2 418例血培养病原菌分布及耐药性分析

吴芳芳，　许　纹，　杨乐园

(1.上海建工医院检验科,上海 200083；2.上海市第一人民医院宝山分院,上海 200940)

2 418例血培养病原菌分布及耐药性分析

吴芳芳1，许纹1，杨乐园2

(1.上海建工医院检验科,上海 200083；2.上海市第一人民医院宝山分院,上海 200940)

摘要：目的了解血培养病原菌的分布及其耐药性，为临床治疗提供依据。方法采用回顾性调查方法，对2011年1月1日至2013年12月31日，从血标本中分离的菌株进行分析。结果2 418例血培养标本共分离出病原菌226株，阳性率为9.3%，其中革兰阴性杆菌143株(63.3%)，革兰阳性球菌83株(36.7%)，分离出最多的为大肠埃希菌99株(43.8%)、凝固酶阴性葡萄球菌43株(19.0%)和肺炎克雷伯菌20株(8.8%)。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南、阿米卡星、派拉西林-他唑巴坦高度敏感。革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉林高度敏感。结论血培养分离的病原菌以革兰阴性杆菌为主。分离病原菌的耐药情况严重，临床应加强对病原菌耐药性监测，合理使用抗菌药物。

关键词：血培养；临床分离菌；耐药性

中图分类号：

文章编号：1673-8640(2015)02-0163-04R446.5

文献标志码：码：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.02.015

Abstract:ObjectiveTo understand the blood culture pathogenic bacterium distribution and drug resistance, and to provide the reference for clinical treatment. MethodsBy retrospective investigation from January 1, 2011 to December 31, 2013, the bacteria isolated from blood specimens were collected for analysis. ResultsA total of 2 418 blood culture specimens were detected, there were 226 isolates of pathogenic bacteria, and the positive rate was 9.3%, including 143 isolates of gram-negative bacilli (63.3%), 83 isolates of gram-positive cocci (36.7%). The biggest isolation was Escherichia coli (99 isolates, 43.8%), 43 isolates of coagulase-negative Staphylococcus (19.0%) and 20 isolates of Klebsiella pneumoniae (8.8%). Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were sensitive to imipenem, amikacin and piperacillin-tazobactam. Gram-positive coccus is highly sensitive to vancomycin and teicoplanin. ConclusionsThe main isolated blood culture pathogenic bacterium is gram-negative bacillus, and the drug resistance of isolated pathogenic bacterium is severe. The clinical pathogenic bacterium resistance monitoring and the rational use of antimicrobial agents should be strengthened.

作者简介：吴芳芳，女，1968年生，本科，主管技师，主要从事临床微生物检验。

收稿日期：(2014-08-15)

Analysis on the pathogenic bacterium distribution and drug resistance among 2 418 cases of blood cultureWUFangfang1,XUWen1,YANGLeyuan2.(1.DepartmentofClinicalLaboratory,JiangongHospital,Shanghai200083,China; 2.BaoshanBranch,ShanghaiFirstPeople′sHospital,Shanghai200940,China)

Key words: Blood culture; Clinically isolated bacterium; Drug resistance

败血症是严重的全身感染性疾病，病情发展迅速，病死率高；随着广谱抗菌药物的广泛应用和各种侵入性医疗操作的增加，败血症的发病率呈上升趋势[1]。本研究通过对上海建工医院2011至2013年从血培养标本分离的菌株进行分析，了解上海建工医院血标本临床分离菌的分布及耐药性，为临床合理使用抗菌药物和经验性用药提供参考。

材料和方法

一、病原菌来源

收集2011年1月1日至2013年12月31日我院血培养标本中分离的菌株，同一患者剔除相同部位的重复菌株。

二、 标本处理

无菌操作抽取静脉血5~10 mL迅速注入血培养瓶中，立即送检。仪器报警有阳性时，立即转种相应的培养基中培养18~24h，同时涂片做革兰染色；仪器5 d未报警，并做涂片染色，转种血平板和巧克力平板，均无细菌生长则判读为阴性。

三、细菌鉴定

BacT/Alert 3D全自动血培养仪、ATB细菌鉴定仪及配套用细菌鉴定试条进行鉴定，产品均由法国生物梅里埃公司提供。

四、药敏试验

药敏试验采用ATB仪器法(法国生物梅里埃公司)进行操作。

判定标准按美国临床实验室标准化协会(CLSI)2012年版的规定[2]。质控菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、大肠埃希菌(ATCC 25922)和(ATCC 35218)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)粪肠球菌(ATCC 29212)由上海市临床检验中心提供。

