泽漆化学成分研究

赵 杰，吴繁荣，韩 续，李 宁，葛金芳，陈飞虎

泽漆化学成分研究

赵 杰，吴繁荣，韩 续，李 宁，葛金芳，陈飞虎

目的研究大戟属植物泽漆的化学成分，并对分离得到的单体化合物进行初步抗银屑病活性筛选。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基键和硅胶及重结晶等方法进行分离纯化，并通过波谱学技术进行结构鉴定。应用CCK-8法体外检测单体化合物对人角质形成细胞（HaCaT）的抑制作用，ELISA法检测单体化合物的抗炎活性。结果从石油醚部位和氯仿部位分离纯化得到12个化合物，分别为正三十一烷醇（1）、β-谷甾醇（2）、金色酰胺醇脂（3）、槲皮素（4）、5-羟基-6，7-二甲氧基黄酮（5）、山奈酚香豆酰基葡萄吡喃糖苷（6）、柚皮素（7）、异嗪皮啶（8）、松脂素（9）、14α，15β-二乙酰氧基-3α，7β-二苯甲酰基-9-氧代-2β，13α-麻风树-5E，11E-二烯（10）、euphoscopin B（11），大戟苷Ⅰ（12）。结论其中5，6，8，9为首次从大戟属中分离得到。化合物4，9，11能较好的抑制HaCaT细胞增殖，同时所有单体化合物对肿瘤坏死因子α（TNF-α）刺激的HaCaT细胞分泌白介素1（IL-1）无显著性改变，但化合物4，5，12能在一定程度上减少IL-6的分泌。

泽漆；化学成分；结构鉴定；角质形成细胞HaCaT

泽漆（Euphorbia helioscopia L.）又名猫眼草、五朵云、五凤草，为大戟目大戟科一年生或两年生草本植物，分布于除新疆、西藏以外的全国各省区。泽漆味辛、苦，性微寒，全草入药，主治水气肿满、痰饮喘咳疟疾、菌痢、瘰疬、结核性瘘管、骨髓炎［1］。研究［2-3］表明泽漆具有抗肿瘤、抑菌杀虫、止咳平喘、抗银屑病等作用。为了阐明其抗银屑病的药效物质基础，该研究对泽漆提取物的化学成分进行了系统的分离，并观察得到的单体化合物对角质形成细胞HaCaT的增殖抑制作用，及对细胞分泌白介素1（interleukin-1，IL-1）和IL-6的影响，为进一步开发泽漆提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 药材泽漆于夏季6月采自河南省巩义县，经安徽医科大学药学院中药学教研室鉴定属大戟科大戟属泽漆Euphorbia helioscopia L.。

1.2 仪器与试剂AM-300、400，DRX-500型核磁共振光谱仪（瑞士Bruker公司，四甲基硅烷作为内标）；Sephadex LH-20（瑞典GEHealthcare Bio-Sciences公司）；MCI小孔树脂（日本Mitsubishi Chemical公司）；十八烷基键合硅胶（octadecylsilyl，ODS，日本Fujisilysia Chemical公司）；硅胶（青岛海洋化工厂）；薄层色谱GF254硅胶板板（烟台江友硅胶开发有限公司）；氘代试剂（美国Sigma-aldrich公司）；胎牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）；DMEM高糖培养基（美国Hyclone）；CCK-8试剂盒（上海贝博生物）；ELISA试剂盒（美国R&D公司）。

