祖师麻凝胶膏剂的镇痛抗炎药效学评价*

蔺 莉，吴红彦，石晓峰，王丽娟，范 彬

1 甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000；2 甘肃省医学科学研究院

祖师麻凝胶膏剂的镇痛抗炎药效学评价*

蔺 莉1，2，吴红彦1△，石晓峰1，2，王丽娟1，范 彬2

1 甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000；2 甘肃省医学科学研究院

目的：对祖师麻凝胶膏剂的镇痛抗炎药效学进行评价。方法：采用扭体法和热板法观察祖师麻凝胶膏剂的镇痛作用，采用耳廓肿胀法观察祖师麻凝胶膏剂的抗炎作用。结果：与基质对照组比较，祖师麻凝胶膏剂小、中、大剂量组均可提高给药后不同时间痛阈值(P＜0.05)，祖师麻凝胶膏剂中、大剂量作用强于祖师麻膏药组(P＜0.05)；与基质对照组比较，祖师麻凝胶膏剂小、中、大剂量可延长给药后疼痛潜伏期并减少扭体反应次数(P＜0.05)，祖师麻凝胶膏剂大剂量组扭体反应次数少于祖师麻膏药组(P＜0.05)；与基质对照组比较，祖师麻凝胶膏剂中、大剂量可减轻小鼠耳廓肿胀度(P＜0.05)，祖师麻凝胶膏剂大剂量肿胀抑制率高于师麻膏药(P＜0.05)。祖师麻凝胶膏剂各剂量组与扶他林组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：祖师麻凝胶膏剂具有显著的镇痛和抗炎作用。

祖师麻凝胶膏剂；镇痛作用；抗炎作用

祖师麻(Cortex Daphnes)系民间常用中草药，始载于《陕西中草药》［1］，为瑞香科(Thymelaeaceae)植物黄瑞香Daphne giraldii Nitsche、甘肃瑞香(陕甘瑞香、唐古特瑞香)Daphne tangutica Maxim及凹叶瑞香Daphne retusa Hemsl的干燥根皮与茎皮［2］，主产于甘肃、陕西、云南、四川、西藏、青海等地，具有祛风除湿、活血止痛之功效，被民间广泛用于治疗疼痛、跌打损伤、风湿性关节炎和支气管炎等症［1，3］。目前，以祖师麻为主药的外用上市制剂有祖师麻膏药、祖师麻关节止痛膏、祖师麻风湿膏3个品种［4-5］，剂型均较落后。其中祖师麻膏药由祖师麻提取精制的浸膏粉和武威膏药组成，属于传统的黑膏药，具有祛风除湿、活血止痛的功能，用于风寒湿痹、瘀血痹阻证［4］。考虑到祖师麻膏药保存使用不方便、透皮吸收效果差、对皮肤刺激性大、生产工艺自动化水平低等缺陷，本课题组采用现代透皮吸收新技术，应用高分子亲水基质，对其进行二次开发，研制成祖师麻凝胶膏剂。为了评价其药效，本实验以祖师麻膏药和扶他林为对照药物，研究祖师麻凝胶膏剂对动物疼痛和炎症模型的作用，以期为其开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试剂和药品 祖师麻凝胶膏剂(甘肃省医学科学研究院药物研究所，批号：20141015)。祖师麻膏药(甘肃泰康制药有限责任公司，批号：20110812)；扶他林(北京诺华制药有限公司，批号：X4392)；硫化钠(分析纯，天津市百世化工有限公司，批号：20110920)；二甲苯(北京化工厂，批号：20121010)；醋酸(天津市北联精细化学品开发有限公司，批号：20131020)。

1.2 动物 昆明种小鼠，SPF级，体质量(20±2)g，由甘肃中医学院动物实验中心提供，动物实验许可证号：SCXK(甘)2011-0001。动物饲养于标准环境：温度(22±1)℃；相对湿度(60±5)%；人工光照；12小时明暗周期；标准颗粒饲料喂养。

1.3 仪器 FA2004型电子天平(上海上天精密仪器有限公司)；RB-200智能热板仪(成都泰盟科技有限公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 热板实验［6］将雌性健康昆明种小鼠放置于预热至(55±0.5)℃的热板上，自小鼠后足接触热板开始计时，至小鼠初次舔后足的时间为基础痛阈值。挑选基础痛阈在5～30秒的小鼠60只用于实验。按上法测定2次，间隔30分钟，取平均值为给药前痛阈值。按给药前痛阈值分层将小鼠随机分为6组：空白对照组(不含祖师麻的相同基质贴剂)，扶他林组(1 g/kg)，祖师麻膏药组(3.4 g/kg)，祖师麻凝胶膏剂高(7.2 g/kg)、中(3.6 g/kg)、低(1.8 g/kg)3个剂量组，每组10只。于实验前24小时用8%硫化钠将小鼠背部脱毛，脱毛面积约4 cm2。在脱毛部位分别给予受试药物和对照药物，基质对照组敷贴面积为1.5 cm2，扶他林组给药0.2 g/次，祖师麻膏药组敷贴面积为1.5 cm2，祖师麻凝胶膏剂小、中、大3个剂量组分别敷贴面积为1、1.5、2 cm2，剪取相应大小的药片敷贴于动物背部脱毛区进行给药，然后再用胶布将药物固定，保持药物和动物皮肤直接接触6小时，1次/d，连续3天。于末次给药后按前法测定60、90、120分钟痛阈值。比较给药前后痛阈值的变化，计算痛阈提高百分率。

