中医五季变化对胃黏膜免疫功能的影响

中医五季变化对胃黏膜免疫功能的影响

黄晓宇，吴红倩，王菁，张兆国，刘晓燕*

(北京中医药大学基础医学院，北京 100029)

摘要：目的从中医“天人相应”动态生命观的角度揭示胃的生理功能特点及其调节机制。方法观察中医五季(春、夏、长夏、秋、冬)变化下，对照组和松果腺摘除模型组大鼠胃黏膜IL-2、IL-10、PGE2和SIgA含量改变情况。结果1)正常对照组大鼠胃黏膜IL-2水平在春季[(43.41±6.34) ng/g]呈现出高峰(P<0.05)；2)对照组大鼠在长夏季节胃黏膜IL-10[(15.56±2.59 ) ng/g]、PGE2[(47.23±23.09) ng/g]和SIgA[(3.62±1.50) μg/mg]水平最高，且与夏、冬季相比，均有统计学意义(P<0.05，P<0.01，P<0.01)；3)模型组大鼠摘除松果腺后，胃黏膜IL-2、IL-10的季节性节律消失，胃黏膜PGE2、SIgA含量变化不明显。结论胃黏膜的免疫因子存在季节性节律变化，长夏季节胃黏膜免疫功能较其他季节存在着显著的差异，而且松果腺在这一变化中起了重要的调节作用。

关键词：中医五季；长夏；胃黏膜免疫；松果腺

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.06.026

中图分类号：R226，R392.11文献标志码： A

文章编号：1003-5699(2015)06-0614-04

基金项目:国家自然科学基金资助项目(81001482)，国家支持计划课题(2012BAJ02B05)，北京中医药大学气化学说与藏象理论研究创新团队资助项目(522/0100603001)。

作者简介:黄晓宇(1990-),女,硕士研究生，主要从事“天人相应”理论研究。

收稿日期:(责任编辑：赵玉芝2014-09-19)

*通信作者:刘晓燕，电话-13693318075，电子信箱-liuxy1088@sina.com

Influence of traditional Chinese medicine five season changes on gastric immune function

HUANG Xiaoyu,WU Hongqian,WANG Jing,ZHANG Zhaoguo,LIU Xiaoyan*

(Preclinical Medicine Institute,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China)

Abstract:ObjectiveTo reveal the physiological features and regulation mechanism of stomach from the perspective of TCM “Corresponding between man and nature”,a dynamic perspective view of life.MethodsRats in control group and model group (with the removal of pineal glands) were raised under TCM five seasons (spring,summer,late summer,autumn,winter) and content changes of IL-2,IL-10,PGE2 and SIgA in gastric mucosa were observed.Results1)IL-2 level of rat gastric mucosa in control group showed a peak(43.41±6.34 ng/g) in the spring (P<0.05);2)IL-10,[(15.56±2.59) ng/g] PGE2[(47.23±23.09) ng/g)]and SIgA[(3.62±1.50) μg/mg] in gastric mucosa of the control rats all reached the highest level in late summer,and were statistically significant (P<0.05,P<0.01,P<0.01 respectively) compared with those in summer and winter;3)After model rats’ pineal glands being removed,seasonal rhythms of IL-2 and IL-10 in gastric mucosa disappeared,while the content of gastric mucosa PGE2 and SIgA did not change significantly.Conclusion1)Seasonal changes of gastric mucosal immune factors exist;2)There are significant differences in the gastric mucosal immune function in late summer compared to other seasons;3)Pineal gland plays an important regulatory role in these changes.

