女性下生殖道HPV不同感染类型的血清INF-ε水平

许燕丽，邹丽兰，陈婉秋

(深圳市宝安区石岩人民医院妇产科,广东 深圳　518108)



女性下生殖道HPV不同感染类型的血清INF-ε水平

许燕丽，邹丽兰，陈婉秋

(深圳市宝安区石岩人民医院妇产科,广东 深圳518108)

[摘要]目的：探讨女性下生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染类型与血清干扰素-ε(INF-ε)水平的关系。方法：将2014年1月至2015年1月在我院确诊为下生殖道HPV感染的女性患者230例作为研究对象，依据HPV感染的类型分为HPV低危型感染组(105例)和HPV高危型感染组(125例)，选取同期妇科健康体检的妇女(30例)作为对照组。3组都进行血清INF-ε水平和HPV感染及类型的检测。结果：对照组与HPV低危型感染组之间的血清INF-ε水平无显著性差异，而HPV高危型感染组血清INF-ε水平显著低于对照组(P<0.05)。结论：女性下生殖道HPV高危型感染者血清INF-ε水平下降。

[关键词]人乳头瘤病毒；干扰素-ε；高危型

人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)在女性生殖道病毒感染中常见且后果严重，扁平湿疣类病变、宫颈上皮内瘤变Ⅰ(cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ，CINⅠ)多由HPV低危型导致，而女性常见的第二大肿瘤——宫颈癌99%伴随高危型HPV感染。干扰素-ε(INF-ε)是2001年Conldin发现的新型Ⅰ类干扰素，具有抗病毒、抗肿瘤的作用。为了探讨HPV不同感染类型患者血清INF-ε水平是否有变化，研究血清INF-ε与HPV感染及其类型的关系，我们选取230例HPV感染者和30例健康体检女性，检测其血清INF-ε的变化，探讨血清INF-ε与HPV感染类型的关系。

1资料与方法

1.1研究对象选取2014年1月到2015年1月230例在我院就诊的妇科下生殖道HPV感染患者作为研究对象。纳入标准：有性生活史、非妊娠期；患者年龄18～70岁，并取得患者的知情同意及伦理学委员会的通过；无盆腔放射治疗史，无子宫切除史者。选取同期妇科健康体检的妇女30例作为对照组。

1.2分组230例妇科下生殖道HPV感染患者根据HPV感染类型分组，其中HPV低危型感染组105例,HPV高危型感染组125例。选取30例同期在本院体检中心体验的健康女性作为对照组，HPV阴性。3组年龄、孕产史、体质量指数等临床指标无显著性差异。

1.3方法

1.3.1HPV感染型检测所有受检者取材前72 h内禁止性生活，禁止阴道用药及阴道检查。均提取宫颈脱落细胞中DNA片段，用信号放大法(基因杂交捕获二代技术)，通过杂交捕获试验检测特异DNA片段，及PCR扩增判定患者下生殖道HPV感染及其类型。

1.3.2血清干扰素(INF-ε)检测所有受检者于卵泡期(月经周期第5～8天)采集空腹静脉血3 mL，置于含有依地酸二钠(ENTA-Na2)的抗凝试管中，应用1 000 r/min速度离心2 h以分离血浆。取血清置于-70 ℃的冰箱中储存，作为样本备检。应用自动酶标仪(Elecsys2010型)检测样本中INF-ε水平，所用INF-ε水平检测ELISA试剂盒购自美国Roch公司。每次测定的INF-ε水平绘制标准曲线，保持其与吸光度的相关系数在0.995～1.000范围内。采用双盲法进行测定。

1.4统计学处理采用SPSS17.0软件进行统计检验，计量资料比较采取方差分析。

2结果

HPV低危型感染组105例的INF-ε为10.87±3.20 ng/L，HPV高危型感染组125例的INF-ε为8.34±2.41 ng/L，对照组30例的INF-ε为11.78±2.10 ng/L。HPV低危型感染组与对照组比较血清INF-ε水平无显著性差异(P=0.11)。而HPV高危型感染组与对照组比较显著降低(P<0.01)。

3讨论

人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)具有嗜黏膜和上皮性，易导致感染部位的良、恶性病变，与肿瘤发生、发展密切相关。目前，HPV已鉴定出100多个型别。国际癌症研究协会(International Agency for Research OilCancer，IARC)将HPV分为：⑴低危型HPV，包括HPV6、HPV11、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV54、HPV61、HPV70、HPV72、HPV81、cp6108等12种，主要引起下生殖道、肛周皮肤和阴道下部的外生性湿疣类病变、扁平湿疣类病变、宫颈上皮内瘤变Ⅰ(CINⅠ),一般不诱发癌变；⑵高危型HPV，包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68、HPV73、HPV82等15种，与CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌的发生密切相关[1-2]。

