半枝莲多糖抗肝癌作用的研究

王 莹

通辽市职业学院药学系 内蒙古自治区通辽市 028000

半枝莲多糖抗肝癌作用的研究

王 莹

通辽市职业学院药学系 内蒙古自治区通辽市 028000

目的：探讨半枝莲多糖抗肝癌作用,观察其对H22荷瘤小鼠的增效减毒作用及对肝癌细胞Hep G2增殖的抑制作用。方法：将肝癌H22荷瘤小鼠，24h后随机分组，连续给药8天，剥离肿瘤，计算抑瘤率,并检测半枝莲多糖对人肝癌细胞Hep G2增殖的影响。结果：半枝莲多糖与环磷酰胺联用对H22荷瘤小鼠有增效减毒的作用，其对肝癌细胞Hep G2增殖的抑制作用显著。结论：初步表明半枝莲多糖具有抗肝癌的作用。

半枝莲多糖；抑瘤率；增效减毒

半枝莲(Scutellaria barbata D. Don)属于唇形科植物干燥全草，性寒。近年来半枝莲的研究多集中在抗肿瘤方面,临床上常用于肝癌、肺癌、胃癌等多种癌症防治，但具体的抗癌机制尚不明确[1]。本研究观察了半枝莲多糖对H22荷瘤小鼠增效减毒作用和对肝癌细胞Hep G2抑瘤率的影响，以探讨半枝莲多糖抗肝癌作用初步机制，为临床应用提供实验依据。

1 材料

随着药物剂量的增加抑制肿瘤作用越明显。

1.1 实验动物

健康昆明种小鼠，购自内蒙古民族大学实验动物中心；肝癌细胞株H22、肝癌细胞Hep G2由中科院上海细胞生物研究所细胞库提供。

1.2 仪器与试剂

半枝莲饮片由北京同仁堂药店提供；胎牛血清(FBS)、RPMI 1640培养基(美国GIBCO公司),细胞培养板(美国Costar公司),血球基数仪(上海精密仪器厂)。

2 实验方法与结果

2.1 半枝莲多糖对肿瘤小鼠的肿瘤抑制作用

取正常小鼠30只，皮下接种H22肿瘤细胞，48h后随机分成5组，分别为高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组和阴性对照，高、中、低剂量组给不同剂量的半枝莲多糖（分别为85.84 mg.kg-1、28.32 mg.kg-1、10.54 mg.kg-1）和环磷酰胺（15 mg.kg-1），阳性对照组给环磷酰胺（15 mg.kg-1），阴性对照组给等容量的生理盐水，给药第7天，称重后，颈椎脱臼处死小鼠，剥离肿瘤计算抑瘤率。

2.2 半枝莲多糖对肝肿瘤细胞增殖的抑制作用

将培养2-3天生长状态良好的人肝癌HepG2细胞，清洗、消化，计数，调整细胞浓度为5×104个/mL，制成单细胞混悬液，调整细胞浓度，均匀接种细胞于96孔细胞培养板，每孔加细胞悬液100μL。将培养板放入CO2培养箱内培养12h。高、中、低剂量组分别加入不同浓度的半枝莲多糖100μL，阴性对照组加入等量培养基，每个浓度平行接种5个复孔，继续培养48h。每孔加入20μL MTT溶液，继续孵育4h，终止培养。弃去上清液，每孔加入150μL DMSO，震荡15 min，用酶联检测免疫仪于492nm检测各孔的吸光值（OD值），取5孔的平均值，计算抑瘤率[2]。

细胞生长抑制率(IR%)=(1-OD实验组/ OD对照组)×100%

3 实验结果

3.1 半枝莲多糖对H22荷瘤小鼠增效减毒作用

由表1可知，与阴性对照组比较，高、中、低剂量组和阳性对照组均能明显减小H22荷瘤小鼠的瘤重。高、中、低剂量组的肿瘤抑制率均比阳性对照组有所升高，且高剂量组效果尤为明显。结果表明半枝莲多糖对H22荷瘤小鼠的肿瘤有抑制作用，与环磷酰胺合用有增效减毒作用。

表1：H22荷瘤小鼠抑瘤作用（）

表1：H22荷瘤小鼠抑瘤作用（）

组别 瘤重 抑瘤率阴性对照组0.94±0.12 CTX组0.51±0.10**45.74高剂量组0.31±0.54**67.02中剂量组0.37±0.07**60.64低剂量组0.43±0.12**54.26

3.2 半枝莲多糖对Hep G2肝癌细胞抑制作用

表2显示，半枝莲多糖高、中、低剂量组抑瘤率分别为45.96%、33.36%、30.03%，与阴性对照组比较，半枝莲多糖低、中剂量组抗肝肿瘤作用明显，而高剂量组具有非常显著性差异。由此表明，高、中、低剂量半枝莲多糖对人肝癌Hep G2细胞的生长增值具有显著的抑制作用，且

表2：Hep G2肝癌细胞增殖的影响（）

表2：Hep G2肝癌细胞增殖的影响（）

组别 浓度（ug.mL-1）OD492抑制率（%）阴性对照组01.175±0.171 2000.635±0.20445.96半枝莲多糖组1000.783±0.15233.36 500.838±0.06930.03

4 讨论与小结

半枝莲在临床应用比较广泛，主要化学成分的研究比较充分，但对半枝莲单味药的抗肿瘤作用有效成分及作用机制的研究尚不明确。本文对半枝莲多糖的抗肝癌作用进行了研究，实验表明半枝莲多糖在50-200μg.mL-1浓度下对肝癌Hep G2细胞增殖有明显的抑制作用，而且随着药物浓度的增加对肿瘤抑制率增大。半枝莲多糖对H22荷瘤小鼠也有较好的抗肿瘤作用，与环磷酰胺合用抑制肿瘤作用明显增强，且高剂量组的抑瘤率较好，与阴性对照组平均瘤重比较有明显统计学意义。因此，半枝莲多糖对抗肝癌药物有增效减毒的作用。以上实验初步表明，半枝莲多糖具有抗肝癌的作用,为今后半枝莲抗肿瘤机制研究提供了理论依据和应用价值。

[1]顾琳娜,顾昊.天然抗肿瘤药物筛选方法的研究进展.医药导报[J].2009,28(04):496-497.

[2]王萍.半枝莲抗癌成分研究.山东师范大学[J].2010,28(04):496-497.

王莹，现为内蒙古通辽职业学院讲师，药物分析，辽宁中医药大学硕士毕业。

●文章为省级课题的内容。