IL-17F在口腔鳞状细胞癌患者血清中的表达及意义*

李 兵，傅 尧，符义富，游丽萍，刘 畅(南京大学医学院附属口腔医院检验科，南京 210008)

口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤。研究发现中晚期OSCC术后5年生存率远低于早期，而患者在被确诊为OSCC时，大多已经处于中晚期阶段[1]，因此寻找OSCC早期的筛选指标对于提高患者的生存和生活质量极为重要。IL-17F与IL-17A同属IL-17家族，与哮喘、狼疮和肿瘤等疾病相关。其功能上与家族最具代表性的IL-17A不完全相同。研究显示，IL-17A的含量在头颈部鳞癌患者血清中，明显高于健康人[2]，而IL-17F在OSCC及白斑患者血清中的表达目前还少有研究。本文用ELISA方法检测IL-17F在健康对照者、白斑和OSCC患者血清中的表达，并分析其与临床病理参数的关系，探讨其在OSCC发生发展中的作用及意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集2014年10月～2015年5月本院白斑患者及OSCC患者血清标本分别为25例和80例，平均年龄分别为57.1±8.6岁和62.2±9.5岁。所有患者组织标本均经苏木精-伊红染色法检测，由两位资深病理专家独立诊断，镜下可见伴有上皮异常增生且上皮过度角化的为白斑(癌前病变)；镜下可见鳞状细胞癌巢，细胞间有细胞间桥，细胞异型性且常见较多核分裂相的为OSCC。排除接受过化疗和放疗的患者。另随机收集无任何口腔病变的健康对照者33例，平均年龄53.5±10.3岁。血清标本收集经本院医学伦理学委员会批准及研究对象的知情同意。

1.2 试剂与仪器 血清IL-17F含量ELISA测定试剂盒为美国瑞博奥公司产品，酶标仪(美国伯乐公司)。

1.3 方法 采集研究对象肘静脉血3 ml，存于促凝管中，离心5 min取血清，存于1.5 ml Ep管中，于-80℃保存。白斑及OSCC患者均于手术前采血。按ELISA试剂盒说明书操作测定血清IL-17F含量。所有样本均设复孔，显色完毕用酶标仪450 nm波长检测。

2 结果

2.1 各研究对象血清IL-17F的水平 健康对照者、白斑患者和OSCC患者血清中IL-17F的含量分别为202.2±31.5，168.2±17.4和65.1±7.2 pg/ml。OSCC患者血清IL-17F含量明显低于白斑患者和健康对照者，差异均具有统计学意义(t=6.16，6.22，P<0.05)。白斑患者与健康对照者血清IL-17F含量无明显变化，差异无统计学意义(t=0.85，P>0.05)。

2.2 OSCC患者血清中IL-17F表达水平与临床病理参数的关系 见表1。分析OSCC患者血清中IL-17F的含量与年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤分化程度等临床病理参数的关系，结果显示，OSCC患者血清IL-17F含量与TNM期明显相关，差异有统计学意义(P<0.05)，与年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移及肿瘤分化程度无明显相关(P>0.05)。

表1 IL-17F的表达与OSCC临床病理参数的关系

2.3 血清IL-17F含量的诊断意义 见图1。受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示：ROC曲线下面积为0.843，IL-17F含量可以作为健康人和OSCC患者的良好诊断指标(P<0.05)，其临界值为37.84 pg/ml。

图1 IL-17F的ROC曲线

3 讨论

趋化因子是炎症相关性肿瘤的主要决定因素。其家族是一个非常复杂的网络，拥有大量的配体和受体，在相关癌症中的生物学功能多种多样。趋化因子影响肿瘤进展的多种途径，包括：白细胞募集，血管新生，肿瘤细胞增殖和存活，侵入和转移等[3]。IL-17F与IL-17A具有高度同源性，其在促进炎症因子分泌及炎症反应方面有类似的功能[4]。但有研究表明，在肿瘤相关血管生成方面，IL-17F和IL-17A存在不同的生物学功能。乳腺癌小鼠模型研究显示，IL-17A在肿瘤组织高表达，由肿瘤浸润淋巴细胞分泌，促使血管内皮细胞的迁移，进而加速肿瘤微血管的形成，利于肿瘤生长[5]。Pan等[6]人在非小细胞肺癌研究中发现，IL-17A可以诱导血管内皮生长因子的分泌，促进肿瘤血管生成，他们还发现患者血清IL-17A的水平与患者的生存率呈负相关。而肝癌和结肠癌动物模型研究显示，IL-17F可以降低IL-6，IL-8，VEGF等促血管生成因子的表达，从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤细胞的生长[7，8]。

本研究发现，IL-17F在OSCC患者血清中表达水平明显低于健康对照者，TNM Ⅲ～Ⅳ期患者表达水平明显低于TNM Ⅰ～Ⅱ期患者，提示IL-17表达与OSCC发生发展存在一定关联，很可能是起抑制作用。对照上文IL-17F在动物模型中抑制肿瘤生长的研究结果，本研究可以为其提供临床依据。同时我们发现白斑(癌前病变)患者血清IL-17F的表达水平与健康对照者相比，虽有降低，但差异无统计学意义，这可能与白斑的疾病进程有关，需要我们扩大样本量，继续研究。

我们通过ROC曲线分析发现，血清IL-17F含量可以作为一个很好的筛选指标，用于健康人和OSCC患者的早期筛查。对于OSCC患者的即时治疗和术后生存率具有非常重要的意义。

[1] 刘思玉，谢 龙，祁 兵，等．口腔鳞状细胞癌组织中差异微小RNA/mRNA表达谱的对接研究[J]．华西口腔医学杂志，2014，32(4)：400-403．

Liu SY，Xie L，Qi B，et al.Differential expression profiles of microRNAs/mRNA and docking study in oral squamous cell carcinoma[J]．West China Journal of Stomatology，2014，32(4)：400-403．

[2] Li C，Zhao Y，Zhang W，et al．Increased prevalence of TH17 cells in the peripheral blood of patients with head and neck squamous cell carcinoma[J]．Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod，2011，112(1)：81-89．

[3] 郑福利，党 淼，张淼芳，等．子宫内膜癌组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4表达水平研究[J]．现代检验医学杂志，2015，30(4)：21-23,27．

Zheng FL，Dang M，Zhang MF，et al．Expression of chemokine CXCL12 and its receptor CXCR4 in endometrial carcinoma tissues[J]．J Mod Lab Med，2015，30(4)：21-23,27．

[4] Vazquez-Tello A,Halwani R,Li R,et al．IL-17A and IL-17F Expression in B Lymphocytes[J]．Int Arch Allergy Immunol，2012，157(4)：406-416．

[5] Du JW，Xu KY，Fang LY，et al．Interleukin-17，produced by lymphocytes，promotes tumor growth and angiogenesis in a mouse model of breast cancer[J]．Mol Med Rep，2012，6(5)：1099-1102.

[6] Pan B，Shen J，Cao J，et al．Interleukin-17 promotes angiogenesis by stimulating VEGF production of cancer cells via the STAT3/GIV signaling pathway in non-small-cell lung cancer[J]．Sci Rep，2015(15):1605.

[7] Xie Y，Sheng W，Xiang J，et al．Interleukin-17F suppresses hepatocarcinoma cell growth via inhibition of tumor angiogenesis[J]．Cancer Investig，2010，28(6)：598-607．

[8] Tong Z，Yang XO，Yan H，et al．A protective role by interleukin-17F in colon tumorigenesis[J]．PLoS One，2012，7(4)：e34959．