3%苦参碱水剂对黄瓜灰霉病的室内毒力测定和田间防治效果

2016-01-14吴红玉,陈泽林,侯满芝等

山西农业大学学报（自然科学版） 2015年6期

吴红玉，陈泽林，侯满芝，郝晓娟，王美琴*

(山西农业大学农学院，山西太谷 030801)

摘要：苦参碱是一种新型的植物源农药，对农业生产上病虫害的低毒高效防治有着重要意义。本试验以黄瓜灰霉病为防治对象，采用菌丝生长速率法和常规喷雾法，对3%苦参碱水剂进行了室内毒力测定和田间药效试验。结果表明：苦参碱水剂对黄瓜灰霉病菌的毒力较强，毒力回归方程为Y=4.649 1+0.523X，EC50为4.687 5 mg·L-1，仅为对照药剂腐霉利EC50的1/30。同时，田间药效结果显示：随着3%苦参碱水剂用量的增加，对黄瓜灰霉病的田间防治效果增强，当用量为900 mL·hm-2时对黄瓜叶片和果实分别达到了70.36%和90.49%的防治效果。建议在生产中使用900 mL·hm-2的3%苦参碱水剂来防治灰霉病。

关键词：3%苦参碱水剂；黄瓜灰霉病；毒力测定；田间药效

收稿日期：2015-06-09修回日期：2015-07-09

作者简介：吴红玉(1988-)，女(汉)，河北邢台人，硕士，研究方向：植物病害生物防治

通讯作者：*王美琴，副教授，硕士生导师。Tel:13935492918;E-mail:sxndwmq1973@163.com

基金项目：山西省科技攻关项目(20120311016-2)；博士科研启动项目(2013YJ10)

中图分类号：S43文献标识码：A

Toxicity Test and Field Efficacy of 3% Matrine AS against Cucumber Gray Mold

Wu Hongyu, Chen Zelin, Hou Manzhi, Hao xiaojuan, Wang Meiqin

(AgriculturalCollege,ShanxiAgriculturalUniversity,taigu030801，China)

Abstract:Matrine AS is a new botanical pesticide, it is very important for the prevention and control of the pest and plant diseases in the future agricultural production. In order to definite the control effect of 3% matrine AS against cucumber gray mold, the mycelium growth rate method and spraying method were adopted to test the toxicity and field efficacy. The results showed that the toxicity of matrine AS againsted Botrytis cinerea was better than procymidone, the virulence regression equation was Y=4.649 1+0.523X, EC50 was 4.687 5 mg·L-1 only 1/30 of the contrast. Meanwhile, the field efficacy results showed that the control effect of 3% matrine to the cucumber gray mold enhanced with the increased dosage. When the dosage is 900 mL·hm-2, the control effect on cucumber leaves and fruits reached 70.36% and 90.49%, respectively. Therefore, the recommended dosage of 3% matrine AS is 900 mL·hm-2 for the prevention and control of gray mold.

Key words:3% matrine AS; Cucumber gray mold; Toxicity test; Field efficacy

灰霉病是保护地栽培中的重要病害之一，可以侵染番茄、黄瓜、茄子、西葫芦和草莓等，导致幼果腐烂和叶片枯萎，造成巨大的经济损失。对于灰霉病的防治，目前还主要以化学防治为主。常用药剂有以腐霉利为代表的二甲酰亚胺类、以多菌灵为代表的苯并咪唑类、以嘧霉胺为代表的苯胺咪唑类和以百菌清为代表的保护性杀菌剂[1,2]。由于多年来杀菌剂的广泛使用加上灰霉病菌本身具有寄主范围广、产孢量大、遗传变异快和适合度高等特点，使得该病菌对多种杀菌剂产生了抗药性[3,4]，导致常规化学防治防效下降。因此选择高效、低毒、对环境无污染的生物源农药可以减缓其变异和产生抗药性的速度。苦参碱是从苦参中提取的一类生物碱，有高效、低残留、对人畜低毒的特点，是一种新型的环保型生物源农药[5～7]。现阶段对于苦参碱水剂在医用抗癌[8,9]和虫害防治[10～14]方面的应用较多，在病害防治方面相对较少。孟晶岩[15]等比较了腐殖酸铜水剂与苦参碱水剂对苹果树腐烂病菌的毒力与田间药效，证明0.5%苦参碱水剂对苹果树腐烂病病菌的抑制效果优于福美胂。为了研究苦参碱水剂在设施果蔬灰霉病上的防治效果，本试验以黄瓜灰霉病为目标，测定了苦参碱对黄瓜灰霉病的室内抑菌作用和田间防效，以期为苦参碱在防治保护地灰霉病的应用方面提供理论依据。

1材料与方法

1.1供试材料

试验地：晋中市太谷县农家大棚。黄瓜品种为卓越(青岛新干线蔬菜科技研究有限公司)。

供试药剂：试验药剂：3%苦参碱水剂(北京三浦百草绿色植物制剂有限公司)；对照药剂：50%腐霉利可湿性粉剂(住友上海菱农化工有限公司)。

供试菌株：黄瓜灰霉病菌(山西农业大学植物病理实验室提供)。

培养基：PDA培养基(马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉15 g，1 000 mL蒸馏水，pH7.0)。

