HPLC法测定卡巴拉汀贴剂药物含量及其体外释放量

2016-01-27肖志辉王萍张少俊

中国现代药物应用 2016年20期

肖志辉王萍张少俊

·实验研究·

肖志辉王萍张少俊

目的探究运用高效液相色谱(HPLC)法测定卡巴拉汀贴剂中的药物含量及其体外透皮释放量的效果。方法通过HPLC法测定卡巴拉汀贴剂以及卡巴拉汀药剂中的药物含量,同时选取离体豚鼠皮肤作为透皮屏障实验样本,分析卡巴拉汀透皮贴剂实际具备的体外透皮性能。结果卡巴拉汀在9.68～116.31 μg/ml的浓度范围内具备较好的线性关系检出特征,其检出限为0.16 μg/ml,精密度相对标准偏差(RSD)测算范围为0.12%～0.47%,在低、中以及高浓度等级条件下的平均测算回收率分别为98.78%、98.52%以及98.86%。体外透皮试验条件下获取的描述曲线方程符合方程属性特征。结论运用HPLC法测定卡巴拉汀贴剂中的卡巴药物含量,并运用离体豚鼠皮肤作为屏障检测卡巴拉汀贴剂中有效药物成分的体外透皮释放量,能够实现对卡巴拉汀药物疾病药理运用特征以及释放效能状态的清晰评估,为临床药师开展卡巴拉汀贴剂的临床应用提供指导支持条件。

高效液相色谱法；卡巴拉汀贴剂；药物含量；体外透皮释放量

本研究针对卡巴拉汀贴剂中的卡巴拉汀成分含量以及体外透皮释放量开展了实验室测定,取得了一定成果,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 ①北京聚德阳光医药科技有限公司生产提供的卡巴拉汀单品。②北京康倍得医药技术开发有限公司生产提供的卡巴拉汀空白贴片,单片面积为20.00cm2。③美国Fisher公司提供的经由色谱提纯的甲醇试剂。④北京大学医学部动物中心繁育提供的雄性豚鼠若干只,平均体重(250.00±30.00)g。

1.2 仪器 ①美国Waters公司生产提供的Waters2690高效液相色谱仪(搭配使用自动进样器),Waters2487紫外检测器以及Millennium32色谱数据工作站。②日本岛津公司生产提供的UV-2401型紫外光-可见光分光光度仪。③上海锴凯科技贸易有限公司生产提供的TK-60B型Frannz扩散池。

1.3 HPLC法检测过程中技术控制条件 ①色谱柱：择取Waters XTerra PR18.00柱(150.00mm×3.90mm,5.00 μm)。②流动相：由甲醇、碳酸氢铵溶液以及水按照42∶27∶31体积比混合而成,且碳酸氢铵溶液的浓度应当严格控制在10.00mmol/L,在此基础上还需运用浓度适宜的磷酸溶液的pH值调节到8.50。③柱温：32.00℃。④检测过程中的进样量：10.00 μl。⑤流速：1.00ml/min。⑥检测波长：210.00mm。

1.4 主要检验溶液的制备

1.4.1 参照品溶液运用分析天平精确测量卡巴拉汀单品19.386mg,并将称取的药品加入有效容积为50.00ml的容量瓶中,运用经由色谱净化获取的甲醇完成溶解、定容和摇匀处理过程,即可获取浓度水平为387.72 μg/ml的参照品溶液。

1.4.2 实验品溶液取卡巴拉汀贴片,去除其防粘层并将其在25.00ml甲醇中常温浸泡处理24 h,随后运用孔径尺寸为0.22 μm的滤膜过滤处理获取甲醇滤出液,抽取2.00ml滤液,并运用色谱纯化甲醇稀释到10.00ml,即可获取实验品溶液。

