用ELISA法检测乙型肝炎两对半准确性的影响因素探讨

王　 迪 张锦伟 韩亚男

（大连市第六人民医院检验科，辽宁 大连 116031）

用ELISA法检测乙型肝炎两对半准确性的影响因素探讨

王 迪 张锦伟 韩亚男

（大连市第六人民医院检验科，辽宁 大连 116031）

目的 探讨用ELISA法（酶联免疫吸附法）检测乙型肝炎两对半准确性的影响因素。方法 选取2014年8月至2015年8月在我院采用ELISA法检测乙型肝炎两对半的1628例患者为观察目标，对其检测过程进行回顾性分析，并总结影响检测结果准确性的影响因素。结果 影响1628例患者检测结果准确性的因素具体如下：实验前标本准备工作不充足、检验人员的素质与水平较差、血清标本质量不达标、检验操作程序不规范、检验结果研读不准确等。结论 乙型肝炎两对半应用ELISA法检测过程中，检验人员必须保持高度负责、严谨慎重的工作态度，妥善安排实验前的标准准备工作，规范操作，准确评定检验结果，对相关影响因素进行控制，切实提高检测结果的准确性和有效性，以便为临床诊断和治疗提供真实可靠的数据参考。

乙型肝炎两对半；影响因素；准确性；ELISA法

乙型肝炎是临床比较常见的一种恶性传染性疾病，其对患者身体健康和生命安全造成严重威胁。ELISA法是临床检测乙型肝炎患者的常用方法之一，其检测结果真实有效，可为临床诊断和治疗乙型肝炎提供详尽的信息。然而，由于实际操作过程中多种因素的影响，ELISA法的检测结果也存在假阳性或假阴性的可能性。明确可能影响ELISA法检测结果的相关因素，制定相应的防范措施，对提高乙型肝炎两对半准确性和检验质量具有非常重要的作用［1］。本文选取在我院采用ELISA法检测乙型肝炎两对半的1628例患者为观察目标，现作如下报道。

1　 资料与方法

1.1 一般资料：选取2014年8月至2015年8月在我院采用ELISA法检测乙型肝炎两对半的1628例患者作为观察目标，其中男996例，女632例，患者年龄27～70岁，平均年龄（48.3±6.2）岁。回顾性分析所有入选病例的乙型肝炎两对半临床资料，对影响检测结果的因素进行评析。

1.2 ELISA法的具体应用及影响因素分析：乙型肝炎两对半应用ELISA法进行检测时，做好试剂盒的选择与保存非常关键。如果试剂盒质量不佳，将会直接影响到检测结果，所以试剂盒必须达到优质、可靠的要求，以保证其性能的稳定性和灵敏度、特异性均不会出现任何差异。试剂盒的保存必须按照既定的要求和标准，开始进行实验前，将试剂盒在常温下放置30 min。对试剂盒的性能以及实验操作过程的具体流程、易发生问题的环节，实验操作人员必须十分了解，除此之外，还必须，明确乙型肝炎两对半每个标志代表的不同意义以及失控处理方法、质量检测方法、标准等［2］。

标本处理过程和保存也是影响乙型肝炎两对半检测结果的主要因素。采集标本过程中，如果标本已经出现溶血的情况，那么已经发生破裂的红细胞就会不断释放出大量的氧化物酶活性物，对显色剂的显色反应造成干扰，最后导致实验结果出现小三阳或大三阳的结论。对采集试管进行清洁处理时，必须严格按照标准方法进行操作，保证对其进行完全、彻底的清洗，以便有效控制检查感染发生率。在实际的检测过程中，尽量选择玻璃试管或1次性真空采集管，标本则选择非抗凝标本。标本凝固不全也会在一定程度上对检测结果造成不良影响。少数检验操作人员为尽快完成ELISA法检测工作，通常在标本还没有达到标准要求时就对血清进行强行分离，残留的纤维蛋白原会使检测结果出现假阳性的结论。所以，对血液标本进行分离操作之前，必须保证其充分凝固状态，以得到准确无误的检测结果［3］。ELISA法具有非常高的而敏感性，其对各种干扰元素的敏感性也非常强，因此，抗凝、离心操作时必须科学严谨，以降低交叉感染发生率，保证检测结果的准确性。按照血清的存放条件对标本进行保存，禁止对血清进行颠倒混匀或者反复溶冻，也不可长时间存放。综合乙型肝炎两对半监控技术的特异性与灵敏性对质控方法进行选择，对病原体或抗体进行筛查，保证血清OD值的稳定性不受影响，切实提高检测质量。可通过复验的方法对失控标本进行处理，保证检测结果的准确率符合既定要求［4］。