1.2试验方法

1.2.13%苦参碱水剂对黄瓜灰霉病菌的毒力测定

母液的配制：用无菌水将3%苦参碱水剂与50%腐霉利可湿性粉剂分别制成1 000 mg·L-1的母液，置于4 ℃的冰箱中保存，使用时用无菌水稀释至所需浓度。

含药平板的制备：将PDA培养基冷却至50 ℃左右，按照药液与培养基为1∶9的比例制成含药平板。其中，苦参碱浓度分别为3 mg·L-1、7.5 mg·L-1、15 mg·L-1、37.5 mg·L-1和75 mg·L-1；腐霉利浓度分别为20 mg·L-1、40 mg·L-1、60 mg·L-1、80 mg·L-1和100 mg·L-1。以加入等量无菌水为对照，每个处理4次重复。

接种和测量：用直径为5 mm打孔器从培养2 d的病菌菌落边缘取菌丝块，置于含药PAD平板中央。然后置于23 ℃恒温箱中黑暗培养，以十字交叉法测定第4天的菌落直径，按以下公式计算抑菌率，并根据抑菌率的机率值(Y)和质量浓度的对数值(X)求毒力回归方程和EC50。

抑菌率/%=[(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-5 mm)]×100%

1.2.23%苦参碱水剂对黄瓜灰霉病的田间药效试验

本试验共设5个处理(表1)，在大棚中以2行为一个小区，小区面积为14.25 m2。每个处理4个小区，共20个小区。每个处理用水量2.5 kg，使用背负式手动工农-16型喷雾器喷雾，均匀喷洒于黄瓜植株上。试验于2014年2月18日开始，每7天一次，共施药4次，到3月11日喷药结束。在3月16日进行调查。调查方法参照农业部农药检定所生物测定室编著的《农药田间药效试验准则(一)》中“杀菌剂防治蔬菜灰霉病药效试验准则”有关内容。

病情指数={Σ[(各级病叶(果)数×相对级数值)]/调查总叶(果)数×9}×100

防治效果/%=[(对照区病情指数—处理区病情指数)/对照区病情指数]×100%

表1　农药使用剂量

2结果与分析

2.13%苦参碱水剂对黄瓜灰霉病菌的毒力测定

室内毒力测定结果表明(表2)：所测试的不同浓度苦参碱水剂对黄瓜灰霉病菌均有抑制作用，随着苦参碱浓度含量的增加，抑制率逐渐增强，其中毒力回归方程Y=4.649 1+0.523X，EC50为4.687 5 mg·L-1；对照药剂50%腐霉利可湿性粉剂的EC50则高达141.304 7 mg·L-1。当苦参碱浓度为75 mg·L-1时对灰霉病菌的抑制率为76.30%。

2.23%苦参碱水剂对黄瓜灰霉病的田间防治效果

在试验前田间没有病果，几乎没有病叶，并均被摘除，所以初始病情指数记为0。防治效果由表3可以看出：黄瓜灰霉病对叶片的为害较小，清水对照叶片病指仅为6.31。试验药剂3%苦参碱水剂对黄瓜灰霉病的防效随着浓度的增加而增加，用药量为900 mL·hm-2时对黄瓜叶片上灰霉病的防效为70.36%，与对照药剂50%腐霉利可湿性粉剂(1 500 g·hm-2)相比差异不显著。

对果实的防效由表4可以看出：黄瓜灰霉病对果实的为害较大，清水对照病指达到42.18，3%苦

表2　室内毒力测定结果

注：同列不同字母表示0.05水平差异显著，下同。

Note : different letters in each column mean significantly different at the level of 0.05, the same as below.

表3　3%苦参碱水剂防治黄瓜灰霉病试验结果(叶片)

表4　3%苦参碱水剂防治黄瓜灰霉病试验结果(果实)

参碱水剂对灰霉病果的防效随着浓度的增加而增加，当浓度为900 mL·hm-2时防效达到90.49%，与其他处理相比差异显著。而处理2的浓度为675 mL·hm-2的防治效果与对照药剂之间差异不显著，分别为78.47%和75.68%。

3结论与讨论

本试验结果显示，3%苦参碱水剂无论室内毒力还是田间试验，均对黄瓜灰霉病有较强的抑制效果。苦参碱对黄瓜灰霉病菌的EC50仅为4.6875 mg·L-1，而对照药剂50%腐霉利可湿性粉剂的EC50为141.304 7 mg·L-1是它的30倍。并且，田间药效结果与室内毒力测定结果相吻合，3%苦参碱水剂用量为900 mL·hm-2对田间黄瓜果实灰霉病的防治效果为90.49%，与对照药剂50%腐霉利可湿性粉剂1 500 g·hm-2的防治效果之间差异不显著，这对于代替和减少化学药剂的使用具有重要的意义。

目前，苦参碱在农业害虫的防治上应用较多，对其机理的前期研究也取得了一定的成果[17]，而作为杀菌剂的使用则相比之下很少，已报道的仅有对梨黑星病[18]、小麦白粉病[19]、番茄[20]和辣椒[21]病毒病、果树腐烂病[15,22]等少数几种植物病害，对其作为杀菌剂的推广应用缺乏理论指导，急需增加苦参碱在防治植物病害方面的研究。而且现阶段，对苦参碱作为农药使用方面的研究，只停留在将苦参碱的提取物经过简单加工后直接作用在病虫害的防治上，其生物活性成分研究很少。因此，苦参碱农药的作用机理、作用范围以及对有害生物的影响等也有待于进一步的研究。

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