Keywords:TCM five seasons;late summer;gastric mucosal immune;pineal gland

中医“五脏应时”理论体现了机体自发地、自组织地去适应环境的过程[1],而这种从五季(春、夏、长夏、秋、冬)的动态变化中认识人体脏腑功能是中医生命观的特点之一。各项实验研究也证实其具有临床价值[2]。胃为“仓廪之官”，具有重要的临床意义。现代流行病学调查[3-6]也表明，许多胃的疾病均存在季节性发病的特点，因此有研究者相应地提出发病季节等因素是慢性胃炎研究的重要考虑因素[7],但其中的机制尚不清楚。免疫功能在维持机体健康方面发挥着重要的作用，而胃的黏膜免疫的变化也直接影响着胃的免疫功能[8]。因此本研究通过观察胃黏膜IL-2、IL-10、PGE2和SIgA等相关免疫因子在中医五季的变化特点，以及与季节调节密切相关的松果腺的影响，以期从中医“天人相应”动态生命观的角度揭示胃的生理功能特点及其调节机制。

1材料

雄性SD大鼠(180～200) g60只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物合格证号:SCXK(京)2006-0009。Rat IL-2 ELISA Kit,Rat IL-10 ELISA Kit,Rat PGE2 ELISA Kit,Rat SIgA ELISA Kit(以上试剂盒均购自北京瑞格博科技发展有限公司)。

2方法

2.1大鼠松果腺摘除将大鼠麻醉固定后无菌操作，头顶皮肤去皮，切开约2 cm，暴露颅骨矢状缝和人字缝。用牙科钻在人字缝和矢状缝两侧钻取圆形骨片，暴露矢状静脉、横向静脉窦、窦汇，用眼科弯镊直接取出松果腺，明胶海绵止血，清创，点适量青霉素干粉，缝合皮肤，创口再点青霉素干粉。

2.2动物饲养季节的选择本研究选择以春分、夏至、秋分、冬至前的1个月作为春、夏、秋、冬四季的动物饲养时间，并选择立秋前1个月为长夏季节的动物饲养时间。

2.3分组处理60只雄性SD大鼠分别于春分、夏至、秋分、冬至的前37 d，立秋的前38 d随机分为对照组和模型组。模型组饲养1周后制备松果腺摘除动物模型。2组大鼠在相同条件下分别饲养到春分、夏至、立秋前一天(长夏)、秋分、冬至进行实验取材。饲养环境为普通清洁环境，保持自然光照及室温，除冬季供暖，温度保持在(18±1) ℃外，未有其他人工干预，以保持与外界环境气候一致。动物自由摄食饮水，饲料为普通鼠全价颗粒饲料。

2.4取材及指标测定取材于晚上9点开始。大鼠麻醉固定后无菌操作,开腹刮取胃黏膜，-70 ℃冻存待测，指标检测采用ELISA法。

3结果

3.1中医五季变化对大鼠胃黏膜IL-2、IL-10水平的影响见表1。

ng/g

注：:与同组长夏比较，#P<0.05，##P<0.01；对照组与同一季节模型组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与同组春季比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与同组夏季比较，☆☆P<0.01

3.2中医五季变化对大鼠胃黏膜PGE2、SIgA水平的影响见表2。

PGE2:ng/g,SIgA:μg/mg)

注：：与同组长夏比较，#P<0.05，##P<0.01；与同组冬季比较△P<0.05，△△P<0.01

4讨论

《灵枢·岁露》曰：“人与天地相参也，与日月相应也”。对于脏腑与天地的通应规律，朱丹溪指出：“天地之气，以五行更迭衰旺而成四时，人之五脏六腑亦应之而衰旺。”然而其中具体的生理机制变化，由于古人受时代的局限并未阐明，这也为中医的现代研究提供了广阔的空间。

在中医“五脏应时”理论中有脾胃通应长夏的观点。通常人们更重视脾与长夏的关系，对于胃与长夏的关系则研究较少。本研究通过实验研究发现，胃的黏膜免疫系统也存在着跟随一年五季变化的规律，而且长夏季节各胃黏膜免疫指标较其他季节有明显不同，由此说明胃也存在与长夏季节相通应的特点。具体的生理机制如下：

4.1长夏季节的胃黏膜免疫Th1/Th2平衡不同于其他季节近年来研究发现，辅助性T细胞亚群Th1/Th2平衡在维持细胞因子的动态平衡，控制免疫应答的走向,维持正常内环境稳定中起了极其重要的作用[10]。其中,白介素2(IL-2)和白介素10(IL-10)分别是Th1和Th2的重要代表。