1.3 方法

1.3.1提取分离 取泽漆阴干药材15 kg，倒入提取罐，加90%的乙醇溶液80 L，蒸汽加热至60℃，在该温度条件下浸泡24 h，浸泡液经旋转蒸发仪蒸干溶剂，得到总提物浸膏，并重复提取4次。合并4次所得总提物浸膏1.14 kg。加水混悬后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，萃取液浓缩至干，得到石油醚部位（Fra），氯仿部位（Frb），乙酸乙酯部位（Frc）和正丁醇部位（Frd）。石油醚部位Fra（120 g）经硅胶柱色谱（石油醚-乙酸乙酯50∶1～0∶1）梯度洗脱得到8个部分，Fra-1～Fra-8。Fra-4经过Sephadex LH-20（石油醚-氯仿-甲醇10∶10∶1）、中低压柱色谱（石油醚-丙酮20∶1）、反复硅胶柱色谱以及重结晶的方法进一步分离和纯化，得到化合物1（277 mg），10（55 mg），2（135 mg）。Fra-6经中低压柱色谱（石油醚-丙酮15∶1）得到6个部分，Fra-6-1～Fra-6-6。Fra-6-2经Sephadex LH-20、反复硅胶柱色谱，得到化合物11（34 mg）。Fra-6-6经反复硅胶柱色谱得到化合物12（28 mg）。氯仿部位Frb（250 g）经硅胶柱色谱（石油醚-丙酮60∶1～0∶1）梯度洗脱得到9个部分，Frb-1～Frb-9。Frb-5经硅胶柱（石油醚-丙酮10∶1～0∶1）得到5个部分，Frb-5-1～Frb-5-5，其中Frb-5-3经Sephadex LH-20（纯乙醇），硅胶柱，ODS-C18柱色谱进一步分离纯化，得到化合物8（10 mg）。Frb-8经硅胶柱色谱（氯仿-甲醇50∶1～0∶1）得到8个部分，Frb-8-1～Frb-8-9。Frb-8-3经Sephadex LH-20（30%～100%甲醇）、MCI（0～100%甲醇）以及反复硅胶柱色谱得到化合物9（8 mg）。Frb-8-3经Sephadex LH-20（30%～100%甲醇）、MCI（0～100%甲醇）以及反复硅胶柱色谱得到化合物3（25 mg），7（15 mg）。Frb-8-8经Sephadex LH-20（30%～100%甲醇）、MCI（0～100%甲醇）以及反复硅胶柱色谱得到化合物6（23 mg），5（15 mg），4（31 mg）。

1.3.2CCK-8法检测细胞增殖抑制作用 取对数期的HaCaT细胞以4×103个/孔的细胞密度接种于96孔板中，边缘孔用PBS填充，空白对照组加入等体积的培养基不接种细胞，置于37℃、5%CO2培养箱中孵育24 h后，空白对照组加等体积的培养基，药物组加入等体积不同浓度的药物（药物终浓度为12.5、25、50、100、200μmol/L），置于37℃、5%CO2培养箱中孵育24 h后，吸弃培养基，药物组加入等体积不同浓度的药物，空白对照组加等体积的培养基，置于37℃、5%CO2培养箱中继续孵育24 h后每孔加入10μl CCK-8，置于37℃、5%CO2培养箱中孵育3 h后，震荡数分钟后用酶标仪测定450 nm处各孔的吸光度值。

1.3.3ELISA法检测IL-6、IL-8含量 取对数期的HaCaT细胞，以1×104个/孔的细胞密度接种于96孔板中，空白对照组加入等体积的培养基不接种细胞，置于37℃、5%CO2培养箱中孵育12 h，待细胞贴壁后，加入10 ng/ml肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor，TNF-α）溶液刺激，继续培养12 h后，药物组加入等体积不同浓度的药物（药物终浓度为6.25、12.5、25、50、100μmol/L）其中槲皮素作为阳性对照组。培养24 h后，吸取各孔上清液，4℃、3000 r/min离心10 min，取上清液，按照ELISA试剂盒说明操作。

1.4 统计学处理采用SPSS17.0软件进行分析，计量资料用表示。组间比较采用单因素ANOVA方差分析，两两比较采用LSD法检验。

2 结果

2.1 结构鉴定化合物1：白色胶状物，分子式C31H64O，1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ3.64（t，J=6.6 Hz，2H，H-1），1.54（m，2H，H-2），1.25（m，56H，H-3～29），0.88（t，J=6.7 Hz，3H，H-31）。13CNMR（101 MHz，CDCl3）δ63.10（C-1），32.83（C-2），31.93（C-3），29.70到29.80（C-4～22）是1个大峰，29.66（C-25），29.61（C-26），29.44（C-27），29.36（C-28），25.74（C-29），22.68（C-30），14.09（C-31）。以上数据与文献［4］对比，确定化合物1为正三十一烷醇。

