宫颈鳞癌组织中HIF-2 、ABCG2的表达及意义

郭玲娣，徐名，张旭艳，陈敏

(1 潍坊医学院，山东潍坊 261000；2 郯城县第一人民医院)



宫颈鳞癌组织中HIF-2 、ABCG2的表达及意义

郭玲娣1，徐名2，张旭艳1，陈敏1

(1 潍坊医学院，山东潍坊 261000；2 郯城县第一人民医院)

摘要：目的观察宫颈鳞癌组织中缺氧诱导因子2(HIF-2 )、腺苷三磷酸结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达，并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测88例宫颈鳞癌组织(观察组)、47例正常宫颈组织(对照组)中的HIF-2 、ABCG2，分析其与宫颈鳞癌临床病理特征的关系及二者表达的相关性。结果观察组HIF-2、ABCG2的阳性表达率均高于对照组(P均<0.05)。HIF-2 、ABCG2表达均与宫颈鳞癌FIGO分期、淋巴结转移及分化程相关 (P均<0.05)，与患者年龄、肿瘤直径无关(P均>0.05)；HIF-2 与ABCG2的表达呈正相关(r=0.316，P=0.003)，且二者均与宫颈鳞癌患者预后有关(P均<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中ABCG2、HIF-2 呈高表达，二者可能参与宫颈鳞癌的发生、发展。

关键词：宫颈鳞癌；缺氧诱导因子-2 ；腺苷三磷酸结合转运蛋白G超家族成员2

宫颈癌是女性第二大常见恶性肿瘤，发病机制尚不明确。缺氧诱导因子2(HIF-2)是肿瘤细胞在转录水平适应缺氧环境最主要的调控因子，其在肿瘤细胞的生长、浸润和转移等过程中起重要作用[1]。腺苷三磷酸结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)属于ATP结合组件蛋白G亚家族成员，在维持干细胞及多种细胞的稳定性以及耐药性等方面有重要的意义[2]。近年来HIF-2 、ABCG2在促进肿瘤细胞发生发展中的作用成为研究热点，但在宫颈鳞癌中的相关报道较少。2012年10月～2015年5月，我们检测了宫颈鳞癌组织中HIF-2、ABCG2的表达水平，探讨其在宫颈鳞癌发生、发展中的作用及相关性。现报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料选取2012年10月～2013年2月于潍坊医学院附属医院行手术切除并经病理组织切片证实为宫颈鳞癌的标本88例(观察组)，患者年龄27～64岁，平均52.9岁；患者术前均未行放、化疗等治疗。根据2009年FIGO分期标准分为Ⅰ期37例，Ⅱ期30例，Ⅲ+Ⅳ期21例；其中淋巴结转移26例，62例未见转移；肿瘤分化程度为高分化42例，中分化28例，低分化18例；随访2年时间，存活24例、病死16例、失访48例。选取同期因子宫肌瘤行全子宫切除的正常宫颈组织47例作为对照组，患者年龄30～59岁，平均49.7岁，术前TCT、HPV检测均阴性。本实验经医院伦理委员会批准，所有研究对象签署知情同意书。两组一般资料具有可比性。

1.2宫颈组织HIF-2 、ABCG2检测采用免疫组化法。所有操作严格按照使用说明书进行。兔抗人HIF-2 单克隆抗体购于北京博奥森公司(工作浓度为1∶200)、鼠抗人ABCG2单克隆抗体购于武汉博士德公司(工作浓度为1∶100)。通用型免疫组化试剂盒(SP9000)购于北京中衫金桥公司。免疫组化步骤按照一抗说明书执行。参照Giatromanolaki方法[3]，随机选择5个高倍镜视野计数100个细胞，HIF-2 阳性表达主要位于细胞核，ABCG2表达主要位于胞质，胞核也有少量表达。按照阳性细胞百分比：细胞阳性率<5%计0分, 5%～<25%计1分, 26%～<50%计2分, ≥50%计3分。根据切片染色强弱：无染色计0分, 中等染色(棕黄色)计2分, 强染色(黄褐色)计3分。上述二项得分相加, 0分为-,1～2分为+, 3～4分为++, 5～6分为+++。以+、++、+++之和计算阳性表达率。

