临床血脂测定建议

2016-01-31

中国循环杂志 2016年10期

附件1

临床血脂测定建议

血脂测定是血脂异常防治的重要组成部分,测定结果准确是有效开展血脂异常防治工作的基本要求。多种因素影响血脂测量结果的准确性,包括受试者和标本情况、测定方法、仪器试剂、测定操作等。现根据中华医学会检验医学分会有关建议和我国有关行业或国家标准,考虑我国目前血脂测定实际情况,综合中国成人血脂异常防治指南修订联合委员会的意见,就血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(Apo) A1、Apo B及脂蛋白(a)[Lp(a)]等血脂项目的测定提出建议,以促进我国血脂测定进一步规范化与标准化,保障血脂异常防治工作的有效开展。

1 受试者准备及标本采集与处理

许多分析前因素会影响血脂水平,主要包括:生物学因素,如个体间、性别、年龄和种族;行为因素,如饮食、肥胖、吸烟、紧张、饮酒、饮咖啡和锻炼等;临床因素,如(1) 疾病继发(内分泌或代谢性疾病、肾脏疾病、肝胆疾病及其他),(2) 药物诱导(抗高血压药,免疫抑制剂及雌激素等);标本收集与处理,如禁食状态、血液浓缩、抗凝剂与防腐剂、毛细血管与静脉血、标本贮存等。建议采取以下措施减少可控分析前因素对血脂检测结果的影响:

① 采集标本前受试者处于稳定代谢状态,至少2周内保持一般饮食习惯和稳定体重。

② 采集标本前受试者24 h内不进行剧烈身体活动。

③ 采集标本前受试者禁食约12 h.

④ 用静脉血作血脂测定标本,抽血前受试者坐位休息至少5min,除特殊情况外,受试者取坐位接受抽血。

⑤ 静脉穿刺时止血带使用不超过1min.

⑥ 血液标本保持密封,避免震荡。

⑦ 用血清作血脂分析样品,血液标本在1～2 h内离心,分离血清(含促凝剂采血管可在更短时间内离心)。

⑧ 及时分析血清样品,尽量避免样品存放,若必须储存,需保持样品密封,短期 (3天内) 可存于4℃,长期需存于-70℃以下。

2 测定方法选择

血脂测定各方法原理不同,分析性能、易操作性和分析成本也有差异,血脂常规测定应酌情选择合适的测定方法。

2.1血清TC测定

血清TC测定方法包括化学法、色谱法和酶法等,其中酶法最为简便、易自动化、分析性能良好,是目前TC常规测定普遍使用的方法。其他方法目前仅用于某些特殊情况(如特定化学法和色谱法用作参考方法)。建议采用酶法进行血清TC常规测定。

2.2血清TG测定

血清TG测定方法包括化学法、色谱法和酶法等,酶法同样是目前普遍采用的TG常规测定方法。目前多数TG酶法测定的是总甘油,部分酶法扣除游离甘油。建议采用酶法进行血清TG常规测定,一般可使用总甘油测定方法,必要时应考虑使用可消除游离甘油影响的测定方法。

2.3血清HDL-C测定

血清HDL-C测定曾出现过许多方法,大致可分为超速离心法、电泳法、色谱法,沉淀法、匀相法等。早期HDL-C常规测定主要采用的是沉淀法,经严格论证的沉淀法可实现较高的分析特异性,但其主要缺点是需预先对标本进行沉淀、离心等处理,结果易受高TG的影响。目前HDL-C常规测定的主要方法为匀相法,包括清除法、PEG修饰酶法、选择性抑制法、免疫分离法等,匀相法的最大优点是使用方便,不需样品处理,分析性能良好,但部分方法可能存在特异性问题。建议采用匀相法进行血清HDL-C常规测定。

2.4血清LDL-C测定

血清LDL-C测定方法包括超速离心法、电泳法、色谱法、公式计算法、沉淀法、匀相法等,常规采用的主要方法为公式计算法、沉淀法和匀相法。公式计算法曾是国际上使用最普遍的LDL-C测定方法,目前在部分国家仍被广泛使用。此法常用公式是Friedewald公式:LDL-C= TC-HDL-C- TG/5(mg/dl)或LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2(mmol/L)。其最大的优点是无需检测、计算简便,在TG低于2.8 mmol/L(250 mg/dl)的情况下有一定的可靠性;局限性是不能用于TG>4.5 mmol/L(TG> 400 mg/dl)或某些异常脂蛋白血症的标本,LDL-C结果的可靠性受TC、TG和HDL-C 3项指标测定质量的影响。部分国家曾用沉淀法测定LDL-C,但因其特异性有限且操作繁琐,应用不甚广泛。匀相法是我国目前测定LDL-C的主要方法,包括清除法、杯芳烃法、可溶性反应法和保护性试剂法等,这类方法使用方便,可分析高TG样品,但部分方法可能存在特异性问题。建议常规采用匀相法测定LDL-C。