化合物2：白色针状结晶，分子式为C29H50O。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ5.35（d，J=4.8 Hz，1H），3.52（m，1H），1.00（s，3H），0.92（d，J=6.5 Hz，3H），0.82（m，9H），0.68（s，3H）。13CNMR（101 MHz，CDCl3）δ140.90（C-5），121.86（C-6），71.95（C-3），56.92（C-14），56.21（C-17），50.29（C-9），45.99（C-24），42.47（C-13），42.44（C-4），39.93（C-12），37.41（C-1），36.65（C-10），36.30（C-20），34.10（C-22），32.06（C-7），31.80（C-2），31.80（C-8），29.30（C-25），28.40（C-16），26.23（C-23），24.45（C-15），23.22（C-28），21.23（C-11），19.96（C-26），19.54（C-19），19.18（C-27），18.93（C-21），12.13（C-29），12.01（C-18）。以上数据与文献［5］对比，确定化合物2为β-谷甾醇。

化合物3：白色针状结晶，分子式为C27H28N2O4。1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ7.71（d，J=8.5 Hz，2H，H-3′，7′），7.52（t，J=7.4 Hz，1H，H-5′），7.44（t，J=7.7 Hz，2H，H-3′，7′），7.17（d，J=6.8 Hz，1H），7.13（dd，J=14.3，7.4 Hz，2H），7.06（d，J =7.2 Hz，2H，H-4′′，8′′），6.81（d，J=7.6 Hz，1H，-NH），6.07（d，J=8.5 Hz，1H，-NH），4.78（dd，J= 14.1，7.9 Hz，1H，H-2），4.35（m，1H，H-1′′），3.92（dd，J=11.3，4.9 Hz，1H，H-9′′a），3.82（dd，J= 11.3，4.2 Hz，1H，H-9′′b），3.22（dd，J=13.7，5.9 Hz，1H，H-3a），3.06（dd，J=13.7，8.4 Hz，1H，H-3b），2.74（m，2H，H-2′′），2.02（s，3H，-COCH3）。13CNMR（151 MHz，CDCl3）δ170.92（-COCH3），170.38（C-1），167.24（C-1′），136.81（C-4），136.71（C-3′′），133.75（C-2′），132.05（C-5′），129.41（C-6，8），129.24（C-5′′，7′′），128.86（C-4′′，8′′），128.76（C-5，9），128.70（C-3′，7′），127.26（C-7），127.18（C-4′，6′），126.86（C-6′′），64.71（C-9′′），55.10（C-2），49.55（C-1′′），38.58（C-3），37.55（C-2′′），20.95（-COCH3）。以上数据与文献［6］对比，确定化合物3为金色酰胺醇酯。

化合物4：黄色粉末，分子式为C15H10O7。1HNMR（600 MHz，CD3COCD3）δ7.80（d，J=1.9 Hz，1H，H-2′），7.65（dd，J=8.5，1.8 Hz，1H，H-6′），6.98（d，J=8.5 Hz，1H，H-5′），6.50（d，J=1.6 Hz，1H，H-8），6.23（d，J=1.6 Hz，1H，H-8）。13CNMR（101 MHz，CD3COCD3）δ176.12（C-4），164.92（C-7），162.05（C-9），157.36（C-5），148.42（C-4′），146.72（C-2），145.95（C-3′），136.17（C-3），123.47（C-1′），121.32（C-6′），116.09（C-5′），115.58（C-2′），103.77（C-10），98.83（C-6），94.10（C-8）。以上数据与文献［5］对比，确定化合物4为槲皮素。