1.4.2 醋酸扭体实验［7］选取健康昆明种小鼠60只，雌雄各半。分组及给药方法同前。于末次给药后l小时，各组均腹腔注射0.6%醋酸溶液10 mL/kg，并立即观察记录小鼠扭体反应出现时间及15分钟内扭体反应次数，然后观察每只小鼠的疼痛反应。以腹部内凹，躯干与后腿伸张，臀部高抬为指标，观察记录15分钟内扭体出现时间(潜伏期)与扭体次数。

1.4.3 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验［7］选取健康昆明种小鼠60只，雌雄各半。分组及给药方法同前。末次给药2小时后，各实验组每只小鼠的右耳前后两面涂100%二甲苯(0.02 mL/只)致耳廓肿胀，左耳廓不作处理。60分钟后脱颈椎处死小鼠，用直径9 mm的打孔器将双耳同部位等面积切下，用电子天平称重。以左右两耳质量差为肿胀度，计算肿胀抑制率。

1.5 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件分析，计量资料以表示，采用单因素方差分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 祖师麻凝胶膏剂对小鼠热板法致痛的影响 与空白对照组比较，祖师麻凝胶膏剂低、中、高剂量可提高给药后小鼠不同时间段痛阈值(P＜0.05)；祖师麻凝胶膏剂中、高剂量的痛阈提高率均高于祖师麻膏药组，部分时间段差异有统计学意义(P＜0.05)；祖师麻凝胶膏剂痛阈提高率与扶他林组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 祖师麻凝胶膏剂对小鼠热板法致痛的影响

表1 祖师麻凝胶膏剂对小鼠热板法致痛的影响

注：与空白对照组比较，*表示P＜0.05，#表示P＜0.01；与祖师麻膏药组比较，△表示P＜0.05(下同)。

组别 只数 剂量/(g·kg-1) 给药后不同时间的痛阈提高率/% 60 min 90 min 120 min空白对照组 10 0 20.50±5.23 27.10±4.86 26.19±5.87扶他林组 10 1.0 36.40±4.11*39.20±5.11#38.50±5.76*祖师麻膏药组 10 3.4 33.40±3.30*37.31±2.75*36.35±3.06*10 1.8 32.61±5.37*39.10±4.48*33.00±4.55祖师麻凝胶膏剂组 10 3.6 35.55±6.27*44.49±3.21#△39.50±5.16#10 7.2 39.71±6.73#46.90±7.64#△42.52±5.07*△

2.2 祖师麻凝胶膏剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响 与空白对照组比较，祖师麻凝胶膏剂低、中、高3个剂量均可延长给药后疼痛潜伏期并减少扭体反应次数(P＜0.05)；祖师麻凝胶膏剂高剂量组扭体反应次数少于祖师麻膏药组(P＜0.05)；虽然祖师麻凝胶膏剂中、高剂量组较扶他林组疼痛潜伏期延长，高剂量组扭体次数较少，但差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

2.3 祖师麻凝胶膏剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 与空白对照组比较，祖师麻凝胶膏剂中、高剂量可明显减轻小鼠耳廓肿胀度(P＜0.05)；肿胀抑制率祖师麻凝胶膏剂中剂量组与祖师麻膏药组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，祖师麻凝胶膏剂高剂量高于祖师麻膏药，差异有统计学意义(P＜0.05)；祖师麻凝胶膏剂高剂量组与扶他林组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表2 祖师麻凝胶膏剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响

表2 祖师麻凝胶膏剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响

组别 只数 剂量/(g·kg-1) 疼痛潜伏期/min 扭体反应/次空白对照组 10 0 4.64±0.72 25.40±5.79扶他林组 10 1.0 7.83±1.07*12.10±3.59#祖师麻膏药组 10 3.4 5.03±1.02 17.90±1.28*10 1.8 6.97±0.47*15.30±3.86*祖师麻凝胶膏剂组 10 3.6 9.62±1.23#14.00±4.22*10 7.2 9.03±1.63#10.50±2.27#△

