子宫内膜异位症不同中医证型与胰岛素样生长因子-Ⅰ的关系

子宫内膜异位症不同中医证型与胰岛素样生长因子-Ⅰ的关系

熊婕，朱咏梅*

(仙桃市中医医院，湖北 仙桃 433000)

摘要：目的探讨子宫内膜异位症不同中医证型与胰岛素样生长因子-Ⅰ的关系。方法选取因子宫内膜异位症需行腹腔镜手术的患者242例，另22例因不孕或者盆腔良性疾病需行腹腔镜手术患者为对照组,采用ELISA检测血清中胰岛素样生长因子-Ⅰ,免疫组化检测内膜组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ的表达情况。结果242例子宫内膜异位症患者中气滞血瘀型患者87例(36.0%),痰湿瘀阻型36例(14.9%)，寒凝血瘀型33例(13.6%),热郁血瘀型24例(9.9%)，肾虚血瘀型43例(17.8%)，气虚血瘀型19例(7.8%)。ELISA检测结果显示，气虚血瘀组患者血清中IGF-Ⅰ含量与正常对照组无差异外，其他各组均高于正常对照组(P<0.05)；气滞血瘀组、肾虚血瘀组患者血清中IGF-Ⅰ含量明显高于其他组别(P<0.05)；免疫组化检测结果显示，不同中医证型患者组织IGF-Ⅰ阳性表达率相对于正常对照组具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)，气滞血瘀型组IGF-Ⅰ阳性表达率高于痰湿瘀阻组、热郁血瘀组(P<0.05)，气滞血瘀组在9～12评分(+++)项中表达高于其他各组(P<0.05)。结论子宫内膜异位症患者中医证型中气滞血瘀、肾虚血瘀以及寒凝血瘀型与IGF-1的高表达有关。

关键词：子宫内膜异位症；胰岛素样生长因子-Ⅰ；气滞血瘀；肾虚血瘀；寒凝血瘀

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.11.012

中图分类号：R711.71文献标志码： A

基金项目:湖北省自然科学基金资助项目(2010CDB09403)。

作者简介:熊婕，女，大学本科，主要从事妇科肿瘤、不孕症等研究。

收稿日期:(责任编辑：张晔2015-03-10)

*通信作者:朱咏梅，电话-13872976198，电子信箱-554993047@qq.com

Relationship of endometriosis syndrome type and insulin-like growth factor -Ⅰ

XIONG Jie,ZHU Yongmei*

(Xiantao Chinese Medicine Hospital,Xiantao 433000,Hubei Province,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship of endometriosis syndrome type and insulin-like growth factor-Ⅰ.MethodsTo select 242 cases as for TCM gynecology gynecology or endometriosis patients and 22 cases of laparoscopic surgery because of infertility or pelvic laparoscopic surgery for benign disease need patients in the control group,using ELISA serum insulin-like growth factor-Ⅰ,immunohistochemical detection of endometrial tissue expression of insulin-like growth factor-Ⅰ.ResultsThe 242 patients with endometriosis in patients with blood stasis type 87 (36.0%),phlegm stasis type 36 cases (14.9%),Hanning Blood type 33 cases (13.6%),hot Yu blood stasis 24 cases (9.9%),43 cases of kidney and blood stasis (17.8%) and 19 cases of Qi and Blood (7.8%).ELISA test results showed no difference in serum QDBS content of IGF-Ⅰ group and the normal control group,the other groups were higher than the normal control group (P<0.05);blood stasis group,Kidney Blood patients serum IGF-Ⅰ were significantly higher than the other groups (P<0.05).Immunohistochemistry showed,IGF-Ⅰ in patients with positive expression of tissue syndrome type relative to the control group with statistical significance (P<0.05，P<0.01);blood stasis type group IGF-Ⅰ expression rate higher than phlegm stasis group,heat and blood stasis group (P<0.05);blood stasis group was higher than the other groups (P<0.05) in the 9-12 score (+++) entry.ConclusionEndometriosis patients with TCM syndrome type of qi and blood stasis,kidney and blood stasis and blood stasis type haemorrheological nature related to the high expression of IGF-1.

