阿苯达唑对犬弓首线虫幼虫作用的实验研究

杨宝林

阿苯达唑对犬弓首线虫幼虫作用的实验研究

杨宝林

【摘要】目的 观察不同剂量阿苯达唑对不同感染时间的犬弓首线虫幼虫移行的抑制作用。方法 用犬弓首线虫感染期虫卵感染昆明小鼠，按照药物不同剂量和虫卵感染时间分组，动态观察阿苯达唑抑制犬弓首线虫幼虫移行的疗效。结果 采用相同剂量，不同给药时间的感染小鼠，通过减虫率统计结果分析，各用药组与对照组相比，P＜0.05，差异具有统计学意义。感染小鼠与正常小鼠的相比谷氨酰转肽酶、乳酸脱氢酶增高，胆碱酯酶降低，血清淀粉酶无差异，P＜0.05，差异具有统计学意义。结论 阿苯达唑治疗犬弓首线幼虫移行症有较好的疗效。药物疗效与剂量、治疗时间有密切关系，血清酶的变化与组织损伤也有密切关联。

【关键词】犬弓首线虫幼虫；阿苯达唑；血清酶

作者单位：266071山东省青岛卫生学校

Experimental Study on the Action of Albendazole to the Toxocaracanis Larvae

YANG Baolin Shandong Province Qingdao Health School, Qingdao 266071, China

[Abstract]Objective To observe the inhibitory action of Albendazole with different dosages on the larva migration during the different infection periods. Methods According to different doses and infectious time the curative effect of was monitored according to the change of both the reduce rate of larvae and the enzymes in the serum. Results In term of the infectious mice whose dosages were the same while the dose time were different, the result of reduce rate of larvae shows that the difference between each dosed group and controlled group is significant. Compared the serum enzymes of infectious mice with those of normal mice, both GGT and LDH were increase while CHE shows a distinguished reduction. On the other hand, there was no difference on the concentrations of AMY between them. Conclusion By the means of reduce rate of larvae and serum enzyme, it can be proved that the relationship among curative effect, dosage and treatment time is very tight, and the histological damage also affects the change of serum enzymes seriously.

[Key words]Toxocara canis larvae, Albendazole, Serum enzyme

犬弓首线虫（Toxocara Canis Stiles）是犬的常见肠道寄生虫，人是它的非正常宿主，其幼虫在非正常宿主的肝、肺、脑、眼等器官组织内可以长期生存，但不能继续发育[1]。人误食犬弓首线

虫感染期虫卵后，部分患者会出现一些消化道症状和呼吸道症状，部分患者出现惊厥、行为障碍等神经精神症状。阿苯达唑（Albendazole，ABZ）对多种肠道寄生蠕虫及某些组织内寄生幼虫有良好的杀灭作用。上世纪80年代，该药开始在临床上使用。之后，被广泛用于治疗和预防钩虫病、蛔虫病、鞭虫病、旋毛虫病、绦虫病、囊虫病等寄生虫病[2]。国内外学者对阿苯达唑在寄生虫方面的研究进行了大量的工作，但是对其在犬弓首线虫幼虫移行方面的研究并不多。鉴于感染初期是幼虫移行变化最大的时间，本实验选择了感染初期的2个时间段，分别选用3种剂量研究阿苯达唑对犬弓首线虫幼虫移行症的疗效，同时对用药后血清酶的变化进行了检测，以验证阿苯达唑对犬弓首线虫幼虫移行的抑制效果。

1　材料和方法

1.1 实验动物及其感染

采用体重（30±2）g封闭群昆明2级清洁级小鼠（贵阳医学院动物中心提供）雌雄各半，灌胃1 000个虫卵/只，共感染48只，另设对照组小鼠8只。虫卵由本实验室按既往方法取得。

1.2 药物和治疗分组

阿苯达唑，武汉远城科技发展有限公司生产。本实验依照5日疗法进行用药，将感染小鼠分成两组（按感染后第7、12天开始用药分为7天用药组，12天用药组），同时每组再按阿苯哒唑 （mg/kg·d）不同剂量分为50 mg组、100 mg组、200 mg组分成3组灌胃给药，连续给药5天，另设1组感染后未用药鼠作为感染对照组，再设1组健康鼠作为正常对照组，每组8只鼠。

