MVD在子宫内膜癌变过程中的表达及意义

金海燕 邓卓

·论著·

MVD在子宫内膜癌变过程中的表达及意义

金海燕 邓卓

目的研究微血管密度(MVD)在子宫内膜癌变过程中的表达及意义,探讨血管生成对子宫内膜癌发生、发展的影响。方法应用CD105单克隆抗体,通过免疫组织化学SP法标记正常增生期子宫内膜组(20例)、子宫内膜不典型增生组(20例)及子宫内膜腺癌组(26例)中的血管内皮细胞,再结合图像分析技术进行MVD计数。结果CD105-MVD值在正常增生期子宫内膜组(11.35±2.37)、子宫内膜不典型增生组(22.57±4.92)及子宫内膜腺癌组(27.66±2.31)中逐渐递增,三组比较差异具有统计学意义(F=137.969,P<0.01)；组间两两比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论肿瘤血管形成参与了子宫内膜癌发生、发展、浸润和转移的过程。

子宫内膜腺癌；微血管密度；CD105

子宫内膜癌(endometrial carcinoma)是发生于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤,以腺癌最常见,近年来发病有年轻化的趋势［1］。许多实体肿瘤的发生、发展及转移均依赖新生血管的形成,因此,本研究采用免疫组织化学方法及图像分析技术检测CD105标记的微血管密度(microvessel density,MVD)在正常增生期子宫内膜、子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌中的表达,以探讨血管生成对子宫内膜癌发生、发展的影响。

1 材料与方法

1.1 研究材料 随机选取26例子宫内膜腺癌石蜡标本作为子宫内膜腺癌组,同期20例子宫内膜不典型增生作为子宫内膜不典型组,20例正常增生期子宫内膜作为正常增生期子宫内膜组。术前均未接受放疗、化疗及激素治疗。

1.2 试剂及方法 鼠抗人CD105单克隆抗体(1∶50稀释)及免疫组织化学SP试剂盒购自迈新生物技术有限公司。标本经石蜡包埋、切片后用免疫组织化学SP法检测CD105的表达,采用DAB同步浸染显色法使所有切片显色时间相同［2］。设阳性对照及阴性对照。

1.3 图像分析 CD105主要定位于血管内皮细胞的细胞膜,按照Weidner法［3］进行MVD计数,先在低倍镜下选取血管最丰富区(即“hot spot”),再在400倍视野下分别计数MVD,每例计数5个视野,求其均值。每个与邻近微血管明显分离的阳性染色的血管内皮细胞或血管内皮细胞簇都视为独立的微血管。而直径>8个红细胞的血管、有厚的平滑肌的血管及硬化区的血管不在计数范围内。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,两样本均数间比较采用独立样本t检验,多样本均数间比较采用单因素方差分析,多样本均数间两两比较采用LSD-t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

CD105标记的MVD(CD105-MVD)值在正常增生期子宫内膜组、子宫内膜不典型增生组及子宫内膜腺癌组中逐渐递增,三组比较差异具有统计学意义(F=137.969,P<0.01)；子宫内膜腺癌组与正常增生期子宫内膜组比较差异具有统计学意义(P<0.01),子宫内膜腺癌组与子宫内膜不典型增生组比较差异具有统计学意义(P<0.01),子宫内膜不典型增生组与正常增生期子宫内膜组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。CD105主要表达于血管内皮细胞的细胞膜和细胞质,细胞膜着色深于细胞质,把血管内皮细胞着色为棕黄色(见图1,图2,图3)。见表1。

表1 CD105-MVD在三组中的表达(±s)

表1 CD105-MVD在三组中的表达(±s)

注：与正常增生期子宫内膜组比较,aP<0.05；与子宫内膜不典型增生组比较,bP<0.05

组别 例数 CD105-MVD F P正常增生期子宫内膜组 20 11.35±2.37 137.969 <0.01子宫内膜不典型增生组 20 22.57±4.92a子宫内膜腺癌组 26 27.66±2.31ab

图1 CD105-MVD在正常增生期子宫内膜中的表达(免疫组织化学SP法,×400)

图2 CD105-MVD在子宫内膜不典型增生中的表达(免疫组织化学SP法,×400)

图3 CD105-MVD在子宫内膜腺癌中的表达(免疫组织化学SP法,×400)

3 讨论

新生的微血管是恶性肿瘤浸润和转移的第一站,微血管数量越多,肿瘤细胞进入血液循环的机会就越大［4］。肿瘤细胞在血管化之前极少能进入血液循环,因此血管形成是肿瘤发展和转移的关键,并由此提出了抗血管生成治疗理论［5］。近年来研究发现,子宫内膜癌的发生、发展过程中有血管生成,许多血管生长因子在子宫内膜癌中形成复杂的调控网络,影响着肿瘤内部的微血管密度,与子宫内膜癌的转移、复发及预后相关［6］。