根据临床现在相关研究结果可知，很多人的血清标本中都含有类风湿因子、嗜异性抗体、补体等非液体性干扰物质，这些物质会对ELISA法检测乙型肝炎两对半的结果产生一定的影响，对患者血清标本自身特异性导致异常实验结果的情况，需要再次进行复检的方法得到检测结果。除此之外，在为患者进行乙型肝炎两对半ELISA法检测之前，还必须明确其之前用药情况，将血液本身的相关影响因素排除之后，方可进行检测。

乙型肝炎两对半应用ELISA法检测时，加样、温育以及洗板、显色这几个环节是最为重要的影响因素。加样时，首先需要明确实验室操作具体规程，然后按照这些标准进行操作，经常校准加样器，并彻底清洗加样器。将标本加入向反应孔时，切不可同时与其他反应孔接触，使用振荡器对标本进行＞30 s的混匀后才能将其置入温育箱。温育环节中需要对标本是否出现周边效应进行密切观察，可选择水育的方法进行操作，以防止出现周边效应或其进入其他影响物质。进行洗板的操作时，需要对时间差进行控制，彻彻底底的进行清洗，待洗净之后还要做好污染的预防措施。使用含氯的消毒剂时，必须防控好其与反应孔之间的相互作用，避免洗涤液发生外溢或者混用的情况出现。显色是ELISA法检测必不可少的一个温育反应过程，时间、光线、温度等均会对这一过程产生干扰。所以进行显色操作时必须避免强光刺激，在规定时间内快速完成比色操作，严格审查检测结果，做好详细数据记录［5］。

2　 结 果

影响1628例患者检测结果准确性的因素具体如下：实验前标本准备工作不充足、检验人员的素质与水平较差、血清标本质量不达标、检验操作程序不规范、检验结果研读不准确等。

3　 讨 论

ELISA法对乙型肝炎两对半的检测具有非常重要的作用，其在乙型肝炎诊断和治疗方面意义显著［6］。由本次研究结果可知，实验前标本准备工作不充足、检验人员的素质与水平较差、血清标本质量不达标、检验操作程序不规范、检验结果研读不准确等诸多因素都会对ELISA法检测乙型肝炎两对半的结果产生影响。对这些影响因素进行充分分析并做好相应的防范措施，可显著提高ELISA法检测结果的准确性和检测质量。鉴于此，检验人员必须保持高度负责、严谨慎重的工作态度，妥善安排实验前的标准准备工作，规范操作，准确评定检验结果，对相关影响因素进行控制，切实提高检测结果的准确性和有效性，以便为临床诊断和治疗提供真实可靠的数据参考。

［1］ 黄家丽.分析对用ELISA法检测乙肝两对半准确性的影响因素［J］.当代医药论丛，2014，12（4）:168-169.

［2］ 赵远怀，向际兵，罗乐平，等.乙肝两对半检测的临床意义和影响因素［J］.中国当代医药，2011，18（3）:69-70.

［3］ 罗斌，曾永龙，滕元姬，等.TRFIA与ELISA法对乙肝两对半测定的比较分析［J］.右江医学，2012，40（5）:701-703.

［4］ 杨双明.ELISA法检测患者乙肝两对半的影响因素及意义［J］.健康必读（中旬刊），2013，12（8）:154-.

［5］ 石梁.酶联免疫法和胶体金快速检测板检测乙肝两对半的比较分析［J］.临床医药文献电子杂志，2015，49（28）:5919-5920.

［6］ 薛春杨，周建波.ELISA法乙肝两对半检测影响因素分析和临床意义［J］.中国误诊学杂志，2011，11（16）:3913-3914.

［7］ 张琴.ELISA法检测乙肝两对半的影响因素及处理方法［J］.中国保健营养（中旬刊），2013，26（5）:208.

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