对虾急性肝胰腺坏死综合征病原研究进展

陈信忠郭书林龚艳清苏亚玲杨俊萍孔繁德（.海峡两岸农产品检验检疫技术厦门中心　福建厦门　36026；2.厦门市海洋与渔业研究所）

对虾急性肝胰腺坏死综合征病原研究进展

陈信忠1郭书林1龚艳清1苏亚玲2杨俊萍1孔繁德1
（1.海峡两岸农产品检验检疫技术厦门中心福建厦门361026；2.厦门市海洋与渔业研究所）

对虾急性肝胰腺坏死综合征是近几年的新发现疫病，严重影响对虾产业发展。本文对该病病原的研究进展以及最新检测技术进行了综述。目前大多数学者认可该传染病的病原是副溶血性弧菌的特异菌株，并研究建立了针对该菌株的PCR检测方法。有关该菌株的致病机理以及准确的诊断方法还有待深入研究。

对虾早期死亡综合征；病原；诊断方法

1　前言

近年来，全球对虾养殖产业不断暴发以肝胰腺坏死为主要特征的传染病，主要危害凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）和斑节对虾（P.monodon），每年造成超过十亿美元的经济损失。由于该病不容易被发现，绝大部分对虾在池底死亡，俗称“偷死病”；同时由于该病主要发生于虾苗放养后7-30 d，所以亦称为早期死亡综合征 （Early Mortality Syndrome，EMS）。该病最初于2009年在中国发生，随后越南和马来西亚分别在2010和2011年相继报道了此疾病［1］；2012年初，泰国一些养殖场也发现了此疾病［2］；2013年初，该病蔓延到西半球的墨西哥。该病病情发展十分迅速，死亡率极高［3］。2013年全球养殖对虾产量较2012年减少近四分之一，其中泰国下降约50%，我国自150万t下降到130万t，下降约17%［4］。2014年，我国对虾养殖成功率仍然很低，发病率超过60%。为了满足国内市场的需求，我国开始大量进口对虾，从对虾出口大国变为进口国，严重影响了我国对虾产业发展。2013年初，确认该病病原是一种特殊的副溶血弧菌 （Vibrio parahaemolyticus），专业上，该病被称为急性肝胰腺坏死综合征（Acute Hepatopancreas Necrosis Syndrome，AHPNS）［5］。随着病原研究的不断深入，针对该传染病的快速检测方法也在不断更新和完善，为有效预防和控制该传染病提供了重要的技术支持。

2　病原的确认

2013年5月，国际水产联盟（GAA）和联合国粮农组织（FAO）先后宣布，导致AHPNS的病原体是副溶血弧菌的特异变种。该病原是一种罕见的副溶血弧菌，起初认为它被一种噬菌体病毒感染后发生变异，并促使细菌释放强力毒素，不过后来的研究否定了“噬菌体与对虾EMS的关系”，但确实存在特异的副溶血弧菌菌株。该细菌经口传播并定植在对虾消化道，产生的毒素引起肝胰腺等组织损坏，并造成对虾肝功能紊乱及消化系统障碍［4］。

2014年，有关AHPNS的病原学研究取得了重要进展，在第九届世界华人虾蟹养殖研讨会上，台湾成功大学罗竹芳教授通过研究报告验证了Lightner等研究团队关于AHPNS与特异性副溶血性弧菌的相关性的研究［6］。通过比较副溶血性弧菌致病株与非致病株的基因序列，发现了与特异性副溶血性弧菌致病性相关的pVA1质体，该质体上带有与杆菌属相关的杀昆虫毒素 （Photorhabdus insect-related，Pir）PirA和PirB。在自然缺乏或基因敲除此Pir毒素的试验中，致病菌株明显失去致病能力，证明副溶血弧菌的毒素蛋白PirA和PirB是引起AHPNS的关键。试验表明，用PirA单独感染可以导致对虾肝胰腺细胞间出现一些小泡，但无明显症状；PirB单独感染时，对虾肝胰腺上皮细胞出现大量脱落，与AHPNS症状吻合度极高；而PirA和PirB同时感染对虾，则出现AHPNS症状。Pir毒素蛋白通过质粒基因翻译而来，可是目前尚无法知道该质粒如何进入对虾体内，有可能源于其他物种，因为PirA和PirB与一些植物中发现的毒素蛋白同源性极高，与苏云金杆菌Cry insecticidal毒素的结构也类似 （苏云金杆菌可以使昆虫致死）。有关PirA和PirB的作用机理尚不明确，PirA可能起某种调控作用。