1.4.3 空白溶液取空白贴片,按照实验品溶液的制备操作方法即可获取空白溶液。

1.5 体外透皮实验选取成年健康雄性豚鼠,应用电动剃刀彻底剔除其腹部和背部位置的全部毛发,用温开水洗净地皮肤,之后采用敲颅法促使其快速死亡,并立即剥离腹部皮肤,剔除皮下联结的脂肪组织,并浸泡于足量生理盐水中,放入冰箱备用。选取成年雄性豚鼠的腹部皮肤作为卡巴拉汀药物经皮渗透释放量实验室检测过程中的屏障材料,将经由前期技术处理环节获取的皮肤样本固定放置于总体积为18.00ml的由上海锴凯科技贸易有限公司生产提供的TK-60B型Frannz扩散池上方,其保证腹部皮肤组织的角质层朝向外侧,取卡巴拉汀透明贴剂,去除其防粘层并将其粘贴在角质层上。运用pH值为6.80的磷酸盐缓冲用液作为卡巴拉汀透皮释放过程在的丛台介质,并将介质在使用过程中的温度参数控制在31.50～32.50℃。

2 结果

卡巴拉汀在9.68～116.31 μg/ml的浓度范围内具备较好的线性关系检出特征,其检出限为0.16 μg/ml,精密度RSD测算范围为0.12%～0.47%,在低、中以及高浓度等级条件下的平均测算回收率分别为98.78%、98.52%以及98.86%。体外透皮试验条件下获取的描述曲线方程符合方程属性特征。

3 讨论

从化学属性与药理学属性角度分析,卡巴拉汀属于氨基甲酸类乙酰胆碱酯酶抑制剂类药物,能够借由促使胆碱能神经元细胞释放的乙酰胆碱物质生物代谢降解过程发生时间延搁,促进人体胆碱能神经元细胞的神经信号传导过程快速实现［1,2］。现阶段,卡巴拉汀是全世界范围内应用数量最大且应用频率最高的阿尔茨海默症痴呆型症状缓解和改善类药物［3］。

透皮给药系统与传统的口服给药方式相对照,其最大的差别在于彻底避免了人体胃肠道生理组织的消化代谢处理过程,以及人体肝脏器官在药物有效成分实际吸收利用之前发生的首过效应,因而确保了卡巴拉汀药物的生物利用率水平获取了程度显著的提高变化［4］。与此同时,透皮贴剂的给药形式在实际运用过程中通常能够产生持久性、恒定性以及可控性的血药浓度水平,有效减低了患者在接受药物治疗过程中的不良反应事件发生可能性［5］。

本次研究中,卡巴拉汀在9.68～116.31 μg/ml的浓度范围内具备较好的线性关系检出特征,其检出限为0.16 μg/ml,精密度RSD测算范围为0.12%～0.47%,在低、中以及高浓度等级条件下的平均测算回收率分别为98.78%、98.52%以及98.86%。体外透皮试验条件下获取的描述曲线方程符合方程属性特征。以上研究结果表明,运用HPLC法测定卡巴拉汀贴剂中的卡巴药物含量,并运用离体豚鼠皮肤作为屏障检测卡巴拉汀贴剂中有效药物成分的体外透皮释放量,能够实现对卡巴拉汀药物疾病药理运用特征以及释放效能状态的清晰评估,为临床药师开展卡巴拉汀贴剂的临床应用提供指导支持条件,促进我国现代临床医学事业的稳定有序发展。

总之,运用HPLC法测定卡巴拉汀贴剂中的卡巴药物含量,并运用离体豚鼠皮肤作为屏障检测卡巴拉汀贴剂中有效药物成分的体外透皮释放量,能够实现对卡巴拉汀药物疾病药理运用特征以及释放效能状态的清晰评估,为临床药师开展卡巴拉汀贴剂的临床应用提供指导支持条件。

［1］郭淼,杜洪光,钟叙英,等.HPLC法测定卡巴拉汀贴剂中药物含量及其体外透皮释放量.北京化工大学学报(自然科学版),2011,38(1):35-38.

［2］许丽丽,杜洪光,王刚,等.HPLC法测定丁丙诺啡贴剂中药物的含量及其体外透皮释放量.药物分析杂志,2009,29(8):1294-1296.

［3］王文刚,恽榴红,王睿,等.非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂的处方与工艺研究.中国药房,2008,19(16):1236-1239.

［4］陈雯雯,云琦,陶亮,等.小茴香挥发油贴剂体外释放和透皮性能的研究.天然产物研究与开发,2016,28(1):65-70.

［5］刘新国,张鹰,程璐,等.环维黄杨星D透皮贴剂体外释放度与经皮渗透实验.医药导报,2016,35(6):640-645.

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