石油工人ET-1基因Lys198Asn位点与职业紧张和高血压关系的研究

张馨怡， 姜　雨， 赵云娟， 刘继文

(新疆医科大学1公共卫生学院， 2基础医学院免疫学教研室， 乌鲁木齐　830011)



石油工人ET-1基因Lys198Asn位点与职业紧张和高血压关系的研究

张馨怡1， 姜雨1， 赵云娟2， 刘继文1

(新疆医科大学1公共卫生学院，2基础医学院免疫学教研室， 乌鲁木齐830011)

摘要:目的探讨石油工人ET-1基因Lys198Asn位点与职业紧张和高血压的关系。方法(1)采用整群抽样的方法，抽取新疆石油工人1 473名作为研究对象，利用职业紧张量表(OSI-R)职业任务问卷(ORQ)测定其紧张程度，分析1 425份有效问卷；(2)抽取其中337名石油工人，病例组(血压≥140/90 mmHg)155名，对照组182名，采集血样进行DNA提取，并用RT-PCR的方法检测Lys198Asn位点，计数资料采用卡方检验，等级资料采用秩和检验。结果在不同职业紧张水平下，高血压的患病率差异有统计学意义(P<0.05)，不同职业紧张水平石油工人是否患高血压的人数差异有统计学意义(P<0.05)，高血压病例组和对照组Lys198Asn位点的不同基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)，不同紧张水平组的高血压与Lys198Asn位点基因型差异无统计学意义(P>0.05)。结论石油工人中，紧张程度高的是输油工。Lys198Asn位点可能与高血压的患病与否无关，不同紧张水平的石油工人患高血压可能与Lys198Asn位点无关。

关键词:石油工人； 职业紧张； Lys198Asn； 高血压

石油工人作为一个特殊群体，工作压力大，远离城市，且长期过度紧张容易患高血压等慢性疾病。ET-1基因位于第6号染色体，由5个外显子和4个内含子组成，主要由内皮细胞等产生，研究表明其可能与高血压的发生存在密切相关[1]。 Lys198Asn是ET-1基因位于第5外显子的第198位密码子+5665位点碱基颠换，即G突变为T导致的赖氨酸与天冬酰胺的转换，是目前研究较多的多态性位点，但因有限的人口规模、基因多态性、种族多样性以及不同的环境因素等，导致研究结果存在差异。Lys198Asn并不位于基因的调控区域，所以其基因表达较稳定，在不同的外界环境刺激下不大可能发生改变。有研究表明Lys198Asn并不会影响ET-1的功能和结构，但其可能参与ET前体的表达，从而间接导致高血压的产生[1]。本研究主要探索石油工人ET-1基因Lys198Asn位点与职业紧张和高血压的关系。

1材料与方法

1.1研究对象采用整群抽样的方法，选择从事同一岗位1 a以上且无明显精神性病变的1 473名新疆石油工人作为调查对象，每位接受调查者均自愿参与研究，并填写问卷。随机抽取问卷调查对象中患有高血压人数的50%为病例组，对照组按1∶2选择，共抽取501份血样进行多态性分析，剔除其中164份DNA未提出的血样后，最终共有合格样本337份，检测其Lys198Asn位点变异情况，年龄21～59岁，平均年龄(40.29±6.92)岁。病例组(血压≥140/90 mmHg)155名，对照组182名。

1.2研究方法

1.2.1问卷调查包括2个部分：人口学资料和职业紧张状况的调查。人口学资料包括年龄、性别、工种等基本信息。职业紧张情况：利用职业紧张量表[2]职业任务问卷(ORQ)，此问卷共60个条目，分别按5个级别赋分，共300分。根据得分评价职业紧张强度，并分为3个等级[2]：低度紧张(<120分)、中度紧张(120～160分)和高度紧张(>160分)。

1.2.2Lys198Asn位点检测

1.2.2.1血样采集于清晨空腹用EDTA抗凝管采集血样4 mL，3 000 r/min离心5 min，取血清，置于-4℃冰盒运回。

1.2.2.2DNA提取血样带回则即时提取，步骤按试剂盒附带的说明书严格操作。

1.2.2.3PCR反应反应体系上游引物为5′-AAGCATAGGGGCAGGCTTTATTTT-3′，下游引物为5′-AATGTGCTCGGTTGTGGGTCA-3′。PCR反应循环程序为：96℃ 1 min；96℃ 10 s，55℃ 5 s，60℃ 30 s(28cycles)；60℃ 30 s；4℃ for ever。延伸产物纯化：加1 U SAP酶到10 μL延伸产物中，水浴37℃ 1 h,灭活75℃ 15 min。测序样本的制备体系为10 μL，其中含有9.0 μL Hi-Di Formamide、0.5 μL GS-120 LIZ、0.5 μL延伸产物。将各组分充分混匀，变性95℃ 5 min，放入ABI3730XL测序仪。

