甘青报春化学成分研究

张浩波， 段国建， 陈 晖， 彭晓霞，孙明霞

(甘肃中医药大学药学院，甘肃兰州 730000)



甘青报春化学成分研究

张浩波， 段国建*， 陈 晖， 彭晓霞，孙明霞

(甘肃中医药大学药学院，甘肃兰州 730000)

[目的]研究报春花属植物甘青报春的化学成分。[方法]采用柱层层析、制备薄层层析等分离手段，利用MS、1H NMR、13C NMR等技术，同时结合文献数据和理化数据对所分离出的化合物进行结构鉴定。[结果]从甘青报春中分离并鉴定了5个化合物，其分别为2-苯基色原酮、柚皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素、芹菜素。[结论]该研究所分离的化合物均属于黄酮类化合物。

甘青报春；化学成分；分离；理化性质；结构鉴定

甘青报春(Primulatangutica)属于报春花科报春花属植物，主要产于西藏东部、四川西北部、青海、甘肃南部等地区，多年生草本植物，为传统的藏药。其味微苦、涩，性微寒，无毒，具有安神止痛、退烧、清热敛疮、敛痛等功效，常用于治疗神经痛、关节痛、高血压、烫伤、疮疖等疾病[1-2]。报春花科植物中主要化学成分有黄酮类、萜类、甾醇类、有机酸类、醌类等，已有很多学者对此属植物进行了相关研究，并分离出相应化合物[3-4]。张雅媛[5]通过对报春花科植物过路黄干燥全草进行提取，得到金钱草水提物和金钱草醇提物，经过筛选，发现醇提取物具有良好的抗炎、解痉作用。报春花科植物中皂苷类成分抗肿瘤作用的靶点和途径广泛，除可直接杀伤和抑制癌细胞外，在增强机体免疫功能、抑制癌细胞的转移、诱导癌细胞的再分化等方面具有良好的活性[6]。鉴于对甘青报春的研究相对较少，且该药的药理研究鲜见报道。笔者以甘青报春为研究对象，对其全草成分进行研究，通过运用现代分离 (柱色谱、HPLC、PTLC等)、分析技术(1H NMR、13C NMR、HRMS等) 对甘青报春提取物中的化学组分进行了分析鉴定。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药材。甘青报春于2014年9月购于甘肃省碌曲县，经甘肃中医药大学李成义教授鉴定为甘青报春。

1.1.2 药剂。二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚 (60～90 ℃)、丙酮和甲醇等均为分析纯。显色剂为5%磷钼酸-乙醇溶液及碘。

1.1.3 仪器。1H NMR由Bruker Avanced Ⅲ超导核磁共振仪测定，DMSO-d6作溶剂；薄层 (II C) 检测用ZF-1三用紫外灯 (254和365 nm)。XMTD-8222型电热恒温鼓风干燥箱 (上海精宏实验设备有限公司)；RE-52AA型旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂)；SB-3200DTD型超声波清洗机 (宁波新芝生物科技股份有限公司)；薄层色谱硅胶预制板 (烟台市化学工业研究所)；柱层析硅胶(200～300目)、薄层层析硅胶 (硅胶H，GF 254) 均为青岛海洋化工厂出品。

1.2 方法

1.2.1 样品处理及制备。干燥的甘青报春全草 (1.5 kg) 研磨后用85%乙醇室温浸泡3次，每次7 d，浸出液经减压蒸馏除去溶剂得浸膏50 g。浸膏用二氯甲烷 (500 mL) 溶解，过滤并减压蒸馏除去溶剂得浸膏15 g，然后以硅胶拌样，挥干溶剂后以200 g硅胶湿法装柱，用洗脱剂 (石油醚∶乙酸乙酯=5∶1～2∶1，二氯甲烷∶甲醇=50∶1、20∶1、10∶1、5∶1、2∶1) 梯度洗脱，经薄层检测合并极性相近的馏分，得11个极性段 (A～K)。选择合适的极性段化合物进行进一步纯化，得到5种化合物。

1.2.2 测试。通过1H NMR、13C NMR等技术进行分析。

2 结构鉴定

2.1 化合物1 无色针状晶体。1H NMR (400 MHz,Chloroform-d)δ:8.23 (dd,J= 7.9,1.7 Hz,2H),7.98～7.89 (m,4H),7.70 (ddd,J= 8.7,7.0,1.7 Hz,2H),7.60～7.47 (m,8H),7.42 (s,1H),7.42 (dd,J= 15.1,1.1 Hz,1H),6.83 (s,2H)。从该化合物的氢谱数据可以看到，除在δ6.83 ppm处有一个单吸收峰外，其余吸收峰均在δ8.5～7.0 ppm的低场区，以上数据与文献[7]较为一致,故鉴定为2-苯基色原酮 (Flavone)。

2.2 化合物2 黄色粉末。1H NMR (CD3OD,400 MHz) δ：7.29 (d,J=8.5 Hz,2H),6.81 (d,J=8.5 Hz,2H),5.87 (s,2H),5.30 (d,J=10.2 Hz,1H),3.10 (d,J=10.2 Hz,1H),2.66 (dd,J=17.1,3.2 Hz,1H)。13C NMR (CD3OD,100 MHz)δ：197.0,168.3,165.5,164.9,159.0,131.0,129.0,116.3,103.3,97.0,96.1,80.4,44.0。从该化合物的核磁氢谱数据可以看到，在高场区(δ 2.66 ppm)只有一个吸收峰，而其他的吸收峰主要集中在苯环区，所以初步判断此化合物属于黄酮类化合物。结合核磁碳谱数据可知，在化合物中应该有一个羰基结构(δ 197.0 ppm)，另外在δ 160 ppm左右有4个吸收峰，可以判断应属于连有吸电子结构或元素的C ，这也符合黄酮类化合物的化学位移规律。以上数据与文献[8]一致，故鉴定为柚皮素 (Naringenin)。