1.3统计学方法采用SPSS19.0统计软件。计数资料进行χ2检验，HIF-2 表达和ABCG2的相关性采用Spearman相关分析。采用Kaplan-Meier法计算生存率，以Log-rank法比较组间生存率的差异。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组HIF-2 、ABCG2蛋白表达观察组、对照组HIF-2 阳性表达率分别为29.7%(14/47)、63.6%(56/88)， ABCG2阳性表达率分别为23.4%(11/47)、52.3%(46/88)，P均<0.05。

2.2HIF-2 、ABCG2表达与宫颈鳞癌临床病理参数的关系见表1。

表1　HIF-2 、ABCG-2表达与宫颈鳞癌

2.3宫颈鳞癌组织中ABCG2、HIF-2 表达的关系 相关性分析显示，宫颈鳞癌组织中ABCG2、HIF-2表达呈正相关(r=0.316，P=0.003)。

2.4宫颈癌组织中HIF-2 、ABCG2表达对生存率的影响18例ABCG2阴性表达者2年累计生存率(83.3%) 明显高于22例阳性表达者(53.8%)，P=0.025；14例HIF-2 阴性表达者2年累计生存率(71.4%)明显高于26例阳性表达者(53.8%)，P=0.043。

3讨论

低氧环境不仅在肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭转移及血管生成等过程中发挥作用，而且还与肿瘤干细胞的自我更新和多分化潜能有关[4]。研究发现，肿瘤细胞可通过活化HIF来适应微环境的变化[5]。HIF-2是由HIF-2 与HIF-1β组成的转录因子，是HIF-2的调节亚基与功能亚基。研究发现，HIF-2 在胃癌组织中的阳性表达率随着淋巴结转移数目的增多、癌组织分化程度的降低而增高，且与不良预后密切相关[6～8]。另有研究发现，HIF-2 的表达与宫颈鳞癌呈显著正相关，且随宫颈癌分期提高其阳性表达率亦增加[9，10]。本研究结果显示，观察组HIF-2 阳性表达率明显高于对照组,且 HIF-2 表达与宫颈鳞癌分化程度、FIGO分期及淋巴结转移者2年生存率有关。这提示HIF-2 的阳性表达可增强宫颈鳞癌的局部浸润和远处转移能力，并可用于初步推测宫颈癌患者的预后。

ABCG2基因于1998年首先从耐药乳腺癌细胞中发现，以往研究主要认为ABCG2的表达与肿瘤细胞的化疗耐药有关。近年来有文献报道，ABCG2基因与肿瘤细胞生长侵袭转移和生存关系密切[11]。有学者发现，抑制ABCG2基因的表达治疗脑胶质瘤效果较好[12]。另有学者认为，ABCG2的表达与淋巴结转移有关，高表达者预示预后较差[13]。本研究显示,观察组ABCG2的阳性表达率明显高于对照组，且其表达与肿瘤FIGO分期、淋巴结转移、分化程度有关；ABCG2阳性表达者2年累计生存率明显低于阴性表达者，提示ABCG2表达情况可能是影响宫颈癌患者预后的重要因素。

相磊等[14]采用RNA干扰技术沉默乳腺癌中的HIF-2基因，发现肿瘤细胞中ABCG2 mRNA水平及蛋白表达水平明显降低。Xiang等[15]在乳腺浸润性导管癌中研究显示，HIF-2 在低氧环境下与启动子功能区的低氧反应元件结合，启动了ABCG2的转录和翻译，从而使肿瘤细胞对化疗耐药。本研究结果显示，在宫颈鳞癌组织中ABCG2、HIF-2 的表达呈正相关，HIF-2 阳性表达者ABCG2表达率明显高于HIF-2 阴性表达者，提示二者共同参与宫颈癌的发生、发展。

参考文献：

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[10] 高桂鹏，冯玉光.氧浓度与Cag+幽门螺杆菌对人胃癌SGC-7901细胞系HIF-2 和Oct-4表达影响的研究[J].中华肿瘤防治杂志,2013,20(9):666-670.

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[13] Kulp SK， Muthusamy N， Byrd JC.FTY720 induces apoptosis inhepatocellular carcinoma cells through activation of protein kinase delta signaling[J]. Cancer Res, 2013,68(4):1204-1212.

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[15] Xiang L, Liu ZH, Huan Q, et al. Hypoxia-inducible factor-2 is associated with ABCG2 expression,histology-grade and Ki67 expression in breast invasive ductual carcinoma[J]. Diagn Pathol, 2012,27(7):32-38.

通信作者：张旭艳

中图分类号：R737.33

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2015)46-0077-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.46.034