2.5血清Apo A1、Apo B和Lp(a)测定

血清Apo A1、Apo B 和Lp(a)测定基本上基于免疫化学原理。早期测定多采用免疫电泳法、免疫扩散法、放射免疫法和酶联免疫吸附法等,这些方法操作复杂,分析性能有限,现已很少使用。目前主要采用免疫比浊法,包括透射比浊法和散射比浊法,这些方法使用方便,分析性能良好,部分Lp(a)测定方法可能存在较明显的特异性问题。建议采用免疫比浊法常规测定血清Apo A1、Apo B 和Lp(a)。

3 分析系统选择

上述方法所需运行的特定仪器、试剂和校准物及其工作参数等称为分析系统。目前血脂常规测定普遍采用商品仪器、试剂和校准物,品牌众多,因此同一方法下可有众多分析系统。不同分析系统的分析性能常不同,因此选择可靠的分析系统是保证血脂分析质量的关键。

3.1分析系统类型

按分析仪器的自动化程度,可分为全自动(全自动生化分析仪)、半自动(半自动分析仪)和手工(分光光度计)分析系统。半自动和手工分析系统除包括分析仪器、试剂和校准物外,还包括移液和温育等设备或器具。目前我国绝大多数临床实验室使用全自动分析系统,少数小型实验室可能使用半自动分析系统。自动化程度越高,影响因素越少。建议采用全自动分析系统进行血脂常规测定,适宜时可使用半自动分析系统。

按仪器、试剂和校准物来源,分析系统可分为3种:(1)封闭系统:仪器、试剂和校准物来自同一厂商,配套使用,工作参数内置。(2)开放系统:试剂和校准物来自同一厂商,配套使用,仪器另选,参数一般由试剂厂商提供。(3)组合系统:仪器、试剂和校准物来自不同厂商或机构,由实验室自己组合并建立工作参数。目前在我国3种分析系统均广泛应用,可根据实验室具体情况进行选择。

3.2分析系统质量技术指标

所选用的分析系统应符合下列质量技术指标。

3.2.1精密度、正确度和准确度

精密度指在多次独立检验分析中重复分析同一样品所得结果的一致程度,反映分析系统的随机误差,用变异系数表示。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB和Lp(a)测定的变异系数应分别小于3%、5%、4%、4%、3%、3%和4%。

正确度指在多次独立检验分析中重复分析同一样品所得结果的均值与靶值的差异,反映分析系统的系统误差,用偏倚(B)表示。靶值一般指参考(标准)物质定值或参考方法测定值。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB和Lp(a)测定的偏倚应分别在±3%、±5%、±5%、±4%、±5%、±5%和±10%范围内。

准确度指在多次独立检验分析中单次分析多个代表性样品所得结果与靶值的最大差异,用总误差表示。靶值一般指参考方法或其他可靠方法的测定值。在分析系统特异性良好的前提下,准确度由精密度和正确度决定(用公式表示为:总误差 =偏倚绝对值+ 1.96X变异系数)。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C测定的总误差应分别小于9%、15%、13%和12%。

精密度、正确度和准确度,尤其准确度是分析系统的主要分析质量指标。目前我国绝大多数血脂分析系统精密度良好,部分分析系统可能存在正确度和准确度问题。

3.2.2特异性

特异性是影响准确度的重要因素。分析系统应具备只作用于目标血脂指标、不受其他血清成分影响的能力。目前我国TC和TG分析系统特异性良好,部分脂蛋白和载脂蛋白分析系统可能存在特异性问题。

3.2.3校准

校准是正确度的决定因素。分析系统校准物的定值应使临床标本测定结果可溯源到已有的参考系统。

3.2.4检测范围

分析系统检测范围应至少覆盖下列血脂范围:TC: 2～10 mmol/L,TG:0.3～10.0 mmol/L,HDL-C:0.3～2.5 mmol/L, LDL-C:0.5～7.0 mmol/L,Apo A1:0.5～2.0g/L,Apo B:0.5～2.0g/L, Lp(a):5～800 mg/L。

3.3分析系统性能验证

任何新选用的分析系统,在用于临床样品检验前,均应进行性能验证,以保证分析系统性能符合上述质量技术指标。具体验证方法可参阅有关行业标准或文献。

3.4血脂分析

使用经过验证的分析系统进行临床标本的血脂分析,按分析系统或试剂说明书规定的程序进行分析操作。