2.3 化合物3 黄色粉末。1H NMR (CD3COCD3,400 MHz) δ：12.36 (s,1H),8.01 (d,J=2.0 Hz,1H),7.57 (dd,J=8.4,2.0 Hz,1H),6.93 (d,J=8.4 Hz,1H),6.50 (d,J=2.0 Hz,1H),6.27 (d,J=2.0 Hz,1H),5.42 (d,J=7.2 Hz,1H),3.74 (dd,J=11.8,2.3 Hz,1 H),3.57 (dd,J=11.8,5.2 Hz,1H),3.46～3.20 (m,4H)。13C NMR (CD3COCD3,100 MHz) δ：180.1,165.9,163.9,159.8,158.9,149.9,145.8,134.2,123.7,117.1,116.8,105.6,99.2,94.2,78.7,77.9,75.9,70.8,62.9。从该化合物的核磁氢谱数据可以看到，在δ 3.8～3.2 ppm有明显的吸收峰存在，且其峰型具有糖苷吸收峰的特点。结合核磁碳谱数据可知，在δ 180～140 ppm的吸收峰具有典型的黄酮类化合物特征。以上数据与文献[9]基本符合，故鉴定为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷 (Quercetin-3-O-β-D-glucosicle)。

2.4 化合物4 黄色粉末。1H NMR (C5D5N,400 MHz) δ：8.31 (d,J=1.9 Hz,1H),8.21 (dd,J=8.4,1.9 Hz,1H),7.38(d,J=8.4Hz,1H),6.87 (d,J=1.9 Hz,1H),6.76 (d,J=1.9 Hz,1H),3.87 (s,3H)。13C NMR (C5D5N,100 MHz) δ：177.4,165.6,162.5,157.5,149.4,148.5,147.5,137.9,123.1,122.8,116.6,112.6,104.5,99.3,94.4,56.0。从该化合物的核磁氢谱数据可以看到，在δ 3.87 ppm处有一个明显的单吸收峰出现，可以判断此化合物结构中可能含有甲氧基结构。结合核磁氢谱与碳谱数据可以推断此化合物应属于典型的黄酮类化合物。以上数据与文献[10]一致，故鉴定为异鼠李素 (Isorhamnetin)。

2.5 化合物5 浅黄色粉末。1H NMR (CD3COCD3,400 MHz) δ：12.95 (s,1H),7.91(d,J=8.8 Hz,2H),6.92 (d,J=8.8 Hz,2H),6.74 (s,1H),6.44 (d,J=1.6 Hz,1H),6.15 (d,J=1.6 Hz,1H)。13C NMR (CD3COCD3,100 MHz) δ：181.73,165.2,163.8,161.9,161.4,157.5,128.7,121.3,116.1,103.5,102.9,99.2,94.3。从该化合物的核磁氢谱数据可以看到，除在低场区有一个吸收峰外，其他吸收峰均集中在苯环区，与核磁碳谱数据相符合。但从核磁碳谱数据可以发现，在较为低场的δ 160 ppm处有5个吸收峰，说明相应C原子上应该连有吸电子基团，再结合化合物颜色可以初步推断应属于黄酮类化合物。以上波谱数据与文献[11]基本一致，故鉴定为芹菜素 (Apigenin)。

3 结论

采用柱层层析、制备薄层层析等分离手段，利用MS、1H NMR、13C NMR等技术，结合文献数据和理化数据对所分离出的化合物进行结构鉴定，研究报春花属植物甘青报春的化学成分。结果表明，从甘青报春中共分离并鉴定了5个化合物，分别为2-苯基色原酮、柚皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素、芹菜素，这些化合物均属于黄酮类化合物。

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The Study of Chemical Constituents onPrimulatangutica

ZHANG Hao-bo,DUAN Guo-jian*,CHEN Hui et al

(College of Pharmacy,Gansu University of Chinese Medicine,Lanzhou,Gansu 730000)

[Objective]To study the chemical constituents ofPrimulatangutica.[Method]The techniques of separation contain column chromatography(CC),preparative thin layer chromatography (PTLC) and so on.Through the results of H-Nuclear Magnetic Resonance (1H NMR),C-Nuclear Magnetic Resonance (13C NMR),High Resolution Mass Spectrum (HRMS),and combined with literature data,physicochemical data,the structures of the separated compounds were identified.[Result]Five flavonoids were obtained and elucidated as：flavone,naringenin,quercetin-3-O-β-D-glucosicle,isorhamnetin,apigenin.[Conclusion] All above compounds belong to flavonoids.

Primulatangutica;Chemical constituent; Separation; Physicochemical property; Structure identification

甘肃省高等学校科研项目(2013A-084)；甘肃中医药大学引进人才基金项目(BH2012-089)。

张浩波(1977- )，男，甘肃陇南人，副教授，博士，从事摩擦学及天然药物化学研究。*通讯作者，副教授，博士，从事天然药物分子的分离分析及全合成研究。

2016-10-12

S 567.23+9

A

0517-6611(2016)36-0154-02