化合物5：黄色粉末，分子式C17H14O”5。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ12.68（s，1H，OH-5），7.91（dd，J=20.4，7.3 Hz，2H，H-2′，6′），7.54（m，3H，H-3′，4′，5′），6.67（s，1H，H-8），6.57（s，1H，H-3），3.96（d，J=8.2 Hz，3H，CH3O-6），3.93（s，3H，CH3O-7）。13CNMR（101 MHz，CDCl3）δ182.74（C-4），163.98（C-7），158.93（C-2），153.34（C-9），153.04（C-5），132.72（C-6），131.85（C-4′），131.31（C-1′），129.11（C-3′，5′），126.26（C-2′，6′），106.31（C-10），105.62（C-3），90.67（C-8），60.86（CH3O-7），56.34（CH3O-6）。以上数据与文献［7］对比，确定化合物5为5-羟基-6，7-二甲氧基黄酮。

化合物6：淡黄色粉末，分子式为C30H26O13。1HNMR（400 MHz，CD3OD）δ7.91（d，J=8.5 Hz，2H，H-2′，6′），7.32（d，J=15.9 Hz，1H），7.23（d，J=8.3 Hz，2H，H-2′′，6′′），6.73（t，J=8.6 Hz，4H，H-3′，5′，3′′′，5′′′），6.22（s，1H，H-8），6.05（s，1H，H-6），5.99（d，J=15.9 Hz，1H，H-8′′′），5.16（d，J=6.9 Hz，1H，H-1′′），4.23（d，J=6.9 Hz，1H，H-6′′b），4.11（dd，J=11.7，6.6 Hz，1H，H-6′′a），3.2-3.4（m，4H，H-2′′，H-3′′，4′′，5′′）。13CNMR（101 MHz，CD3OD）δ177.83（C-4），167.29（C-9′′′），164.79（C-7），161.43（C-5），160.00（C-4′），159.68（C-4′′′），157.79（C-2），156.92（C-9），145.04（C-7′′′），133.68（C-3），130.69（C-2′，6′），129.67（C-2′′′，6′′′），125.57（C-1′′′），121.21（C-1′），115.28（C-3′′′，5′′′），114.53（C-3′，5′），113.22（C-8′′′），103.98（C-10），102.50（C-1′′），98.60（C-6），93.41（C-8），76.50（C-5′′），74.29（C-2′′），74.21（C-3′′），70.21（C-4′′），62.80（C-6′′）。以上数据与文献［8］对比，确定化合物6为山奈酚香豆酰基葡萄吡喃糖苷。

化合物7：淡黄色粉末，分子式C15H12O5。1HNMR（400 MHz，CD3COCD3）δ12.18（s，1H），7.40（dd，J=2.0 Hz，J=8.4 Hz，2H，H-2′，H-6′），6.90（dd，J=2.1，8.5 Hz，2H，H-3′，H-5′），5.96（d，J =2.0 Hz，2H，H-6，H-8），5.46（dd，J=12.9，2.7 Hz，1H，H-2），3.19（dd，J=17.1，12.9 Hz，1H，H-3a），2.73（dd，J=17.1，3.0 Hz，1H，H-3b），2.15（s，1H），2.09（s，1H），2.05（dd，J=4.2，2.1 Hz，2H），1.29（s，2H），1.21（d，J=5.2 Hz，1H）。13CNMR（101 MHz，CD3COCD3）δ197.27（C-4），167.37（C-7），165.32（C-5），164.40（C-9），158.73（C-4′），130.81（C-1′），129.04（C-2′，C-6′），116.19（C-3′，C-5′），103.24（C-10），96.83（C-6），95.86（C-8），79.96（C-2），43.51（C-3）。以上数据与文献［9］对比，确定化合物7为柚皮素。

化合物8：淡黄色粉末，C11H10O5。1HNMR（400 MHz，CD3COCD3）δ8.60（s，1H，OH-7），7.84（d，J= 9.5 Hz，1H，H-4），6.99（s，1H，H-5），6.20（d，J=9.5 Hz，1H，H-3），3.94（s，3H，CH3O-8），3.89（s，3H，CH3O-8）。13CNMR（101 MHz，CD3COCD3）δ160.82（C-2），146.40（C-6），145.11（C-4），144.82（C-7），144.45（C-9），135.77（C-8），113.47（C-3），111.71（C-10），105.09（C-5），61.32（CH3O-8），56.77（CH3O-6）。以上数据与文献［10］对比，确定化合物8为异嗪皮啶。