1.3 疗效考核

感染后第20天断颈处死并解剖小鼠，采用下述两种方法考核疗效：（1）脑压片计数幼虫。将鼠大脑组织取出，在每只鼠大脑左叶、大脑右叶和大脑与小脑连接部位，剪取脑组织各30 mg，置于两片载玻片之间压薄，镜检计数幼虫，取大脑3个部位的平均数作为脑压片计数。（2）稀盐酸法分离计数幼虫。参照杨超等[3]用于分离小鼠组织中钩虫幼虫的方法，即在烧杯内放一纱网，将脑、肝脏、肾脏、肺、肌肉等组织分别剪碎，置于每个烧杯的纱网上，加入0.5%稀盐酸溶液浸没分离物，将烧杯置37℃温箱内，待幼虫自行移入杯底。24 h后，弃去纱网和上层液体。将余液置入10 ml离心管中离心，弃去上清液，余下1 ml沉淀液，混匀后，吸取50 μl置于载玻片上，计数幼虫，每个样本计数5次，取平均值，乘以20即为样本中的幼虫数。减虫率计算：将对照组感染鼠回收幼虫平均数视为100%，计算不同剂量用药组幼虫减虫率（对照组感染鼠回收幼虫数-用药组幼虫回收数/对照组感染鼠回收幼虫数）。犬弓首线虫幼虫在感染宿主前7天主要在宿主内脏移行，引起肝、肺等组织器官的病变，因此本实验在感染后第20天时，取第7天开始用药的3组小鼠，采用眼眶取血法采集全血标本24份进行血清酶的检测。另取感染未用药组全血标本8份，未感染未用药组全血标本8份。将血清立即送往生化科，用自动生化分析仪进行以下几个指标的检测：淀粉酶（Amylase，AMY）、谷氨酰转肽酶（Glutamyl Transpeptidase，GGT）、胆碱酯酶（Cholinesterase，CHE）、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）。

1.4 统计学方法

数据应用软件SPSS17.0处理，计数资料采用χ2检验,计量资料采用t检验，P＜0.05，差异具有统计学意义。

2　实验结果

2.1 阿苯达唑对7天用药组感染鼠的疗效比较

20天处死小鼠时，对比不同剂量阿苯达唑对于7天用药组的疗效结果。见表1。脑组织压片比较：ABZ 50 mg组、100 mg组、200 mg组与感染对照组相比压片幼虫数都减少，P＜0.01，差异具有统计学意义。减少虫率比较：ABZ 50 mg组、100 mg组、200 mg组与感染对照组相比，幼虫数都减少，P＜0.01，差异具有统计学意义。50 mg组与100 mg组、200 mg组相比，50 mg组幼虫数减少程度较小，P＜0.05，差异具有统计学意义。

2.2 阿苯达唑对12天用药组感染鼠的疗效比较

20天处死小鼠时，不同剂量阿苯达唑对于12天用药组的疗效结果。见表2。脑组织压片计数比较：ABZ 50 mg组、100 mg组、200 mg组与感染对照组间比较，各组压片计数均减少，P＜0.01，差异具有统计学意义。减少虫率比较：ABZ 50 mg组、100 mg组、200 mg组与感染对照组相比，幼虫计数均减少，P＜0.01，差异具有统计学意义。50 mg组、100 mg组、200 mg组各组间比较，P ＞0.05，差异不具有统计学意义。

2.3 用药组和对照组小鼠血清酶的比较

20天处死小鼠时，第七天用药组小鼠和两组对照组小鼠血清酶的检测结果。见表3。感染未用药组小鼠GGT、CHE、LDH这3种血清酶的检测值与正常小鼠相比都较高，P＜0.01，差异具有统计学意义。而AMY的血清酶检测值与正常小鼠相比，P＞0.05，差异不具有统计学意义。

2.4 各剂量组CHE血清酶的比较

50 mg组、100 mg组、200 mg组之间相比，前者检测值均低于后者，P＜0.01，差异具有统计学意义。50 mg组、100 mg组、200 mg组与感染对照组相比，前者检测值低于后者，P＜0.05，差异具有统计学意义。

2.5 各剂量组LDH血清酶的比较

各剂量组与感染对照组间比较，各剂量组检测值均低于感染对照组，P＜0.01，差异具有统计学意义。

2.6 各剂量组GGT血清酶的比较

50 mg组与100 mg组相比，前者检测值高于后者，P＜0.01，差异具有统计学意义。100 mg组与200 mg组比较，前者检测值高于后者，P＜0.05，差异具有统计学意义。50 mg组、100 mg组、200 mg组分别与感染对照组相比，用药组均比感染对照组检测值低，P＜0.01，差异具有统计学意义。