表3 祖师麻凝胶膏剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

表3 祖师麻凝胶膏剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

组别 只数 剂量/(g·kg-1) 肿胀度/mg 肿胀抑制率/%空白对照组 10 0 9.93±1.79 -扶他林组 10 1.0 4.67±1.13#41.23±6.31祖师麻膏药组 10 3.4 6.03±1.38*34.23±2.72 10 1.8 7.02±2.41 26.34±4.29祖师麻凝胶膏剂组 10 3.6 5.43±1.14*38.21±4.61 10 7.2 4.12±0.46#44.89±3.64△

3 讨论

以祖师麻为主药的外用制剂主要涉及膏药、凝胶膏剂、喷雾剂、醑剂［4-5］。祖师麻凝胶膏剂［8-9］是由祖师麻、当归、香附、赤芍、冰片等24味中药经提取加工制成的外用贴剂。

凝胶膏剂是一种新型水凝胶型透皮给药载体，具有对于药物分子适用范围广即水溶性与脂溶性药物均适用、载药量大、膏体柔软、无刺激无过敏、药物透皮效率高等独特优势［10］；将祖师麻膏药实施二次开发研制成祖师麻凝胶膏剂，既克服了传统膏药的缺陷，又容易实现工业化生产，有利于产业升级。

本研究通过对祖师麻凝胶膏剂与祖师麻膏药和扶他林的镇痛抗炎作用的比对研究发现，祖师麻凝胶膏剂有显著的镇痛和抗炎作用，具有良好的开发前景，值得进一步研究。

［1］ 国家中医药管理局.中华本草：第5卷［M］.上海：上海科学技术出版社，1999：407.

［2］ 张薇，苏娟，扈晓佳，等.中药祖师麻的三种基源植物的化学及药理活性［J］.中国医药工业杂志，2007，38(3)：233-238.

［3］ 于明，张元君，王明时.祖师麻化学成分的研究［J］.中草药通讯，1976，7(10)：13-17.

［4］ 国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准［M］.北京：人民卫生出版社，1998：231-233.

［5］ 国家药品监督管理局.国家中成药标准汇编(中成药地方标准上升国家标准部分)：骨科分册［M］.北京：人民卫生出版社，2002：415-418.

［6］ 李仪奎.中药药理实验方法［M］.上海：上海科学技术出版社，2006：241-242.

［7］ 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京：人民卫生出版社，2002：882-913.

［8］ 谢雪虎，赵正保.祖师麻巴布剂的质量标准研究［J］.中国药物与临床，2011，11(1)：20-22.

［9］ 谢雪虎，申永政，赵正保.正交设计法优选祖师麻巴布剂的基质处方［J］.中国医药导报，2010，7(34)：52-53.

［10］李伟泽，张光伟，赵宁，等.中药水凝胶巴布剂产业化工艺技术攻关研究［J］.中草药，2012，43(10)：1928-1933.

Pharmacodynamics Assessment on Analgesic Function and Anti-inflammatary Effects of ZuShiMa Cataplasm

LIN Li1,2,WU Hongyan1△,SHI Xiaofeng1,2,WANG Lijuan1,FAN Bin2
1 Gansu University of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China; 2 Gansu Provincial Academy of Medical Science

Objective: To evaluate the analgesic function and anti-inflammation effects of ZuShiMa cataplasm. Methods: Analgesic function of ZuShiMa cataplasm was observed by adopting writhing test and hot-plate test, anti-inflammation of ZuShiMa cataplasm was observed by using ear swelling. Results: Compared with the matrix control group, low, moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm can increase pain thresholds at different times after medication(P＜0.05), the function of moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm were higher than ZuShiMa plaster(P＜0.05); compared with the matrix control group, low, moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm can prolong pain latent period after medication and reduce the number of writhing response(P＜0.05), the number of writhing response in high doses of ZuShiMa cataplasm group was lower than that ZuShiMa plaster(P＜0.05); compared with the matrix control group, moderate and high doses of ZuShiMa cataplasm can relieve ear swelling of mice(P＜0.05), the swelling inhibiting rate of high doses of ZuShiMa cataplasm was higher than that ZuShiMa plaster(P＜0.05). ZuShiMa cataplasm of different doses groups compared with Voltaren group, there were no statistical differences(P＞0.05). Conclusion: ZuShiMa cataplasm shows significant analgesic and anti-inflammation function.

ZuShiMa cataplasm; analgesic function; anti-inflammation function

R285.5

A

1004-6852(2016)12-0020-03

2016-07-25

2014年甘肃省中医药管理局科研立项课题(编号GZK-2014-19)；2013年兰州市第三批科技计划项目(编号2013-3-39)。

蔺莉(1980—)，女，硕士学位，主治医师。研究方向：方剂作用机理及药效物质基础研究。

△通讯作者：吴红彦(1963—)，男，博士研究生导师，教授。研究方向：方剂作用机理及药效物质基础研究。