3种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的对比分析

杨睿

3种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的对比分析

杨睿

目的通过对比3种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的结果,分析其临床应用价值。方法200例涂阴肺结核患者作为涂阴肺结核组,再选取同期45例非肺结核体检者作为非肺结核组。分别采取涂片、结核菌培养以及荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法进行检测。观察并对比3种检测方法的结果,分析不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法的临床应用价值。结果涂阴肺结核组涂片法检测的阳性率为21.5%,培养法检测的阳性率为34.0%,荧光定量PCR检测的阳性率为60.5%。涂阴肺结核组患者的涂片法、培养法以及荧光定量PCR检测的阳性率与非肺结核组(2.2%、0、2.2%)比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论涂片法检测快速方便,荧光定量PCR检测法敏感度高,假阳性低,培养法仍是诊断肺结核的金标准,3种检测方法相结合可提高涂阴肺结核的诊断率。

涂片法；培养法；荧光定量聚合酶链式反应；涂阴肺结核诊断

最近几年随着生活方式与生活环境的改变,我国肺结核疾病的发病率呈现上升趋势。肺结核作为第二大传染疾病不仅严重危害了患者的身体健康,也为患病人群的生活与工作带来严重困扰［1,2］。根据相关调查,肺结核疾病的发病可能与艾滋病和糖尿病的高发相关,由于艾滋病和糖尿病发病后使用的免疫抑制剂会对自身的免疫机制造成损伤,因此更容易感染病菌形成肺结核。同时人口的高流动性也为疾病的传播产生不良影响［3］。本院为了研究不同的支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核诊断中的结果,选取了部分涂阴肺结核患者和非肺结核体检者分别进行不同的检测方法诊断,现将结果总结报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2014年3月～2015年6月本院涂阴肺结核患者200例作为研究对象,为涂阴肺结核组,其中男119例,女81例,年龄23～48岁,平均年龄(34.7±5.8)岁。再选取同期的非肺结核体检者45例作为非肺结核组,其中大叶性肺炎患者19例,间质性肺炎患者15例,支气管扩张患者11例；其中男25例,女20例,年龄25～45岁,平均年龄(34.2±5.4)岁。两组患者性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2方法 首先对所有研究对象进行标本的采集与处理,方法如下：使用日本产的PENTAX EB-1570K型电子支气管镜进行标本采集,术前按照电子支气管镜常规操作进行准备。所有研究对象按照病变部位选择灌洗肺段,将电子支气管镜顶端严密插入肺段或肺亚段支气管开口处,将2 ml 2%的利多卡因经活检孔注入灌洗肺段进行局部麻醉,然后注入5～10 ml的生理盐水,立即用专用的回收装置吸引回收肺泡灌洗液,可重复灌洗3次,回收15 ml即可。对于回收的肺泡灌洗液分别进行涂片法、培养法以及荧光定量PCR法检测。涂片找抗酸杆菌按照中国防痨协会“结核病诊断实验室检验规程”操作,每300视野达到3条抗酸杆菌为阳性；结核菌培养法利用BacT全自动分枝杆菌快速培养仪器系统进行临床标本的分离与培养；荧光定量PCR检测支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA,每毫升DNA基因拷贝数量＞1×103为阳性。

1.3指标观察 观察并对比3种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在涂阴肺结核及非肺结核患者诊断中的结果,分析其临床应用价值。

1.4统计学方法 采用SPSS15.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

涂阴肺结核组涂片法检测的阳性率为21.5%,培养法检测的阳性率为34.0%,荧光定量PCR检测的阳性率为60.5%。涂阴肺结核组患者的涂片法、培养法以及荧光定量PCR检测的阳性率与非肺结核组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。其中荧光定量PCR检测法敏感度高,且假阳性低,培养法检测的假阳性率为0,仍是诊断肺结核的金标准。见表1。

表1 两组应用不同检测方法结果比较［n(%)］

3 讨论

根据国际性的研究数据显示,在全世界范围内,结核是由单一感染性疾病导致死亡的首要原因。因此,为了降低结核感染导致的死亡率,临床上应该给出肺结核疾病早期诊断的有效方法。临床上常用的也是最广泛应用的诊断方法是细菌学检测。结核菌分离培养是确诊结核的“金标准”,但是由于多种因素会影响痰菌检查结果而出现误差,所以细菌学检测针对早期活动性肺结核患者的阳性检出率并不高。本次研究中支气管肺泡灌洗液直接取材于病灶处支气管肺泡内,相对浓度较高,污染率较低,即使无痰的患者也可以检测［4］。本研究结果显示,涂阴肺结核组涂片法检测的阳性率为21.5%,培养法检测的阳性率为34.0%,荧光定量PCR检测的阳性率为60.5%。涂阴肺结核组患者的涂片法、培养法以及荧光定量PCR检测的阳性率与非肺结核组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。培养法检测的阳性率明显高于涂片法,说明培养法这种传统的检测涂阴肺结核的方法检出率高于涂片法。荧光定量PCR检测的阳性率明显高于培养法,表明荧光定量PCR检测的敏感性是3种检测方法中最高的,且根据非肺结核的检测结果显示,假阳性较低［5］。涂片法、培养法以及荧光定量PCR 3种不同的检测方法在临床应用过程中各具优缺点。涂片法的优势是简单、快速和廉价,缺点是敏感性和特异性较低,无法辨别活菌和死菌。培养法的优点是可鉴别活菌和死菌,灵敏度高于涂片法,为结核病诊断的金标准,缺点是检测时间长［6］。荧光定量PCR检测主要结合核酸扩增、杂交以及广谱技术,封闭状态下检测,避免了常规PCR因污染而导致的假阳性,灵敏度最高。

综上所述,涂片法检测快速方便,荧光定量PCR检测法敏感度高,假阳性低,培养法仍是诊断肺结核的金标准,3种检测方法相结合可提高涂阴肺结核的诊断率。

［1］晋梅.结核分枝杆菌快速培养对肺结核的诊断价值.基层医学论坛,2012,16(5):548-549.

［2］郑晓静,张宗德.结核病实验室诊断技术研发进展.临床肺科杂志,2010,15(11):1607-1609.

［3］庞玉林.灌洗液多种检测方法对菌阴肺结核的诊断价值分析.中国实验诊断学,2013,17(1):60-61.

［4］吴国兰,陈晓红,李学玲,等.4种不同支气管肺泡灌洗液结核杆菌检测方法在肺结核诊断中的应用研究.中国临床医生,2013,41(3):39-41.

［5］李艳英.56份结核杆菌涂片与培养的对比分析.临床肺科杂志,2012,17(5):941-942.

［6］康怡.不同方法检测痰和肺泡灌洗液中结核杆菌的分析.临床肺科杂志,2014,19(12):2253-2254.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.06.025

2015-11-17］

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