，进行了病原学分离、鉴定及药物敏感性试验(简称药敏试验)，现报道如下。

1 材料与方法

1．1 菌株

临床分离菌株来源于我院在院患者送检的痰液、尿液、血液、分泌物等标本。同一患者连续分离出相同菌株，取首次分离菌株。标准质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC70603、铜绿假单胞菌ATCC27853均购自中国药品生物制品检验所。菌株鉴定为常规方法或VITEK，Microscan等微生物鉴定系统。

1．2 方法

细菌鉴定与药敏试验：采用纸片扩散法（K－B法），药敏纸片及MH琼脂培养基均来自英国Oxoid公司。试验方法与判定标准按美国临床和实验室标准化协会（CLSI）2012M100－22版的规定。药敏纸片的选择：氨苄西林、哌拉西林、氨苄西林舒巴坦、头孢哌酮舒巴坦、头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、环丙沙星、复方磺胺甲 唑、阿莫西林棒酸（30 μg／10 μg）。

超广谱 β内酰胺酶（ESBLs）测定：依据 CLSI2009年版中AppendixA推荐的方法筛选和确证大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中的产ESBLs菌株。

1．3 统计学处理

采用世界卫生组织（WHO）提供的WHO－NET 5．4软件进行数据处理，耐药率以百分比表示。

2 结果

本次监测共收集到革兰阴性杆菌472株，其中肠杆菌科306株（64．83%），非发酵菌166株（35．17%）；临床分离菌株主要标本来源为痰(56．80%)，其次为分泌物（12．20%）、尿（14．60%）和血（16．40%）。药敏试验结果见表1。

表1 细菌对各抗菌药物的敏感率（%）

产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属检出率分别为64．41%（143／222）和 34．09%（15／44）。在头孢菌素中，第1代、2代头孢菌素的耐药率高于50．00%；在第3代头孢菌素中，头孢他啶的耐药率最低；头孢哌酮舒巴坦对包括产ESBLs菌株在内的肠杆菌科细菌显示出较高的抗菌活性。产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌的耐药性较严重，对多种抗菌药物的耐药率较非产EBSLs菌株高，差异具有统计学意义（P＜0．05），并呈现出多重耐药性。

非发酵菌以铜绿假单胞菌和不动杆菌属为常见，分别占了38．55%（64／166）和32．53%（54／166）；鲍曼不动杆菌占了不动杆菌属细菌的85．19%（46／54）。铜绿假单胞菌对头孢曲松和氨曲南的耐药率高于60．00%，而对其抗菌活性最高的药物为头孢哌酮舒巴坦。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率为5．6%和8．4%，均明显高于肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药性。不动杆菌属细菌对头孢曲松和哌拉西林的耐药率高于60．00%，对亚胺培南最敏感仅为8．4%。

3 讨论

2013年至2014年我院共收集到非重复分离的细菌472株，其中大肠埃希菌占首位，是医院最常见的肠杆菌科细菌感染的重要致病菌，其次为肠杆菌属、不动杆菌属、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌，与国内其他地区报道一致[3]，而其他细菌的检出率各地区有所不同。

本调查结果显示，碳青霉烯类药物对肠杆菌科细菌的抗菌活性最强。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药机制主要是产生KPC型碳青霉烯酶，该类酶可水解包括亚胺培南和美罗培南等碳青霉烯类及其他β－内酰胺抗生素，导致细菌对上述抗菌药物均耐药。肠杆菌科细菌对多数β内酰胺类抗生素的敏感率较低，但含β内酰胺酶抑制剂的哌拉西林三唑巴坦和头孢哌酮舒巴坦对大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌亦保持了较好的抗菌活性，尤其是对于产ESBLs菌株，其耐药率显著低于不含酶抑制剂内酰胺类抗生素。