Ⅰ型干扰素在宿主中很重要，因其具有抗病原体作用和活化先天性和获得性免疫细胞[3]。Ⅰ型干扰素包括IFN-ɑ、IFN-β、IFN-ε等6种。Ⅰ型干扰素是在病毒感染早期发展起重要作用的一群大家族细胞因子，典型的Ⅰ型干扰素如IFN-α或IFN-β在许多类型细胞病毒感染后被上调了。

INF-ε不同于其他Ⅰ型干扰素(IFN-α或 IFN-β)，它具有独特的表达模式以及分泌和调节机理。首先。INF-ε不像其他细胞因子是由免疫细胞表达和诱导免疫细胞表达，INF-ε是持续性表达，即此类干扰素能够在没有外来刺激物的作用下，其含量能够持续地在某些组织细胞中保持一定的水平[4]。INF-ε在小鼠和人类女性下生殖道的上皮细胞持续表达[3]，而且INF-ε基因缺陷的小鼠容易感染单纯疱疹病毒2和衣原体[5]。

大部分细胞分泌Ⅰ型干扰素对周边细胞具有抗病毒作用，但IFN-ε转染细胞的上清液却几乎没有抗病毒的功能。小鼠和人类的IFN-ε前体在通过表达载体进行转染时功能欠佳，并且IFN-ε的分泌量也很少。IFN-ε和 limitin (IFN-ζ)的化学结构分析二者的信号肽和成熟部分导致了前体功能欠佳。HeLa细胞(宫颈癌细胞系)中转染FLAG标记的IFN-ε的免疫荧光检测发现IFN-ε分泌途径受到抑制[6]。

基于IFN-ε在生殖细胞持续表达以及在HeLa细胞中IFN-ε前体物质功能欠佳， IFN-ε的分泌可能需要一个复合因子，比如某种伴侣蛋白，而这种蛋白是需要生殖器官的细胞来表达。另一方面这种特殊的复合因子可能根据环境因素如激素或者细胞因子来调节IFN-ε的分泌[6]。

本次研究所用临床病例样本较少，血清IFN-ε与宫颈高危HPV感染风险相关性以及其关系还需要进行多指标、大样本、深度研究来进一步明确。

参考文献：

[1]BOSCH F X, MANOS M M, MUNOJ N, et al. Prevalence of human papilloma virus in cervical cancer[J]. a worldwide perspective.JNatl Cancer Inst, 1995, 87(11): 796-802.

[2]李慧弘．人乳头瘤病毒与生殖系统肿瘤[J]．肿瘤学杂志，2010，16(11)：864-868．

[3]HERVAS-STUBBS S, PEREZ-GRACIA J L, ROUZAUT A, et al. Direct effects of type I interferons on cells of the immune system[J]. Clin Cancer Res, 2011, 17(9): 2619-2627.

[4]WIJESUNDARA D K, YANG Xi, RANASINGHE C, et al. Unraveling the convoluted biological roles of type Ⅰ interferons in infection and immunity:a way forwardfor therapeutics and vaccine design[Z], 2014: 412.

[5]FUNG K Y, MANGAN N E, CUMMING H, et al. Interferon-ε protects the female reproductive tract from viral and bacterial infection[J]. Science, 2013, 339(6123): 1088-1092.

[6]HERMANT P, FRANCIUS C, CLOTMAN F, et al. IFN-ε is constitutively expressed by cells of the reproductive tract and is inefficiently secreted by fibroblasts and cell lines[J]. PLoS One, 2013, 8(8): e71320.

Serum INF-ε Level of Women with Human Papilloma Virus Infection in Low Genital Tract

XU Yanli,ZOU Lilan,CHEN Wanqiu

(Gynecology and Obstetrics,Shenzhen Baoan Shiyan People's Hospital, Guangdong Shenzhen518108,China)

[Abstract]Objective:To explore the relationship between Serum INF-εlevel and the type of Human Papillomavirus Infection in low genital tract of female.Methods:In 230 cases of HPV infection in shiyan Hospital during Jan.2014 to Jan.2015 which were divided by HPV test to 105 patients with Low-risk Human Papilloma virus Infection and 125 patients with high-risk Human Papillomavirus Infection.30 heath women of taking physical health examination were control group. serum INF-εlevel were detected in the three groups.Results:There was no difference between the heath women and the patients with Low-risk Human Papilloma virus Infection in INF-εlevel.The women with high-risk Human Papilloma virus Infection in low genital tract were obviously lower than heath women in INF-εlevel.Conclusion:The Serum INF-ε level is low in women with hign-risk Human Papillomavirus Infection in low genita l tract.

[Keywords]human papilloma virus;interferon-ε;high-risk type

(收稿日期：2015-07-13)

[中图分类号]R711.7

[文献标识码]A

DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2016.02.019

通信作者：许燕丽，2006xuyanli@163.com

优先数字出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20160315.1356.002.html