随后又有多项报告证明AHPNS是由副溶血弧菌引起。虽然尚不清楚是否所有的AHPNS都是由一个或多个特定的副溶血弧菌菌株引起，但通过控制弧菌可以大大减少AHPNS暴发的风险［7-9］。Kongrueng等［10］（2014）对来自泰国的副溶血弧菌菌株进行了溶血性、毒力基因、血清型、基因型和以及抗生素敏感性的研究，所有导致AHPNS的菌株都有一个独特的O抗原，但来自不同养殖场的菌株其K抗原有一些小的变化。此外，由感染AHPNS的对虾肝胰腺分离的菌株基本相似，但与医学临床和自然环境的分离株有所不同，因此推论AHPNS菌株可能源于同一菌株，随后发展出略有不同的血清型。

Tran等［5］（2013）通过纯培养分离到AHPNS的病原体，人工浸泡感染实验可以诱发实验虾典型的AHPNS病理变化并导致100%死亡，人工诱导的AHPNS病变与自然感染的AHPNS组织病变完全相同。该菌株已被确定为哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）进化枝的成员，大部分与副溶血弧菌关系密切。

Soto-Rodriguez等 （2015）［11］对墨西哥发生的AHPNS进行细菌学和组织学分析，通过不耐热溶血素（thermo labile hemolysin，TLH）基因分析确认该菌株为副溶血弧菌。用该菌株进行浸泡感染，人工感染虾出现了与养殖患病虾相同的临床和病理症状：嗜睡、空肠、肝胰腺呈灰白色和水化，以及膨大的色素细胞。利用组织学分析和细菌密度计数方法，感染虾发生AHNPS可以分为初始期、急性期和晚期3个阶段，在人工感染虾和池塘养殖虾都可以观察到肝胰腺管状上皮细胞严重脱落的特征性病变。结果还表明，不同副溶血弧菌菌株有不同毒力，一些低毒力菌株不会引起100%的死亡率，其死亡率上升速度也比更强的菌株更慢。同时菌株的毒力亦与感染量相关，感染浓度限量为104CFU/mL，低于该浓度时未观察到死亡。

我国是最早发现AHPNS的国家，虽然一开始未能及时确认病原，但也有一些报告认为我国的对虾传染病可能与副溶血弧菌有关。黄倢等从全国各对虾主产区采集的AHPNS病例中，分离到了12株副溶血弧菌，其中从北海的病虾中分离到一株毒力高、抗药性强的副溶血弧菌，该菌株具有VPP19高毒力蛋白。从其他一些细菌，如哈维氏弧菌和金氏发光杆菌也能检出VPP19，且对对虾表现出类似致病性［12］。

3　病原基因组及致病机理

副溶血性弧菌是世界各地河口、海洋和海岸环境的原生性细菌，也是食源性肠胃炎的病原体。基于菌体抗原（O）和荚膜抗原（K）的抗原属性，至今世界范围内已报告了超过80种血清型［13］。一些罕见的菌株可以引起人类胃肠疾病，这些菌株含有2个特殊的基因。目前已知该菌的主要致病因子包括耐热直接溶血毒素（thermostable direct hemolysin，TDH）、耐热直接溶血相关毒素 （TDH-related hemolysin，TRH）和3型分泌系统 （Type 3 secretion systems，T3SS）等。T3SS能够将细菌感受器传送到宿主细胞质，被认为可以引发细胞毒性和肠毒性。6型分泌系统（Type 6 secretion systems，T6SS）可能参与细胞内转运和膜泡运输，也可能有致病作用。此外，研究表明缺乏毒素和致病性相关基因的菌株也可能致病，表明还存在其他重要的毒力因子。至今在全球范围内发生和分布的毒力因子的独特性，表明副溶血弧菌的致病性与其动态变化的基因组一样十分复杂。