本研究发现，除长夏季节外，各季节胃黏膜的IL-2和IL-10变化趋势均呈同向变化,而在长夏季节则表现为IL-2水平降低而IL-10水平升高。这表明在长夏季节胃黏膜Th1/Th2平衡处于不协调状态，免疫应答严重失调，这可能也是临床上湿热型胃炎、原发性胆汁反流性胃炎易出现在夏秋季节的原因。有流行病学研究发现慢性胃炎在秋季高发，其次是夏季，高发节气在立秋[3]。一般来说，流行病学的夏季是指包括长夏在内的整个夏季,而我们实验中的夏季仅指流行病学中夏季的前半段，而立秋正好是长夏季节(夏至-处暑)。另有研究表明，原发性胆汁反流性胃炎检出率在夏季最高，冬季最低[4],并提示湿热之气在原发性发病中可能占重要地位，这也印证了本实验的结果。

4.2长夏季节的胃黏膜细胞保护因子浓度明显高于其他季节本研究表明，前列腺素E2(PGE2)的浓度在长夏季节明显高于其他季节。PGE2是胃黏膜重要的细胞保护因子，能防止各种有害物质对消化道上皮细胞的损伤,实验研究证实,中药可通过提高PGE2水平治疗慢性萎缩性胃炎[11]。本研究显示,长夏季节胃黏膜PGE2水平高表达的同时IL-2水平降低，IL-10水平升高，这很可能与PGE2可以抑制Th1型细胞因子的分泌，增强Th2型细胞因子分泌的调节功能有关。

本研究还发现，分泌型免疫球蛋白A(secretion IgA，SlgA)的免疫应答在长夏季节也明显高于其他季节。SIgA构成了胃黏膜免疫的特异性保护屏障，能够清除抗原而不激活系统免疫，在保护胃黏膜、防止胃溃疡发生方面发挥了重要作用。临床试验也证实：轻度胃炎与中、重度胃炎患者随着炎症的加重,胃液中SIgA水平有增高趋势[12],说明SIgA水平的高低与炎症程度相关。因此，SIgA含量的变化直接反映着机体黏膜的局部免疫状态。本实验发现，长夏季节胃黏膜SIgA水平最高，说明黏膜免疫功能在此时亢奋，这一特异性保护屏障机制被激活，同时还证明长夏季节炎性反应的存在，这可能与长夏季节湿热的气候环境易导致细菌滋生有关[3]。 另外，不同于胃炎的发病，多数报道指出，消化道出血和溃疡均呈现冬春寒冷季节多发、夏秋季发病率低的趋势[13-15]。本研究则发现，冬春季节PGE2和SIgA水平低下，表明其保护胃黏膜功能低下，加之季节变化剧烈，易造成免疫过度，对胃黏膜造成损伤，诱发消化道出血和溃疡。而长夏季节明显增强的SIgA可能在夏秋季节减少胃溃疡的出现中发挥了重要保护作用。

4.3胃黏膜免疫的五季变化与松果腺的调节有关松果腺是机体光敏感高位调节器官，它参与调节人体的季节节律变化，也可以通过分泌褪黑素(Melatonin,MT)而对机体免疫状态产生影响。各类研究表明,MT可促进IL-2和IL-10的生成[16-17]。本研究的实验发现胃黏膜的免疫因子存在季节性的变化规律，而摘除松果腺后，胃黏膜对于季节变化的感应性降低,IL-2和IL-10的节律更是明显消失，表明松果腺在胃黏膜免疫的季节变化中也发挥了重要的作用。同时，本研究也发现，松果体摘除后各季节PGE2、SIgA虽略有变化，但较正常组比较都不具有统计学意义(P>0.05),其水平随季节的变化趋势也与正常组类似，说明从季节调节上松果腺对胃黏膜PGE2、SIgA虽有影响，但影响不大。

综上所述，本研究从五脏应时的角度出发，通过观察五季中胃黏膜免疫的变化，发现胃黏膜的免疫因子存在季节性节律变化，长夏季节胃肠黏膜免疫功能较其他季节存在着显著的差异，而且松果腺在这一变化中起了重要的调节作用。本研究仅从免疫的角度揭示了胃与长夏相应的生理机理，其深入机制尚待进一步研究。

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