近年来，广谱抗菌药物的广泛应用及免疫缺陷患者的增多，非发酵菌尤其是铜绿假单细胞和不动杆菌属的感染日益增多，其对多种抗菌药物的耐药性也不断增强[4]。本调查结果中，不动杆菌属和铜绿假单胞菌的分离率占非发酵菌的前2位。铜绿假单胞菌对多种药物天然耐药，在使用抗菌药物后也易发生获得性耐药，常引起院内免疫力低下患者感染，是医院感染的重要条件致病菌之一[5]。可见碳青霉烯类药物对铜绿假单细胞均仍具有较高的抗菌活性，如亚胺培南和美罗培南。近年世界各地均有耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌（CRAB）的暴发流行[6]。该菌引起的感染治疗困难、病死率高，应重视对该类细菌的耐药性监测及其流行病学的耐药机制研究，并采取积极有效的防治措施。

综上所述，细菌耐药性已是我国目前面临的非常严峻的问题，而细菌耐药性监测是控制细菌耐药性的第1步。目前我国存在多个监测单位，由于区域、参加的医院及方法学的不同，往往出现不一致的结果。盲目滥用抗菌药物，导致细菌耐药产生，各地区感染菌谱及药敏试验结果都发生变化，监测报告的意义在于能给当地临床医师提供参考，制订合理、有效抗感染治疗方案，降低细菌耐药发生率[7]。

[1]杨万春，董 琳，杨 莉．35例院内获得性泛耐药鲍曼不动杆菌感染临床分析[J]．安徽医药，2011，15（5）:610－611．

[2]陈新谦，金有豫，汤 光．新编药物学[M]．第17版．北京：人民卫生出版社，2011:36．

[3]张利国，张卫萍．2009年至2010年23种抗菌药物对在肠埃希菌敏感趋势分析[J]．中国药业，2012，21（12）：34－36．

[4]崔伟历，王露霞，林翠玲，等．铜绿假单胞菌和不动杆菌属对β－内酰胺酶类抗生素的耐药分析[J]．实用医学杂志，2010，26（12）：2 220－2 222．

[5]张 健，邓 芳，张世勇，等．我院2007年至2011年铜绿假单胞菌临床分布及耐药分析[J]．中国药业，2014，23（5）：24－25．

[6]张同强，董 琳，王志远，等，儿童耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌感染32例临床及耐药性分析[J]．中华儿科杂志，2011，49（7）：545－549．

[7]熊水兵，周仲松，邹群华．基层医院1092株细菌分布及耐药分析[J]．安徽医药，2012，16（12）:1 892－1 894．

Analysis of the Hospital′s Gram－Negative Bacilli Resistance M onitoring in 2013－3014

Shi Yanhong,Huang Min,Shi Zhihong

(Jingmeng Second People′s Hospital,Jingmen,Hubei,China 448000)

Objective Through the analysis of the hospital′s antimicrobial resistance monitoring situation,to provide reference for formulating reasonable and effective anti－infection treatment plans for clinicians．M ethods The disc diffusion method(K－B)was used for the drug susceptibility test and clinical isolations of ESBLs test,according to the American association of clinical laboratory standardization CLSI2009－CLSI2012 (M100 approximately－S19)standard for determining the susceptibility results of the hospital during 2013－2014．Results In the 472 isolated Gram－negative bacteria,Escherichia coli accounted for first place．The detection rates of Escherichia coli and Klebsiella ESBLS were 64．41% and 34．05% respectively．Enterobacteriaceae was highly sensitive to carbapenems,with a resistance rate of less than 1%,and its susceptibility rate less than 80% to other antimicrobial drugs;the sensitive rates of Pseudomonas aeruginosa to a variety of antibiotics were mostly below 70%;the sensitivity rate of Acinetobacter baumannii to various antibacterial drugs were more than 70%．Conclusion Escherichia coli infection is an important pathogen in the hospital．We should strengthen the monitoring of bacterial resistance for the development of rational and effective anti－infection treatment programs

resistance;drug susceptibility test;gram－negative bacteria;antibacterials

R969．3；R978．1；R915

A

1006－4931(2016)01－0070－03

石艳红，大学本科，主管药师，主要从事药品调剂工作，（电子信箱）syhxsg＠163．com；石志红，大学本科，副主任护师，主要从事门诊护理工作，本文通讯作者，（电话）0724－6902293。

2014－10－18；二次

2015－05－26)