2011至2013年临床分离肠球菌属细菌的耐药性变迁分析

2011至2013年临床分离肠球菌属细菌的耐药性变迁分析

张正银，孙晴，王立平

(上海市同仁医院检验科，上海 200336)

关键词：肠球菌；抗菌药物；耐药性；分布

中图分类号：

文章编号：1673-8640(2015)02-0206-03R378.1

文献标志码：码：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.01.025

作者简介：张正银，女，1965年生，硕士，主任技师，主要从事临床微生物学检验工作。

收稿日期：(2014-10-15)

肠球菌是人体肠道的条件致病菌，不仅可引起尿路感染，还可引起败血症、腹腔炎、心内膜炎等危及生命的感染。其固有耐药性是临床治疗的一大难题。由于抗菌药物的广泛应用，肠球菌耐药菌株日益增多，耐药性问题也日趋严重，尤其是近年来耐万古霉素菌株的出现给临床治疗带来了严峻的考验[1]。因此，对肠球菌属细菌的耐药性进行动态监测，了解其耐药现状对指导临床合理用药具有重要意义。

一、材料和方法

1.菌株来源收集2011年1月至2013年12月上海市同仁医院临床标本中分离的肠球菌属细菌，剔除重复菌株，共计581株。

2.仪器与试剂Vitek 2 Compact全自动微生物分析仪及其配套鉴定及药敏卡片由法国生物梅里埃公司提供。MH平板由上海伊华公司提供，药敏纸片为英国oxoid 公司产品。万古霉素E-test 试条为法国生物梅里埃公司产品。质控菌株粪肠球菌ATCC29212由上海市临检中心提供。

3.肠球菌的分离鉴定参照《全国临床检验操作规程》(第3版)[2]，根据不同的标本种类选择相应的培养基及方法分离菌种。菌种鉴定采用Vitek 2 Compact GP卡进行。

4.药物敏感试验(简称药敏试验)最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)测定采用Vitek 2 Compact AST-GP67卡，磷霉素、氯霉素、替考拉宁药敏试验采用Kirby-Bauer法。结果判断根据美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)M100-S23(2013版)文件规定执行[3]。

5.万古霉素耐药肠球菌(vancomycin resistanceEnterococcus，VRE)的鉴定及耐药基因检测对Vitek 2 Compact 全自动微生物分析仪检测为万古霉素耐药的肠球菌菌株采用万古霉素E-test确认并测定MIC。鉴定为VRE送复旦大学附属华山医院抗生素研究所进行最终确认和耐药基因分析[4]。

6.统计学方法采用WHONET 5.6 软件进行统计分析。

二、结果

1.菌株来源581株肠球菌属细菌主要来源于中段尿423株(72.8%)，然后依次为呼吸道71株(12.2%)、分泌物34株(5.9%)、血液28株(4.8%)、胆汁13株(2.2%)、腹水5株(0.9%)、脓液4株(0.7%)及其它3株(0.5%)。

2.菌种分布581株肠球菌属细菌中粪肠球菌306株(52.7%)、屎肠球菌256株(44.1%)、鹑鸡肠球菌10株(1.7%)、铅黄肠球菌1株(0.2%)、鸟肠球菌8株(1.4%)。

3.2011至2013年粪肠球菌与屎肠球菌对抗菌药物的敏感性分析近3年的观察显示粪肠球菌对呋喃妥因、氨苄西林、磷霉素均保持较高敏感性，前两者耐药率有所下降，后者稍有上升；对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素无耐药。屎肠球菌对奎奴普丁-达福普汀、磷霉素、氯霉素保持较高敏感性，磷霉素耐药率逐年上升；2012年开始出现VRE，发生率上升。 粪肠球菌较为敏感的药物有氨苄西林和呋喃妥因。屎肠球菌较为敏感的药物奎奴普丁-达福普汀、氯霉素，出现VRE；两者均敏感的抗菌药物有利奈唑胺(均无耐药株)、万古霉素、替考拉宁、替加环素，较为敏感的药物有磷霉素和氯霉素，见表1和表2。

表1　2011至2013年临床分离粪肠球菌对抗菌药物的耐药率(R%)和敏感率(S%)

表2　2011至2013年临床分离屎肠球菌对抗菌药物的耐药率(R%)和敏感率(S%)