导致AHPNS的副溶血弧菌菌株的基因组全序列已有报告。Gomez等［8］（2014）从墨西哥发病对虾胃部分离到副溶血性弧菌菌株M0605，攻毒实验证明该菌株能导致对虾严重死亡。对该菌进行测序得到403，443 reads（平均179 bp），总计158.4 Mbp；经过聚类分析得到157个序列，基因组大小约5.650 Mbp；这些序列用RAST解释，得到5152编码序列（CDSs）和128 RNAs；有两个染色体 （Ch），ChI约为3.356 Mbp（3145 CDSs），ChII约为1.767 Mbp（1609 CDSs）；ChI和ChII分别有5个和4个前噬菌体，大小约5.9-58.2 Kbp；两个染色体上都发现有前噬菌体f237；检测到4个质粒，分别为2个IncP、IncF和IncP；在两个染色体上都发现了与致病相关的系统：血红素、肠杆菌素、弧菌铁素（vibrioferrin）和 2个TonB等5个铁摄取系统，2个T2SS、1个T3SS、2个T2/4SS和2个T6SS等7个分泌系统；至少有14不同的毒素基因和9个溶血素；有数个蛋白酶，其中有3个锌依赖蛋白酶，1个弧菌溶血素（vibriolysin），还发现5个几丁质酶和1个Tfox几丁质代谢调控因子；此外，还确认有一个IV型菌毛附着系统和一个荚膜多糖抗吞噬系统。

Yang等［7］（2014）对3株引起AHPNS的副溶血性弧菌菌株和1株不致病菌株的基因序列进行了比较。致病菌株3HP和5HP分离自泰国的凡纳滨对虾，中国株来自海南，非致病菌株S02来自泰国的虾池沉淀物；菌株3HP、5HP、中国株和S02的基因组分别有100、82、144和97个序列，预计编码DNA序列分别为5155、5148、4950和4946。4个菌株的ChI分别为3.360、3.362、3.190和3.244 Mbp，而ChII大约为1.872、1.871、1.755和1.927 Mbp。分别有113、107、113和102未翻译的RNA序列；菌株3HP、5HP和中国株发现了与霍乱弧菌（V.cholerae）4个毒素基因同源的基因，这些毒素为闭合带毒素（zonaoccludens）、副霍乱肠毒素、转录激活因子ToxR和跨膜调节蛋白ToxS，而菌株S02没有这些基因。来自墨西哥的菌株M0605和来自泰国的2个AHPNS菌株，TUMSAT_DE1_S1和TUMSAT_DE2_ S2，也有同样的4个基因，但来自泰国的另外一个菌株TUMSAT_D06_S3没有发现这些基因。此外，在所有3株致病菌株还发现之前未曾报道的一个大型染色体外质粒 （～69 Kbp），但在非致病的菌株没有发现。虽然这个与AHPNS紧密相关的质粒上大多数都是新基因，但也发现了一个编码二元毒素PirAB同源的基因，该基因存在于具有杀虫作用的杆菌中。序列信息表明，这种AHPNS质粒蛋白是一种孔蛋白（pore-forming protein），但目前尚不能确定该菌如何导致肝胰腺细胞快速死亡。

Kondo等［14］（2014）对3株引起AHPND的副溶血弧菌致病菌株和3株非致病性菌株进行基因测序，结果发现所有这些菌株均缺乏与人类感染有关的致病性基因岛。在3株致病性AHPND菌株中发现了独特的编码IV型纤毛/IV型分泌系统的序列。

Joshi等［15］（2014）应用BLAST技术和特异性基因标记技术检测特有的依赖卵磷脂溶血素（lecithin dependent hemolysin，LDH），鉴定出4个独立的副溶血弧菌菌株。用其中3个菌株以及1个来自中国的菌株进行浸泡感染，结果引起极高的死亡率，肝胰腺表现明显的AHPND组织病理学特征；用其中一个菌株5HP测试，结果表明死亡率依赖于感染剂量；使用同样的感染方法，菌株2HP可以引起高死亡率，但未观察到AHPND组织病理学变化，相反，它造成肝胰腺不同的组织病理学变化，包括上皮细胞脱落和独特的胚胎细胞液泡化（E-cells）。该结果表明导致养殖对虾早期死亡的不同副溶血弧菌菌株可能具有多样性。