3　讨论

药物疗效与剂量、治疗时间有密切关系，就减虫率分析，相同的用药时间比较，各药物组均有一定的疗效，但大剂量组100

表1　7天用药组中阿苯达唑对感染鼠的疗效

表2　12天用药组中阿苯达唑对感染鼠的疗效结果

mg和200 mg疗效更加满意，与脑压片的结果相符。就治疗时间分析，在减虫率方面，感染后第7天用药组优于第12天用药组。可能有2个方面原因：幼虫移行和阿苯达唑自身药物特点。感染初期，幼虫主要分布在肝、肺等器官，7天以后，向脑内移行数量增多。而阿苯达唑难溶于水和大多数有机溶剂，在胃肠道的吸收较差。因此，ABZ可在肠道保持较高的浓度，可有效地去除肠道内的寄生虫。同时，阿苯达唑半衰期为8.5 h，阿苯达唑进入体内后，主要分布在肝、肾等组织，由于血脑屏障的影响，ABZ在脑组织中分布较差。因此，在感染早期，幼虫主要分布在肝、肺等器官，此时用药可大量杀死犬弓首线虫幼虫。7天之后，大剂量用药，也可取得较满意的结果。王光西等报道[4]，犬弓首线虫幼虫感染小鼠后第3天，肝切片上幼虫周围有炎性细胞浸润，包括嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞。肝血窦扩张充血，虫体周围部分肝细胞有变性坏死，肝细胞核固缩，胞浆着色浅。伴随组织器官的病理损害，生化指标也会发生变化，血清酶的变化就可以反应这些病理变化。胆碱酯酶（CHE）是由肝脏合成的水解酶，由于该酶合成后立即释放至血液中，血液中CHE的浓度能够反映其合成的速率。当肝脏受损时肝细胞的合成功能下降，血清CHE活力降低，其下降程度与病情的严重程度相平行。因此，血清胆碱酯酶活力能很好地反映肝脏的合成功能，亦能准确地反映肝脏的病理损害。本实验中，感染小鼠与正常小鼠血清中的CHE检测相比，前者CHE值低，P＜0.05，差异具有统计学意义。可能是由于幼虫移行至肝脏后，引起肝脏的急性炎症反应，造成部分肝细胞变性坏死，肝细胞核固缩，从而导致肝细胞的合成功能下降，与对照组相比，各用药组都可有效的减少犬弓首线虫幼虫移行对肝脏造成的损害。说明阿苯达唑对肝脏内幼虫有较好的抑制效果。血清中的谷氨酰转肽酶GGT主要来自肝脏，具有较强的特异性。当肝脏受损伤后，就会造成GGT升高。本实验中，感染小鼠血清中的GGT值比正常小鼠的血清GGT值高，P＜0.05，差异具有统计学意义。与CHE的血清检测值相似，均反映出ABZ对早期移行至肝脏的犬弓首线虫幼虫有较好的抑制作用。乳酸脱氢酶以心脏、肾脏和骨骼肌内含量最丰富，其次以肝脏、脾脏、胰腺和肺组织较多。当这些组织的细胞受到损伤时，均可引起LDH的逸出，引起血清LDH活力增加。本实验中，感染小鼠血清中的LDH值比正常小鼠的检测值高，P＜0.05，差异具有统计学意义。说明3种剂量均可有效地抑制幼虫在体内的移行，大剂量组效果好于低剂量组。淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌。当腮腺或胰腺出现急性炎症时，血中淀粉酶明显增高，本实验中，感染小鼠血清淀粉酶（AMY）与正常小鼠血清检测值无显著差异，可能是因为感染早期，犬弓首线虫幼虫移行主要分布在肝、肺、肾等部位，而胰腺和腮腺未受到损害。从血清酶的检测结果看，血清酶的变化与组织损伤有着密切的关系，同时我们也可以看到，血清酶的改变可以间接地反映ABZ对犬弓首线虫幼虫移行症的疗效，从而证实了大剂量ABZ对犬弓首线虫幼虫移行症具有较好的疗效。

综上所述，通过减虫率和血清酶两个指标，证实了阿苯达唑对犬弓首线虫幼虫移行症具有良好的疗效，同时证实了感染早期用药的重要性。阿苯达唑用于治疗犬弓首线幼虫移行症有较好的应用潜力。

表3　7天用药组中对小鼠血清酶检测结果

参考文献

[1] Schantz. PM[J]. Am I Trop Med Hyg，1989，42（3）：21.

[2] 罗仲金，陈盛文，雷莉，等. 犬弓首线虫幼虫培养、排泄分泌抗原的制备和分析[J]. 中国人兽共用病杂志，1991，7（2）：60-62.

[3] 杨超. 药物治疗小鼠体内钩虫移行期幼虫的效果[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1987，5（4）：288-289.

[4] 王光西，罗仲金. 伊维菌素和阿苯达唑治疗犬弓首线虫幼虫感染鼠的实验观察[J]. 实用寄生虫病杂志，1997，5（2）：75-76.

·临床研究·

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.19.106

【文章编号】1674-9308（2015）19-0139-03

【文献标识码】B

【中图分类号】R453