4.万古霉素耐药肠球菌分离情况581株肠球菌属细菌中共分离5株VRE，均为屎肠球菌。2011年未分离出VRE，2012年屎肠球菌VRE发生率为2.3%(2/88)，2013年为5.2%(3/58)。5株VRE均来源于不同病区患者的中段尿，经检测分析基因型均为vanM型[4]。

三、讨论

肠球菌为人体寄居的正常菌群。由于抗菌药物的不合理使用、免疫受损宿主及侵袭性操作的增加，肠球菌成为医院感染的主要病原菌之一，在革兰阳性球菌引起的医院感染中占第2位[5]。以往的文献报道临床标本中屎肠球菌的分离率高于粪肠球菌[6-7]且有上升趋势。本研究结果显示粪肠球菌的分离率略高于屎肠球菌，趋势较平稳。2013年本院基建床位压缩导致总体检出数下降。本院临床分离肠球菌主要来源于中段尿标本，在尿路感染中肠球菌属细菌所占比率仅次于大肠埃希菌，一直居于第2位，与文献报道[8]一致。

总体上粪肠球菌的耐药率低于屎肠球菌，粪肠球菌对呋喃妥因、氨苄西林、磷霉素均保持较高敏感性，对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素无耐药。屎肠球菌较为敏感的药物为奎奴普丁-达福普汀、氯霉素、磷霉素和四环素，而磷霉素耐药率逐年上升，出现VRE(部分VRE菌株对替加环素和替考拉宁耐药)，两者均对利奈唑胺敏感。

1988年，英国报道了VRE，随后其它欧洲国家和美国也相继检出VRE。近年，国外报道 VRE感染有所上升，美国感染率较欧洲和北美高，为33%[9]。美国医院感染监测系统已将肠球菌属列为医院感染的第2大病原菌。中国CHINET细菌耐药性监测网的数据显示，我国肠球菌万古霉素耐药率虽然总体水平不高，但逐年上升的趋势明显，部分医院肠球菌万古霉素耐药率已接近10%。早先这类耐药株以vanA型为主，近年日益多元化，相继出现了vanB、vanM等基因型[10]。国内VRE菌株最初仅出现在北京、上海、浙江等为数不多的三级医院，近年分离到此类耐药菌株的医院不断增多。本院为二级医院，2012年开始出现VRE，均为屎肠球菌且发生有上升，经基因检测5株VRE菌为vanM型。

本研究结果显示，肠球菌粪肠球菌和屎肠球菌的药物敏感性存在差异。在观察的16种抗菌药物中有11种药物屎肠球菌的耐药率高于粪肠球菌，且出现VRE。临床治疗应根据药敏结果合理选用抗菌药物，同时应加强耐药监测，防止耐药菌播散。

参考文献

[1]汪复，朱德妹，胡付品，等．2012年中国CHINET细菌耐药性监测[J]．中国感染与化疗杂志,2013,13(5):321-330．

[2]中华人民共和国卫生部医政司． 全国临床检验操作规程[M]．3版．南京：东南大学出版社，2006:736-753．

[3]Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Third Informational Supplement [S]．M100-S23，CLSI ，2013．

[4]孙晴，张正银，郭燕，等．万古霉素耐药肠球菌的检测及分子特征[J]．中华传染病杂志，2014,32(5):266-268．

[5]沈倩燕，沈敏，汤园园．医院感染的病原菌特点及耐药性分析[J]．检验医学，2012，27(5)：396-399．

[6]刘丹．286株肠球菌分布及耐药分析[J]．中国当代医药，2013，20 (6 )：110-111．

[7]杨怀德，王玉莲，熊俊芳，等．420株临床分离肠球菌属细菌的耐药性变迁[J]．国际检验医学杂志，2014，35(16)：2151-2153．

[8]瞿婷婷，俞云松，孙自镛，等．2011年中国CHINET肠球菌属细菌耐药性监测[J]．中国感染与化疗杂志,2013,13(5):337-341．

[9]HIDRON AI，EDWARDS JR，PATEL J，et a1．NHSN annual update: antimicrobial-resistant pathogens associated with healthcare-associated infections: annual summary of data reported to the National Healthcare Safety Network at the Centers for Disease Control and Prevention, 2006-2007[J].Infect Control Hosp Epidemiol，2008，29(11):996-1011.

[10]朱德妹，汪复，胡付品，等.2010年中国CHINE细菌耐药性监测[J]．中国感染与化疗杂志,2011,11(5):321-329．

(本文编辑：姜敏)