目前多采用MVD计数的方法来检测肿瘤内的血管生成。MVD是指对肿瘤血管密集部位所进行的微小血管计数,MVD作为肿瘤血管生成评估的金标准,与肿瘤的恶性行为和复发转移密切相关。研究人员在对乳腺癌、膀胱移行细胞癌、前列腺癌等恶性肿瘤的研究中发现：MVD越低的患者预后越好。在对子宫内膜癌患者的随访中发现,MVD少的患者5年生存率显著高于MVD大的患者［7］。Guet等［8］对子宫内膜癌及子宫内膜增生症血管内皮细胞进行研究,发现子宫内膜癌组的MVD高于子宫内膜复杂型增生组,而子宫内膜复杂型增生组又高于子宫内膜单纯型增生组和正常对照组。Erdem等［9］亦证实MVD与病理分级、肌层浸润和淋巴、血管浸润相关,MVD是子宫内膜癌患者的一个独立预后因素。

本文研究结果显示,CD105主要表达于血管内皮细胞的细胞膜和细胞质,细胞膜着色深于细胞质,把血管内皮细胞着色为棕黄色。CD105标记的MVD(CD105-MVD)值在正常增生期子宫内膜组、子宫内膜不典型增生组及子宫内膜腺癌组中逐渐递增,三组比较差异具有统计学意义(F=137.969,P<0.01)；子宫内膜腺癌组与正常增生期子宫内膜组比较差异具有统计学意义(P<0.01),子宫内膜腺癌组与子宫内膜不典型增生组比较差异具有统计学意义(P<0.01),子宫内膜不典型增生组与正常增生期子宫内膜组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。

综上所述,CD105-MVD值在正常增生期子宫内膜、子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌中逐渐上升,提示子宫内膜癌血管生成活跃,血管生成参与了子宫内膜癌的发生、发展及侵袭转移。

［1］Stubert J,Gerbe B.Current issues in the diagnosis and treatment of endometrial carcinoma.Geburtshilfe Frauenheilkd,2016,76(2): 170-175.

［2］廖剑辉.DAB同步浸染显色法在免疫组织化学中的应用.暨南大学学报,1996,17(1):55-56.

［3］Weidner N,Folkman J,Pozza F,et al.Tumor angiogenesis: a new significant and independent prognostic indicator in early stage breast careinoma.Cancer,1992,84(24):1875-1887.

［4］Jia P,Cai H,Liu X,et al.Long non-coding RNA H19 regulates glioma angiogenesis and the biological behavior of gliomaassociated endothelial cells by inhibiting microRNA-29a.Cancer Lett,2016,6(16):30473-30476.

［5］Ye W.The complexity of translating anti-angiogenesis therapy from basic science to the clinic.Dev Cell,2016,37(2):114-125.

［6］Wang J,Taylor A,Showeil R,et al.Expression profiling andsignificance of VEGF-A,VEGFR2,VEGFR3 and related proteins in endometrial carcinoma.Cytokine,2014,68(2):94-100.

［7］Simionescu C,Margaritescu C,Stepan A,et al.Tumor angiogenesis,macrophages and mast cell microdensities in endometrioid endometrial carcinoma.Oncol Lett,2013,6(2):415-420.

［8］Guşet G,Costi S,Lazăr E,et al.Expression of vascular endothelial growth factor(VEGF) and assessment of microvascular density with CD34 as prognostic markers for endometrial carcinoma.Rom J Morphol Embryol,2010,51(4):677-682.

［9］Erdem O,Erdem M,Erdem A,et al.Expression of vascular endothelial growth factor and assessment of microvascular density with CD 34 and endoglin in proliferative endometrium,endometrial hyperplasia,and endometrial carcinoma.Int J Gynecol Cancer,2007,17(6):1327-1332.

Expression and significance by MVD in endometrial cancerization

JIN Hai-yan,DENG Zhuo.Department of Obstetrics and Gynecology,Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260,China

ObjectiveTo research expression and significance by microvessel density(MVD) in endometrial cancerization,and to investigate influence by angiogenesis on occurrence and development of endometrial carcinoma.MethodsVascular endothelial cells in endometrium of normal proliferative stage group(20 cases),atypical hyperplasia of endometrium group(20 cases),and endometrial adenocarcinoma group(26 cases) were marked by CD105 monoclonal antibody through immunohistochemical SP method.Further MVD count was made in combination with image analysis technique.ResultsCD105-MVD value was gradually decreased from(11.35±2.37) in endometrium of normal proliferative stage group,to(22.57±4.92) in atypical hyperplasia of endometrium group and(27.66±2.31) in endometrial adenocarcinoma group.Their difference had statistical significance across the three gorups(F=137.969,P<0.01),and the differences between each two groups all had statistical significance(P<0.01).ConclusionTumor angiogenesis is involved in occurrence,development,infiltration and metastasis of endometrial carcinoma.

Endometrial adenocarcinoma; Microvessel density; CD105

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.19.001

2016-08-22］

广州市卫生局医药卫生科技项目(广州市中医药科技项目) 资助(项目编号：20142A011022)

510260 广州医科大学附属第二医院妇产科