化合物9：棕黄色粉末，分子式为C20H22O6（358）1HNMR（600 MHz，CD3COCD3）δ6.99（s，2H，H-2，2′），6.83（d，J=8.1 Hz，2H，H-6，6′），6.79（d，J =8.1 Hz，2H，H-5，5′），4.67（d，J=3.6 Hz，2H，H-7，7′），4.20（dd，J=8.4，6.7 Hz，2H，H-9a，9a′），3.84（s，6H，2×OCH3），3.80（dd，J=8.9，2.9 Hz，2H，H-9b，9b′），3.08（m，2H，H-8，8′）。13CNMR（151 MHz，CD3COCD3）δ148.30（C-3，3′），146.84（C-4，4′），134.13（C-1，1′），119.59（C-6，6′），115.51（C-5，5′），110.55（C-2，2′），86.62（C-7，7′），72.19（C-9，9′），56.21（3，3′-OCH3），55.22（C-8，8′）。以上数据与文献［11］对比，确定化合物9为松脂素。

化合物10：无色针状结晶，分子式为C38H44O9。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ7.85（d，J=7.6 Hz，2H，H-2′，6′），7.57（d，J=7.7 Hz，2H，H-2′′，6′′），7.46（t，J=7.4 Hz，1H，H-4′），7.31（t，J=5.3 Hz，1H，H-4′′），7.27（d，J=6.6 Hz，2H，H-3′，5′），6.97（t，J=7.7 Hz，2H，H-3′′，5′′），5.95（s，1H，H-14），5.87（d，J=8.5 Hz，1H，H-5），5.70（dd，J= 11.2，3.7 Hz，1H，H-7a），5.39（d，J=16.05 Hz，1H，H-11a），5.22（dd，J=16.0，8.9 Hz，1H，H-12），5.14（d，J=6.4 Hz，1H，H-3），3.34（d，J=13.61 Hz，1H，H-8a），3.29（d，J=6.89 Hz，1H，H-4），3.00（dd，J=15.4，8.3 Hz，1H，H-1a），2.85（dd，J=15.7，3.7 Hz，1H，H-8b），2.47（m，1H，H-13），2.21（s，3H，-COCH3-14），2.17（s，3H，-COCH3-15），1.95（s，3H，H-17），2.13（m，1H，H-2a），1.50（dd，J=15.4，7.8 Hz，1H，H-1b），1.31（s，3H，H-19），1.14（s，3H，H-18），1.09（d，J=7.1 Hz，3H，H-16），0.93（d，J=7.0 Hz，3H，H-20）。13CNMR（101 MHz，CDCl3）δ207.52（C-9），170.04（-COCH3-14），169.99（-COCH3-14），165.89（OBz-7），165.42（OBz-7），135.48（C-6），133.69（C-11），133.67（C-12），132.67（C-4′），132.38（C-4′′），130.44（C-1′），129.91（C-1′′），129.31（C-2′，6′），129.23（C-2′′，6′′），128.21（C-3′，5′），127.94（C-3′′，5′′），122.73（C-5），92.43（C-15），84.28（C-3），75.61（C-14），74.18（C-7），49.13（C-10），44.02（C-4），43.60（C-1），42.82（C-8），38.00（C-13），37.82（C-2），25.47（C-18），24.94（C-19），22.88（C-20），22.06（-COCH3-14），21.01（-COCH3-15），19.27（C-16），18.81（C-17）。以上数据与文献［12］对比，确定化合物10为14α，15β-二乙酰氧基-3α，7β-二苯甲酰基-9-氧代-2β，13α-麻风树-5E，11E二烯。