Tang等［16］（2014）对引起对虾AHPND的副溶血弧菌菌株的毒素基因进行了研究。菌株13-028/A3含有3个类杀虫毒素复合体（tc）基因，分别是编码284 kda蛋白质的类tcdA基因（7710 bp）、编码158 kda蛋白质的类tcdB基因（4272 bp）和编码107 kda蛋白质的类tccC3基因（2916 bp）；所有3种预测蛋白质都含有各自特征性的Tc蛋白保守区域；通过RT-PCR实验，该菌的所有3个类tc基因都可以表达。通过染色体步移技术和PCR扩增，将这3个基因进行拼接，在2号染色体位于tRNAGly旁边的位置发现了一个基因岛（87712 bp，称为tc-GIvp）。该基因岛在其他弧菌中没有发现，其GC含量为40%。tc-GIvp的特点是含有60个编码调控或致病因子的ORFs，包括6型分泌蛋白VgrG、EAL蛋白、菌毛亚单元和组装蛋白、类侵袭素蛋白、肽聚糖结合蛋白和Tc蛋白；tc-GIvp还包含21个转座酶基因，表明它是从其他生物通过水平转移而来。

Han等［17］（2015）报告，上述菌株13-028/A3确认含有69 kb的质粒pVPA3-1，质粒的GC含量为45.9%。通过比较定量PCR分析，每个细菌含有37拷贝，由92个开放阅读框组成，分别编码转运蛋白、复制酶、转座酶、毒力相关蛋白以及杆菌属相关毒素（Pir）。这些Pir类毒素蛋白由2基因编码 （类pirA 和pirB），位于3.5 kb片段以内，两侧为编码转座酶的反向重复序列（1 kb）。这两个基因的GC含量仅为38.2%，大大低于质粒其余部分的GC含量，表明这些基因很可能是最近才获得。基于蛋白质组学分析，类pirA基因（336 bp）和类pirB基因（1317 bp）分别编码13 kDa和50 kDa蛋白质。在实验室条件下，菌株13-028/A3在培养基中可以产生这两种蛋白质。

Sriurairatana等［18］（2014）报告发生AHPND的对虾，其肝胰腺（HP）和中肠出现很多蛆形、簇状小泡，导致出现白色成串的粪便，称为白色粪便综合症（WFS）。用新鲜肝胰腺组织压片并染色后观察，肝胰腺小管腔中的小泡几乎是透明的，也没有细胞结构。透射电子显微镜（TEM）观察，该小泡非层状的外层膜与细胞质膜或任何已知的簇虫、其他原生动物或后生动物的外膜均不相同，也没有线粒体、细胞核、内质网和核糖体等亚细胞器。内膜具有管状的次级结构，偶尔还包裹整个B细胞从肝胰腺小管上皮细胞脱落。这些内膜似乎来源于转换的微绒毛，从肝胰腺小管上皮细胞剥离，然后聚集在小管腔。微绒毛的剥离，源自细胞的溶解。相比之下，B细胞保持完好，或被从小管上皮细胞完整地吞噬。如果被成簇透明的微绒毛（ATM）吞噬，光镜下就会被误认为囊状结构，形成簇状的外观。出现成簇透明微绒毛的原因尚不明了，但微绒毛的损失以及随后的细胞溶解作用表明其形成是一个病理过程。如果病变严重，可能会阻碍对虾生长，使对虾感染条件致病菌。