1.3统计学方法将所有数据录入Epidata 3.1数据库，用SPSS 17.0进行统计学分析。卡方检验用于计数资料，秩和检验用于等级资料，检验水准α=0.05。

2结果

2.1基本情况此次调查共发放问卷1 473份，回收1 425份有效问卷，问卷具有96.74%的有效率。其中，年龄41～50岁人数最多，占总人数的39.6%；男性占48.6%，女性占51.4%；汉族人数最多，占77.0%；输油工所占比例最大，为40.5%；教育程度大中专最多；已婚占75.6%，未婚占24.4%；工龄>15 a所占比例最高，为63.2%，具体情况见表1。

2.2石油工人的职业紧张水平不同职业紧张水平的石油工人性别、工种差异有统计学意义(P<0.05)。高度紧张水平者中男性多于女性，中低度紧张则反之。低、中、高紧张水平者中输油工所占比例均为最高。工龄>15 a者紧张水平增高，人数随之递增，但差异无统计学意义(P=0.054)，见表2。

2.3不同职业紧张水平石油工人高血压患病率的比较不同职业紧张水平石油工人是否患高血压的人数差异有统计学意义(P<0.05)，随着紧张程度的升高，高血压的患病率呈现上升的趋势,结果见表3。

2.4高血压与Lys198Asn位点多态性的关联分析Lys198Asn位点基因型的实际值、 预期值分布差异无统计学意义(P>0.05)，符合Hardy-Weinberg遗传平衡检验，说明石油工人人群基因遗传平衡，具有代表性,见表4。对基因型进行赋值：GG为1，GT为2，TT为3，进行组间比较分析。结果高血压病例组和对照组Lys198Asn位点的不同基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)，见表5。不同紧张水平组的高血压与基因型差异无统计学意义(P>0.05)。提示不同紧张水平的石油工人患高血压可能与Lys198Asn位点无关，见表6。

表1　调查对象的一般情况(n=1 425)

3讨论

现代社会不断发展变化，压力源不断增多，引起的职业紧张状况日益严重。石油工人工作环境恶劣且远离城市、社交范围小、远离家人、轮班作业、工作压力大等各种因素均对其身心产生不利影响，较容易产生职业紧张。有研究显示职业紧张与高血压的患病有关[3]。内皮素-1(ET-1)是迄今为止确定的最有效的血管收缩剂，与高血压密切相关[4]。

本研究结果显示随着紧张程度的升高，高血压的患病率呈现上升的趋势，表明石油工人高度职业紧张更易患高血压，且男性石油工人高度职业紧张的人数较女性多，可能因为在石油行业中，男性主要承担重体力劳动及危险作业等,与Torén[5]和Schiöler等[6]的研究结果一致。输油工低、中、高度职业紧张水平均比采油工和炼化工高。其原因可能是输油工多在远离市区的输油泵站工作，如果工作中出现巡视、 监控不到位等情况极易导致输油管道破裂，造成石油泄露，引起人员伤亡事故或环境污染，导致个人生命健康受到伤害及企业财产损失，因此输油工承担着比采油工和炼化工更大的责任，从而更易引起职业紧张。本研究显示高血压病例组中GG基因型较多，此与Dzholdasbekova等[7]研究结果一致，但Mathew[8]的研究结果显示白人高血压患者TT基因型较常见，可能是人种或环境因素不同所致,新疆处于西北边陲，多种少数民族聚居于此地，最可能导致基因型与其他研究结果不一致的原因是人种差异。本研究显示高血压病例组和对照组Lys198Asn位点的不同基因型分布差异无统计学意义，与马明明[9]和Donald等[10]的研究结果一致，但与王镇等[11]的研究结果不一致。出现不一致的结果可能因为本研究选取的人群包含新疆多个民族，饮食、环境因素与其他研究不同，另一个可能的原因是由于条件有限导致样本例数较少。

表2　不同人口学特征石油工人职业紧张水平比较(n=1 425)

表3　不同职业紧张水平石油工人高血压患病率比较/n(%)

表4Lys198Asn位点的Hardy-Weinberg遗传平衡检验(n=337)

基因型实际值预期值χ2值P值等位基因频率GG181178.84G0.73GT129133.310.350.55T0.27TT2724.84

表5　病例组和对照组基因型比较(n=337)

表6　不同职业紧张水平组高血压与基因型比较(n=155)