化合物11：无色针状结晶，分子式为C33H44O9。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ7.99（m，2H，H-2′，6′），7.54（t，J=7.4 Hz，1H，H-4′），7.43（t，J=7.6 Hz，2H，H-3′，5′），5.93（s，1H，H-14），5.66（m，1H，H-5），5.39（dd，J=11.3，3.6 Hz，1H，H-7），5.35（d，J=6.3 Hz，1H，H-11），5.20（dd，J=6.9，3.5 Hz，1H，H-3），5.17（dd，J=12.9，5.6 Hz，1H，H-12），3.26（t，J=8.0 Hz，1H，H-4），3.15（dd，J=15.8，11.6 Hz，1H，H-8），2.98（dd，J=15.2，8.0 Hz，1H，H-1a），2.68（dd，J=15.8，4.4 Hz，1H，H-8b），2.44（m，1H，H-2），2.23（s，3H，-COCH3-15），2.18（m，3H，-COCH3-14），1.86（d，J=0.8 Hz，3H，H-17），1.43（dd，J=15.2，9.2 Hz，1H，H-1b），1.26（s，3H，-COCH3-7），1.24（s，3H，H-19），1.11（dd，J=10.3，5.7 Hz，6H，H-18，H-20），0.92（d，J=7.1 Hz，3H，H-16）。13CNMR（101 MHz，CDCl3）δ207.54（C-9），170.29（-COCH3-14），170.07（-COCH3-15），170.02（-COCH3-7），165.39（OBz-3），135.84（C-6），133.67（C-11），133.66（C-4′），132.80（C-12），130.70（C-1′），129.51（C-2′，6′），128.32（C-3′，5′），122.64（C-5），92.28（C-15），83.33（C-3），75.33（C-14），73.40（C-7），49.00（C-10），44.20（C-4），43.07（C-1），42.92（C-8），37.73（C-2），37.69（C-13），25.27（C-18），24.93（C-19），23.02（C-20），22.06（-COCH3-15），21.01（-COCH3-14），20.08（-COCH3-7），18.90（C-16），18.85（C-17）。以上数据与文献［13］对比，确定化合物11为euphoscopin B。

化合物12：无色针状结晶，分子式为C33H44O9。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ8.09（m，2H），7.53（t，J=7.3 Hz，1H），7.45（t，J=7.4 Hz，2H），7.28（s，1H），5.73（t，J=12.3 Hz，1H），5.64（dd，J= 15.6，9.3 Hz，1H），5.43（t，J=3.9 Hz，1H），5.06（d，J=15.6 Hz，1H），4.94（m，2H），4.77（t，J=3.3 Hz，1H），2.88（dt，J=18.3，9.1 Hz，1H），2.58（dd，J =21.1，14.3 Hz，1H），2.23（s，3H），1.95（m，3H），1.73（s，3H），1.18（s，3H），0.97（m，9H），0.89（s，3H）。13CNMR（101 MHz，CDCl3）δ171.22，169.63，169.09，165.63（-C=O×4），138.15（C-5），133.79（C-6），132.82（C-4′），130.16（C-1′），129.78（C-3′，5′），128.69（C-11），128.47（C-2′，6′），120.04（C-12），83.76（C-15），80.96（C-3），80.73（C-7），73.57（C-9），72.92（C-14），47.83（C-13），46.22（C-8），39.64（C-10），39.46（C-4），36.69（C-2），32.42（C-1），22.61，21.07，20.99（-COCH3×3），20.22（C-20），19.84（C-19），19.43（C-18），16.14（C-17），13.49（C-16）。以上数据与文献［14］对比，确定化合物12为euphorninⅠ。

2.2 化合物对HaCaT增殖的影响利用CCK-8法检测分离得到的单体化合物对角质形成细胞HaCaT增殖的影响，比较各化合物的半数抑制浓度（halfmaximal inhibitory concentration，IC50），以维A酸作为阳性对照药。结果显示，化合物1、4、5、7、8、9、11、12有一定的抑制HaCaT细胞增殖的能力（表1）。其中化合物4、9、11的抑制作用接近阳性药维A酸（52.67μmol/L）。