4　其他可能的病因

虽然大多数学者已经认可AHPNS主要由副溶血弧菌特异菌株引起，但亦不排除还有其他一些因素也能导致养殖对虾表现相似症状。黄倢等［19］（2013）通过组织病理学、人工感染实验、疑似病原基因进化分析、病毒分离纯化和荧光原位杂交等研究手段，证实一种新型的野田村病毒是导致对虾AHPNS的疑似病原，这种病毒被命名为对虾偷死野田村病毒（Covert mortality nodavirus，CMNV）。进一步研究发现，CMNV与感染昆虫类的类似病毒有较高的同源性，从多地患AHPNS的对虾中都检出了此前从未检出的黄头病毒（YHV）一个株型，这一基因型与现已发现的YHV 6个基因型均不相同；2006年澳大利亚学者从泰国的凡纳滨对虾中分离一株高毒力YHV的一个基因片段的缺失在此基因型中也存在，说明这个基因型对凡纳滨对虾可能具有较高的毒力。在感染实验中，患病虾匀浆液经微孔滤膜过滤的滤液能导致健康对虾在数天内死亡。

庞德彬［20］（2014）认为蓝藻产生的毒素可能引发AHPNS。水中的铜绿微囊藻、假鱼腥藻、小颤藻等多种蓝藻，由于各种原因死亡后会释放出微囊藻毒素。该毒素能够强烈抑制蛋白质活性、诱发肝脏肿瘤，而且可以专一地作用于对虾的肝胰腺及肠胃等内部器官，引发肝胰腺肿大、变色、坏死及抽搐性跳水、侧游、休克、沉底等中毒症状，引起空肠空胃。当微囊藻毒素在水体的浓度达0.4 μg/L以上时，即引发养殖对虾急性死亡。在我国南方的对虾养殖过程中，盛行肥水培藻养殖模式，很多虾塘水体因为蓝藻大量繁殖而呈绿色，因此相对于清瘦水、茶色水、褐色水的养殖水体更容易暴发AHPNS。

同样的病理特征可能有不同的致病原因。显然AHPNS也可能由多种不同的原因引起，细菌、病毒、有害理化因子、有毒藻类以及宿主抗逆性下降等都可能引起对虾肝胰腺出现相似的病理变化。由于影响养殖水体的因素众多，其中一些因素还可以互相影响，因此，很多时候AHPNS可能并非单独由一种细菌引起，而是由多种细菌共同作用所致。何建国等在广东、河北、广西省、海南省等地采集具有“空肠空胃”等症状的 172尾病虾的肝胰腺、肠道、血淋巴进行细菌分离，共收集1 435株细菌。经鉴定主要细菌及其感染率分别为：副溶血弧菌52.6%，蜡样芽胞杆菌27.8%，霍乱弧菌23.7%，嗜水气单胞菌19.6%，苏云金芽胞杆菌17.5%，金橙黄微小杆菌14.4%。因此，虽然目前的研究表明特殊副溶血弧菌菌株是导致AHPNS的主要原因，但针对不同的养殖环境以及发病情况还需要考虑多方面的因素。

5　另一种相似的对虾疫病

AHPNS与对虾的另一种疫病——坏死性肝胰腺炎（Necrotising hepato pancreatitis，NHP）十分相似，两者都表现为肝胰腺坏死和高死亡率。由于针对NHP的研究报告也很少，尚无法确定这两种疫病之间的关系。2013年国际动物卫生组织 （OIE）将NHP列入《水生动物疫病诊断手册》中，其病原被称为坏死性肝胰腺炎细菌（Necrotisinghepatobacterium，NHPB），又名类立克次体（rickettsial-like organism，RLO），其分类尚不明确，暂时被归于变形菌纲，α亚纲［21］。主要感染凡纳滨对虾和蓝对虾（P. stylirostris），并导致很高的死亡率［22，23］。通过16S rRNA分析，NHPB与斑疹伤寒热立克次氏体和斑点热立克次氏体有83.5%的相似性。NHPB为革兰氏阴性、多形态、专性细胞内寄生的细菌，分散存在于感染的肝胰腺细胞胞质内，存在杆状和螺旋体状两种形态。对北美和南美爆发的NHP分离的NHPB菌株基因进行分析，发现两者几乎相同或为紧密相关的亚种。凡纳滨对虾感染NHPB可引发急性、毁灭性的传染病，成虾发病后死亡率较高。30 d内死亡率可达90%-95%［24］。如果水温长时间超过29℃，或盐度出现剧烈变化（20%-38%）可以增加NHPB的繁殖率。

