HPLC法对布洛芬混悬液中5种合成着色剂的检测分析

曲建国

HPLC法对布洛芬混悬液中5种合成着色剂的检测分析

曲建国

目的研究高效液相色谱法(HPLC)对布洛芬混悬液中5种合成着色剂的检测效果。方法使用聚酰胺法对布洛芬混悬液中的合成着色剂进行纯化与提取,分别采用HPLC进行合成着色剂测定。结果柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄以及诱惑红浓度分别在0.41～12.33、0.51～15.27、0.81～24.11、0.72～21.21、0.52～15.10 μg/ml的范围内与峰面积线性关系良好；5种合成着色剂的回收率均＞99%,精确度＞0.8；上海强生公司生产的布洛芬混悬液中合成着色剂主要为诱惑红,含量较低,从种类和含量两方面均优于天大药业生产的,且安全性更好。结论HPLC法检测布洛芬混悬液中合成着色剂的效果良好,操作方便简单,精确度高,可重复利用,经济性高。

高效液相色谱法；布洛芬；着色剂；检测

布洛芬中合成着色剂作为广泛使用的药用辅料之一,在人体内容易转化成其他有害衍生物,影响患者的身体健康,因此对合成着色剂进行检测是十分必要的［1,2］。目前对于合成着色剂的检测方法主要为HPLC法,本研究旨在探讨HPLC法对布洛芬混悬液中5种合成着色剂的检测效果,现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 仪器和药品 选择的高效液相色谱仪为Agilent 1260色谱仪,安捷伦(Chem Station工作站),Venusil MPC18柱。甲醇为色谱纯,乙酰胺、聚酰胺粉、甲酸、无水乙醇以及氨水为分析纯,水为超纯水。准备不同厂家生产的100ml布洛芬混悬液(A组:上海强生制药有限公司,国药准字H19991011;B组:天大药业有限公司,国药准字H10980251),分别精密吸取备0.50mg/ml的柠檬黄0.8ml、苋菜红1.2ml、胭脂红1.6ml、日落黄1.4ml以及诱惑红0.5ml置于50ml的容量瓶内,加水稀释、摇匀,作为混合标准品。

1.2 研究方法 精密量取5ml布洛芬混悬液放置于20ml的量瓶中,注入清水至刻度线,振荡摇匀,全部转移至离心管中,进行离心操作,选取上清液。将上清液加热到60℃,将聚酰胺粉倒入将色素吸附出来并转移至G3垂容漏斗中,用柠檬酸溶液搅拌抽滤,然后再用甲醇、甲酸以3∶2的比例进行搅拌洗涤,直至溶液无色,再加水直至溶液呈中性。最后将无水乙醇、氨水、水按7∶2∶1的比例进行5次解吸,5ml/次。收集解吸液自然蒸发至近干后加水溶解至10ml,利用滤膜滤过作为供试品。色谱柱选择250mm×4.6mm,流动相：A组：0.02 mol/L的乙酸铵,B组：甲醇。室温为25℃,检测波长250 nm,梯度条件见表1。将5种合成着色剂标准液按照一定比例稀释成系列溶液,按照色谱条件进行测定,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算线性方程。

表1 梯度条件表

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 5种合成着色剂的线性方程和最佳浓度见表2。

2.2 标准品的回收率情况比较 5种合成着色剂的回收率均＞99%,精确度＞0.8,各合成着色剂之间回收率、精确度比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

2.3 两个产家布洛芬混悬剂合成着色剂的含量比较 上海强生公司生产的布洛芬混悬液中合成着色剂主要为诱惑红,含量为(4.05±0.53) μg/ml；天大药业生产的布洛芬混悬液中合成着色剂为柠檬黄和胭脂红,含量分别为(38.33±0.45)、(33.49±0.97)μg/ml。见表4。

表2 5种合成着色剂的线性方程和最佳浓度表

表3 标准品的回收率情况比较

表4 两组布洛芬混悬剂合成着色剂的含量(±s,μg/ml)

表4 两组布洛芬混悬剂合成着色剂的含量(±s,μg/ml)

注：与A组比较,aP＜0.05

组别 容量(ml) 柠檬黄 胭脂红 诱惑红A组 1 0 0 4.05±0.53 B组 1 38.33±0.45a 33.49±0.97a 0a

3 讨论

本文发现柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄以及诱惑红浓度分别在0.41～12.33、0.51～15.27、0.81～24.11、0.72～21.21、0.52～15.10 μg/ml的范围内与峰面积线性关系良好。此外,5种合成着色剂的回收率均＞99%,精确度＞0.8,说明HPLC法检测合成着色剂无浪费,较经济。由于合成着色剂的极性较大,在色谱体系中是以离子化的形式存在的,在检测过程中添加无机电解质可以提高响应值,改善分离度。在本次研究中,以0.02 mol/L的乙酸铵和甲醇为流动相系统进行梯度洗脱,可以使各色谱分离良好,保留时间更长。此外,上海强生公司生产的布洛芬混悬液中合成着色剂主要为诱惑红,含量较低,从种类和含量两方面均优于于天大药业生产的,因此家属在布洛芬混悬液的选择上可优先选择前者。

综上所述,HPLC法检测布洛芬混悬液中合成着色剂的效果良好、 操作方便简单、 精确度高、 可重复利用、 经济性高。

［1］刘志辉.HPLC法测定布洛芬混悬液中5种合成着色剂.中国药事,2014,28(12):1322-1326.

［2］邹尚荣,申坤,李燕青,等.HPLC法测定右旋布洛芬缓释胶囊有关物质.海峡药学,2014,26(2):59-63.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.09.218

2016-01-31］

110036 辽宁省药品检验检测院检验一室