2.3 化合物对TNF-α刺激的HaCaT细胞分泌细胞因子的影响对分离得到的单体化合物进行抗炎活性筛选，采用ELISA法测定TNF-α刺激的HaCaT细胞上清液中IL-1和IL-6的含量，以化合物4槲皮素作为阳性对照药。结果显示，化合物对TNF-α刺激的HaCaT细胞IL-1分泌量差异无统计学意义，但能在一定程度上减少IL-6的分泌，同时化合5、12减少IL-6的产生最为明显（表2）。

3 讨论

银屑病是一种以皮肤角质形成细胞过度增殖为病理特征的炎症性皮肤疾病，其发病机制至今仍不十分清楚。局部浸润的炎细胞和表皮角质形成细胞通过分泌TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8和干扰素-γ等细胞因子，在银屑病发生过程中起重要作用［15］。泽漆是大戟属植物，主要化学成分包括二萜酯类、黄酮类、三萜、甾醇和多酚类化合物。临床上有将泽漆制成针剂、胶囊剂用于银屑病患者的治疗，并且有确切的疗效［3］。但其治疗银屑病的具体成分尚不明确。本文从传统的天然产物分离手段入手，分离得到12个化合物，其中5、6、8、9为首次从属内发现，主要为黄酮类和萜类化合物。对化合物进行初步抗银屑病活性筛选，结果显示，化合物4、9、11能较好的抑制HaCaT的增殖，同时所有单体化合物对TNF-α刺激活化的HaCaT细胞分泌的IL-1无显著性改变，但4、5、12能在一定程度上减少IL-6的分泌。

然而，泽漆其余部分的化成成分仍然未知，因此还需进一步的分离和筛选抗银屑病化合物，得到一些活性更好的化合物，为明确泽漆抗银屑病药效提供物质基础。

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Study on chem ical constituents of Euphorbia helioscopia L.

Zhao Jie，Wu Fanrong，Han Xu，et al
（School of Pharmacy，AnhuiMedical University，Anhui Key Laboratory of Bioactivity of Natural Products，Hefei 230032）

ObjectiveTo investigate the chemical constituents of Euphorbia helioscopia L.and their anti-psoriasis activities.MethodsThe separation and purification of constituents were performed by silica gel，Sephadex LH-20，MCI，ODS-C18 and recrystallization.Their structures were elucidated spectroscopic methods.The effects of these constituents on HaCaT Cell proliferation weremeasured by CCK-8 assay.And their anti-inflammatory effects were measured by ELISA.ResultsTwelve compoundswere isolated and their structureswere identified as1-hentriacontanol（1），β-sitosterol（2）aurantiamide acetate（3），quercetin（4），5-hydroxy-6，7-dimethoxyflavone（5），tiliroside（6），naringenin（7），isofraxidin（8），pinoresinol（9），14α，15β-diacetoxy-3α，7β-dibenzoyloxy-9-oxo-2βH，13αH-jatropha-5E，11E-diene（10），euphoscopin B（11），euphorninⅠ（12）.ConclusionCompounds 5，6，8，9 were isolated from this genus for the first time.Compounds4，9，11 were potent inhibitors against HaCaT cells in vitro and compounds 4，5，12 were capable of decreasing IL-6 in TNF-αstimulated HaCaT cells in vitro.

Euphorbia helioscopia L.；chemical constituents；structure identification；HaCaT cells

R 284.2

A

1000-1492（2016）03-0383-06

时间：2016/1/28 14：23：10 网络出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160128.1423.032.html

2016-01-08接收

2015年中医药行业科研专项（编号：201507002）

安徽医科大学药学院、安徽天然药物活性研究省级实验室，合肥 230032

赵 杰，男，硕士研究生；

陈飞虎，男，教授，博士生导师，责任作者，E-mail：cfhchina @sohu.com；

吴繁荣，男，副教授，讲师，责任作者，E-mail：aydwfr@163. com