6　小结

AHPNS是近年来新出现的传染病，最初不同学者对发病原因有多种解释，包括病毒、细菌以及藻类毒素等。通过对各种病原、种苗、水质、饲料、养殖管理等多方面的综合研究，越来越多的实验证明该病与副溶血性弧菌有关，目前大部分学者认为该病主要由副溶血性弧菌的特殊菌株引起。

［1］Eduardo M Leano.Early Mortality Syndrome Threatens Asia's Shrimp Farms［J］.Global aquaculture advocate，2012，July/August：38-39.

［2］Flegel T W，Lo C F.Announcement regarding free release of primers for specific detection of bacterial isolates that cause acutehepatopancreaticnecrosisdisease（AHPND）.14/1/ 2014，1728 views，Health，Shrimp，www.enaca.org-January 17，2014 4：44 AM.

［3］FAO.Report of the FAO/MARD Technical Workshop on Early Mortality Syndrome（EMS）or Acute Hepatopancreatic Necrosis Syndrome（AHPND）of Cultured Shrimp（under TCP/VIE/ 3304）.（2013）Hanoi，Viet Nam，25-27 June 2013.FAO Fisheries and Aquaculture Report No.1053.Rome.54 pp.

［4］Tran L，Nunan L，Redman R M.Determination of the infectious nature of the agent of acute hepatopancreatic necrosis syndrome affecting penaeid shrimp［J］.Dis Aquat Organ，2013，105（1）：45-55.

［5］钟绮文.2013年全球对虾市场回顾分析：供应短缺［N］.中国水产养殖网，中国水产频道，2014-04-10，http：//www.shuichan.cc/ news_view-182428.html.

［6］Lightner D V，Redman R M，Pantoja C R，et al.Early mortality syndrome affects shrimp in Asia［C］.Global Aquaculture Advocate，2012，15：40.

［7］ YangYi-Ting，ChenI-Tung，LeeChung-Te，et al.Draft Genome Sequences of Four Strains of Vibrio parahaemolyticus，Three of Which Cause Early Mortality Syndrome/Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease in Shrimp in China and Thailand［J］.Genome Announc，2014，2（5）：e00816-14.http：//dx.doi.org/10.1128/genomeA. 00816-14.

［8］Gomez-Gil B，Soto-Rodríguez S，Lozano R，et al.Draft genome sequence of Vibrio parahaemolyticusstrain M0605，whichcauses severe mortalities of shrimps in Mexico［J］.Genome Announc，2014，2（2）：e00055-14.http：//dx.doi.org/10.1128/genomeA.00055-14.

［9］Peter De Schryver，Tom Defoirdt，Patrick Sorgeloos.Early mortality syndrome outbreaks：a microbial management issue in shrimp farming［J］.PLoS Pathog，2014，10（4）：e1003919.

［10］Kongrueng J，Yingkajorn M，Bunpa S.Characterization of Vibrio parahaemolyticus causing acute epatopancreatic necrosis disease in southern Thailand［J］.J Fish Dis，2014，Oct 7.doi：10.1111/ jfd.12308.

［11］Soto-Rodriguez S A，Gomez-Gil B，Lozano-Olvera R，et al.Field andexperimentalevidenceofVibrioparahaemolyticusasthe causative agent of acute hepatopancreatic necrosis disease of cultured shrimp（Litopenaeusvannamei）in Northwestern Mexico ［J］.Appl Environ Microbiol，2015，81（5）：1689-1699.

［12］黄倢.中外虾业专家传递四大行业信号：对虾病害蔓延［N］.中国水产养殖网，2014.12.16.www.shuichan.cc/news view.asp？id= 228578.

［13］Ceccarelli D，Hasan N A，Huq A，et al.Distribution and dynamics of epidemic and pandemic Vibrio parahaemolyticus virulence factors［J］.Front Cell Infect Microbiol，2013，Dec 11，3：97.doi：10.3389/fcimb.2013.00097.eCollection 2013.

