动物检疫病料的采取和保存

白洪达　程志强　吉林省通榆县草原管理站　137200姜明达　吉林省通榆县动物疫病预防控制中心　137200



动物检疫病料的采取和保存

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姜明达吉林省通榆县动物疫病预防控制中心137200

动物传染病的种类繁多，病情复杂，单靠临床诊断常难以确诊，往往需要依靠血清学、病原学或病理组织学检验等方法协助诊断。为了达到早期确诊，应采取病料送兽医检验部门检验。

1采取检验病料的原则

（1）取材动物的选择。如有多数动物发病或死亡，应从症状和病变明显的病例采取。

（2）取材时间。为了提高检出率和防止污染，应自发病初期、症状明显且未经抗生素治疗的动物机体采取；取材时间应在死后数小时内，尤其在夏季不应超过6小时。动物死亡过久，一则尸体腐败，影响微生物学检验和病理检验，另外动物死后其肠道内的正常菌群特别是梭菌很快侵入血流和组织内，易引起误诊。

（3）无菌操作。要求做到采病料的器械经煮沸或高压灭菌处理。盛病料的容器应经灭菌处理，且一种病料只能放在一个容器（如小食品袋）内。采集实质器官时应在切开肌肉或脑、胸、腹腔后，立即采取，以保持病料的新鲜和不受污染。应先采病料后检查病变。病料块可适当大些，保证病料内部不被污染，以便化验室人员从病料内部采取供微生物检验用的病料。

（4）取材部位的选择。根据临床上怀疑的传染病，采取相应的检材，如疑为狂犬病，应采取脑和脊髓。对难以确定的病种，则可根据临床症状和病变取材或采取全身各种器官组织。

2　病料采取的方法

（1）供微生物学检验的病料的采取方法。脓汁、鼻汁、阴道分泌物、胸或腹水：液体量多且较稀薄时，可用灭菌注射器抽取，放入灭菌的青霉素、链霉素小瓶内；如腋汁黏稠不易抽取，可向脓肿内注入1～2mL灭菌生理盐水或磷酸缓冲液，然后反复抽取。分泌物黏稠且量少时，可用灭菌棉棒蘸取后，放入灭菌试管或小瓶中。乳汁：先对乳房皮肤进行清洗并消毒，弃掉最初挤出的3～4股乳汁，自患侧乳区挤出10mL左右的乳汁置于灭菌容器中。血液及血清：大动物自颈静脉采取约10mL，小动物可自心脏采取。为了防止血液凝固，应加入抗凝剂，如5％柠檬酸钠液。做血清学检验用的血清，应将盛血容器竖放，形成高层或斜面（牛、羊、鹿血液），于室温下或温箱内放置1～2小时，待凝固后放入4℃冰箱内，收集析出的血清，放入灭菌小瓶内。或将采得的血液放离心管中，直立凝固后，经1000转/分离心5～20分钟，血清即可析出。实质脏器：应在剖开胸腹腔后立即采取。如果剖开后暴露时间太长而有被污染的可能，则应在采取部位用酒精棉或烧红的铁篦烧烙后于烧烙部中间采取6～10cm2的脏器块，分别置于灭菌容器或塑料食品袋内。肠管及肠内容物：可将欲采肠管的上下两端用线结扎后剪断。也可用铁篦或酒精棉球烧烙后，剪一小口，用灭菌棉擦拭刮取肠黏膜及其内容物，放入灭菌容器中。脑与脊髓：按病理解剖开颅术要求打开头盖骨，采取脑、脊髓放入灭菌容器或保存液中保存。

（2）供病理组织学检验的材料。当怀疑是某种传染病时，应注意选择典型病变部位连同邻近的正常组织一并采取。取材用的刀剪要锋利，切面要求整齐，盛放的容器要大些，以免因挤压而造成脏器变形。

2　病料的保存

（1）细菌检验病料的保存。无菌采取的脏器标本，可放在无菌容器内，于低温下保存。有污染的可能时，应将标本放在灭菌的30％甘油缓冲盐水或饱和盐水中，容器加塞封闭。饱和盐水的配制：蒸馏水100mL，加入氯化钠38～40g，加热充分溶解，待冷后用数层纱布过滤，高压灭菌后备用。30％甘油缓冲盐水的配制：中性纯甘油30mL、氯化钠0.5g、磷酸氢二钠1g，加中性蒸馏水至100mL，混合后高压灭菌备用。

（2）病毒检验病料的保存。通常将标本放在50％甘油缓冲盐水或其他运输培养基内。

50％甘油缓冲盐水的配制。氯化钠2.5g、磷酸氢二钠10.74g、磷酸二氢钠0.46g，加中性蒸馏水100mL，溶解后再加入中性纯甘油150mL、中性蒸馏水50mL，混合，0.67兆帕高压灭菌30分钟后备用。

鸡蛋生理盐水。先将新鲜鸡蛋的表面用碘酊消毒，打开后将内容物倾入灭菌三角瓶内，按10％的量加入灭菌生理盐水 （全蛋液9份，灭菌生理盐水1份），摇匀后用灭菌纱布过滤，滤液在56～58℃下加热30分钟，每日1次共3次，冷却后备用。

（3）血清学检验病料的保存。血清可放在灭菌玻瓶或青霉素小瓶中，于4℃条件下保存，不要反复冻融。为了防腐，在血清中可加入5％石炭酸溶液1～2 滴/mL，或加入0.01％的叠氮钠防腐。

（4）病理检验病料的保存。将采取的脏器块立即浸入10％甲醛溶液 （市售福尔马林10mL，加清水30mL）中固定。也可用95％酒精固定。保存液的量以能浸没脏器块为宜。