本研究显示石油工人中，紧张程度高的是输油工，不同紧张水平组的高血压与基因型差异无统计学意义，说明Lys198Asn位点可能与高血压的患病与否无关，不同紧张水平的石油工人患高血压可能与Lys198Asn位点无关。高血压是多基因共同作用的结果，1个基因可能不单独作用于高血压，今后的研究中应考虑多基因之间的交互作用，并增大样本量。职业紧张影响着新疆石油工人的工作质量和身心健康，应引起相关部门的重视，采取相应措施，改善职业紧张状况，这对职业人群高血压的防治有重要意义。

参考文献：

[1]李丽华, 赵炳让.内皮素1基因多态性及其与高血压的关系[J]. 医学综述, 2008, 14(17):2595-2597.

[2]姜雨，连玉龙，刘波，等.职业紧张对油田野外作业工人睡眠质量的影响[J]. 工业卫生与职业病, 2015, 41(3):207-210.

[3] Oyunbileg D, Bolorm I. Environmental and occupational risk factors effect to arterial hypertension:correlation between arterial hypertension and lead[J].JEP, 2015, 3:60-65.

[4]Kawanabe Y, Surya M. Endothelin[J]. CMLS, 2011, 68:195-203.

[5]Torén K. The association between job strain and atrial fibrillation in Swedish men[J].Occup Environ Med,2015,72:177-180.

[6]Schiöler L， Giang WK. A longitudinal general population-based study of job strain and risk for coronary heart disease and stroke in Swedish men[J].BMJ Open,2014,4:2-6.

[7] Dzholdasbekova AU, Gaipov AE. The association between polymorphism of Lys198Asn of endothelin-1 gene and arterial hypertension risk in Kazakh people[J].Eur J Gen Med, 2010,7(2):187-191.

[8]Mathew J. Nteractive influences of ethnicity, endothelin-1 gene, and everyday discrimination upon nocturnal ambulatory blood pressure[J]. Annals Behavioral Med, 2013, 45(3):377-386.

[9]马明明. Endothelin家族基因SNPs及单体型分子标记及长沙汉族人群脑出血的关系研究[D].长沙:中南大学, 2010.

[10]Donald E, Donald E, Noreen F. Regulation of blood pressure and salt homeostasis by endothelin[J].Physiol Rev, 2011,91(1):1-77.

[11]王镇, 张勇. ET-1基因多态性与海南黎族人原发性高血压的相关性[J]. 中国老年学杂志, 2014, 34:4790-4792.

(本文编辑张巧莲)

Oil workers ET-1 gene Lys198Asn site relationship between occupational stress and hypertension

ZHANG Xinyi1， JIANG Yu1， ZHAO Yunjuan2， LIU Jiwen1

(1CollegeofPublicHealth,2DepartmentofImmunology,CollegeofBasicMedical,

XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011,China)

Abstract:ObjectiveTo research the oil workers ET-1 gene Lys198Asn site relationship between occupational stress and hypertension. MethodsA total of 1 473 Xingjiang oil workers were selected by cluster random sampling and measured the level of their occupational stress with the occupational stress inventory revised edition (OSI-R) and occupational role questionnaire (ORQ). 1 425 questionnaires were valid. 337 oil workers were selected, including 155 oil workers as hypertension group (blood pressure≥140/90 mmHg) and 182 oil workers as control group. The blood samples were taken of each subject, and extracted DNA to detecte Lys198Asn gene with R T-PCR to know hypertension susceptibility gene in this population. Chi-square test was used for enumeration data and rank sum test was used for ranked data. ResultsUnder the different levels of occupational stress ,the prevalence of hypertension was statistically significant (P<0.05), different occupational stress level was suffering from the different risk of hypertension, the different was statistically significant (P<0.05), different genotypes of Lys198Asn sites were no significant differences in the hypertension group and control group (P>0.05), Lys198Asn site genotype in different level of occupational stress with hypertension was no statistical significance (P>0.05). ConclusionIn oil workers, oil transportation workers have higher occupational stress. Lys198Asn site may be has no relationship with hypertension, Different levels of oil workers suffering from hypertension or not may be unrelated to Lys198Asn site.

Keywords:oil workers; occupational stress; Lys198Asn; hypertension

[收稿日期：2015-09-22]

doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2016.02.027

中图分类号：R13; R34

文献标识码：A

文章编号：1009-5551(2016)02-0235-04

作者简介：张馨怡(1991-)，女，在读硕士，研究方向：职业紧张与健康。通信作者：刘继文，女，教授，博士生导师，研究方向：职业紧张与健康，E-mail：liujiwendr@163.com。

基金项目：国家自然科学基金(81260424；81260425)

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