［14］Kondo H，Tinwongger S，Proespraiwong P，et al.Draft genome sequences of six strains ofVibrio parahaemolyticusIsolated from Early Mortality Syndrome/Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease shrimp in Thailand［J］.Genome Announc，2014，2（2）：e00221-14.http：//dx.doi.org/10.1128/genomeA.00221-14.

［15］Joshi J，Srisala J，Truong V H，et al.Variation in Vibrio parahaemolyticus isolates from a single Thai shrimp farm experiencingan outbreak of acute hepatopancreatic necrosis disease （AHPND）［J］.Aquaculture，2014，428-429：297-302.http：//dx. doi.org/10.1016/j.aquaculture.2014.03.030.

［16］Tang K F，Lightner D V.Homologues of insecticidal toxin complex genes within a genomic island in the marine bacterium Vibrio parahaemolyticus［J］.FEMS Microbiol Lett，？2014？Oct 1.doi：10.1111/1574-6968.12609.

［17］Han J E，Tang K F J，Tran L H，et al.Photorhabdus insect-related（Pir）toxin-like genes in a plasmid of Vibrio parahaemolyticus，thecausativeagentofacutehepatopancreatic necrosisdisease（AHPND）ofshrimp［J］.DisAquatOrg，2015，113：33-40.

［18］Sriurairatana S，Boonyawiwat V，Gangnonngiw W.White feces syndrome of shrimp arises from transformation，sloughing and aggregation of hepatopancreatic microvilli into vermiform bodies superficially resembling gregarines［J］.PLoS One，2014 Jun 9，9 （6）：e99170.doi：10.1371/journal.pone.0099170.eCollection.

［19］黄倢.EMS致病源可能是YHV新型 ［N］.中国水产频道，www. fishfirst.cn/article-21610-1.html.2013.4.21.

［20］庞德彬.防控 EMS第一是要控制蓝藻 ［N］.中国水产网，2014.8.7.www.zgsc123.com/index.php？m=content&c=show&catid= 118&id=86640.

［21］Lightner D V，Redman R M.An epizootic of necrotizing hepatopancreatitis in cultured penaeid shrimp（Crustacea：Decapoda）in northwestern Peru［J］.Aquaculture，1994，122：9-18.

［22］Del Rio-Rodriguez R E，Soto-？guez S，Lara-Flores M，et al. Anecrotizing hepatopancreatitis（NHP）outbreak in a shrimp farm in Campeche，Mexico：A first case report［J］.Aquaculture，2006，255：606-209.

［23］Morales-Covarrubias M S，MouraLemus-PereirA A，SolisMontiel V T，et al.Prevalence of diseases in cultured white shrimp （penaeusvannamei）in eight regions of Latin America［J］.Rev Científica FCV-LUZ.2011.

［24］Morales-Covarrubias M S，Lozano-Olvera R Y，Hernandez-SilvaA J.Necrotizing hepatopancreatitisin cultured shrimp caused by extracellular and intracellular bacteria［J］.Tilapia&Camarones，2010，5：33-39.

Progress of Pathogen for Acute Hepatopancreas Necrosis Syndrome

CHEN Xinzhong1，GUO Shulin1，GONG Yanqing1，SU Yaling2，YANG Junping1，KONG Fande1
（1.Inspection and Quarantine Technology Center of Cross-strait Agricultural Products in Xiamen，Xiamen，Fujian，361026；2.Xiamen Institute of Marine and Fisheries）

This paper deal with the progress of the pathogen and the latest detection technology for acute hepatopancreatic necrosis syndrome which causing mass death in recent years in shrimp.At present，most scholars recognized the pathogen of the disease is the special strains of Vibrio parahaemolyticus.The PCR detection method for this pathogen has been established.But the pathogenic mechanism and the accurate diagnosis method of this strain still need to be further studied.

Acute Hepatopancreas Necrosis Syndrome；Pathogen；Diagnosis Method

S944.4

E-mail：chenxz@xmciq.gov.cn

厦门市科技计划项目 （2041S0437）

2015-08-20