五、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测

按CLSI推荐的纸片筛选法和酶抑制剂增强确证试验检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株。

六、统计学方法

采用WHONET 5.6软件进行统计分析。

结果

一、病原菌分布

从2 418例血培养送检标本中，分离出226株病原菌阳性，阳性率为9.3%。其中革兰阴性菌143株，占63.3%；革兰阳性菌83株，占36.7%；真菌2株，占0.9%。所分离的病原菌，前三位分别为：大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、肺炎克雷伯菌，见表1。

二、主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药性

大肠埃希菌占全部革兰阴性致病菌的69.2%，肺炎克雷伯菌的分离量居第二位，占全部革兰阴性致病菌的14.0%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌对亚胺培南高度敏感，未发现耐药株；三者ESBLs的发生率分别为65.3%、15.4%、54.5%，见表2。

表1　血培养病原菌分布及构成比

表2　主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

三、主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药性

革兰阳性菌中最常见致病菌是凝固酶阴性葡萄球菌，占全部革兰阳性致病菌的51.8%。凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及肠球菌属对万古霉素高度敏感。金黄色葡萄球菌及肠球菌属对替考拉宁均敏感，凝固酶阴性葡萄球菌对替考拉宁耐药率为2.3%。其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌占44.2%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌占78.4%，见表3。

表3　主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率

讨论

我院2 418例血标本共检出226株病原菌，阳性率为9.3%。低于国内文献报道[3]，可能与临床医师未在使用抗菌药物前采集血培养标本、采集标本时机和未及时送检等因素有关。病原菌以革兰阴性菌为主占63.3%,这与文献等[4]报道不尽相同，与夏涵等[5]报道比较接近。

我院近3年来，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌与奇异变形杆菌ESBLs的检出率分别为65.3%、15.4%、54.5%。ESBLs为丝氨酸蛋白酶的衍生物，主要通过质粒形式在细菌间传播，不但对β-内酰胺抗菌药物耐药，还对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类药物耐药，表现出多重耐药特性[6-7]。我院检出的大肠埃希菌对第三代头孢菌素、奎诺酮类和氨基糖苷类药物的耐药率均大于60.0%，临床应谨慎使用。亚胺培南对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌具有高度敏感性，未检出耐药株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对哌拉西林-他唑巴坦的耐药率分别为，9.5%、8.0%和0.0%，可作为经验性治疗的首选药物。

结果显示，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率分别为78.4%和44.2% ，尤其是耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌所占比例较高，耐药情况严重。凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素的耐药率均大于70.0%，临床应谨慎使用。两者对万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、利福平的均高度敏感。仅发现1株耐替考拉宁的凝固酶阴性葡萄球菌菌株，提示糖肽类抗菌药物仍是严重葡萄球菌血流感染的首选药物。

肠球菌属除对氨苄西林和氯霉素的耐药率小于30.0%外，对青霉素、四环素和左氧氟沙星的耐药率均大于40.0%。对红霉素、利福平的耐药率在70.0%左右，临床应谨慎使用。万古霉素和替考拉宁对肠球菌的敏感率均为100.0%。是严重肠球菌血流感染的首选药物。

综上所述，血培养阳性是临床血流感染病原学诊断的金标准。实验室应高度重视血流感染病原菌及其耐药性监测，及时报告临床医师。临床需要密切关注细菌耐药性变化趋势，应根据药敏结果合理有效使用抗菌药物，减少耐药菌的产生。

参考文献

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[3]洪亚明，范国萍，朱月霞. 血培养病原菌分布及耐药分析[J]．中华医院感染学杂志，2012,22(24)：5645 -5647.

[4]李光辉，朱德妹，汪复,等.2011年中国CHINET血培养临床分离菌的分布及耐药性[J].中国感染与化疗杂志，2013,13(4):241-247.

[5]夏涵，刘智勇，任章银，等.24 141份血培养病原菌的分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2012，22(20): 4607-4610.

[6]邱令法,裴碧娜. 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析[J]. 检验医学,2012，27(5): 421-423.

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(本文编辑：储怡星)