Keywords:endometriosis;insulin-like growth factor-Ⅰ;qi-stagnation and blood stasis;renal deficiency and blood stasis;congealing cold and blood stasis

子宫内膜异位症是目前临床较为常见的妇科疾病，其临床主要表现为痛经、不孕，异常内膜增厚，常与妇科恶性病变有关[1]。关于子宫内膜异位症的病因病机的现代研究存在多种争议[2]。目前对于子宫内膜异位症的中医治疗具有一定的优势，但是仍有其局限性，这可能与其中医证型的不同有关[3]。胰岛素样生长因子-Ⅰ与子宫内膜异常增生有关，不同中医证型与胰岛素样生长因子-Ⅰ有着怎样的关系，现将研究结果报告如下。

1研究对象与方法

1.1临床资料选取2012年3月—2014年6月在我院妇科因子宫内膜异位症需行腹腔镜手术的患者242例，其平均年龄为(35.2±4.6)岁(25～39岁)。根据美国生殖医学协会提出的美国生育协会修正分期法对子宫内膜异位症分Ⅰ～Ⅳ期：Ⅰ期49例，Ⅱ期57例，Ⅲ例78例，Ⅳ期58例。患者在手术时切除子宫内膜异位病灶组织留存，术后经病理检测确系为子宫内膜异位症。另选取同期22例因不孕或者盆腔良性疾病需行腹腔镜手术患者为对照组，经病理检测显示患者无子宫内膜病变。所有患者均签订知情同意书，并医院伦理委员同意批准执行。

1.2纳入或排除标准[4]纳入或者排除的标准为：1)患者在接受手术前6个月内无使用激素类药物或者免疫抑制剂；2)年龄在42岁以下，23岁以上；3)患者无其他合并严重疾病，如肝胆疾病、代谢综合征、恶性肿瘤、盆腔结核等。

1.3诊断标准[5]西医的诊断标准主要有患者出现继发性痛经且呈进行性加重、不孕或者出现盆腔慢性疼痛，盆腔检查显示，其与子宫相连处囊性包块或者结节性疼痛，腹腔镜证实上述结果。中医诊断标准则按照《中药新药临床研究指导原则》《中医妇科学》以及《中医妇科病证诊断疗效标准》制定子宫内膜异位症的中医标准及其分型，主要为气滞血瘀型、痰湿瘀阻型、寒凝血瘀型、热郁血瘀型、肾虚血瘀型以及气虚血瘀型。

1.4观察指标

1.4.1样本制备所有患者在进入研究后第二天早上空腹抽取肘静脉血5 mL，静置后以3 000 r/min离心15 min，分离获取血清，分装于EP管中保存在-80 ℃冰箱中待测。

1.4.2血清中胰岛素样生长因子Ⅰ采用ELISA法检测血清中胰岛素样生长因子Ⅰ(美国R&D公司提供),严格按照试剂盒操作进行。

1.4.3免疫组化检测内膜组织胰岛素样生长因子Ⅰ收集的组织标本浸泡于10%甲醛中固定,经不同浓度乙醇梯度脱水，石蜡包埋、切片，采用SP法检测组织中IGF-Ⅰ的表达情况，严格执行说明书操作。其中兔抗IGF-Ⅰ、DAB显色剂以及山羊抗兔二抗均购于北京中杉生物有限公司。用乳腺癌患者阳性切片作为对照，磷酸缓冲盐代替一抗作阴性对照。其结果判定为[6-7]:IGF-Ⅰ阳性染色均出现在细胞浆或者细胞膜中且呈淡黄色至棕褐色。在每张玻片上选择5个视野，观察300个子宫异位内膜上皮细胞，采用半定量判断结果。即：阳性细胞数在5%以内记0分,6%～25%以内记1分，26%～50%以内记2分，51%～75%以内记3分，76%～100%记4分；阳性细胞以显色为准，其中出现淡黄色记1分，黄棕色记2分,棕褐色记3分，两者乘积，0分记为(-)，1～4分记为(+)，5～8分记为(++)，9～12分记为(+++)。

2结果

2.1子宫内膜异位症中医证型分布情况242例子宫内膜异位症患者中气滞血瘀型患者87例(36.0%),痰湿瘀阻型36例(14.9%),寒凝血瘀型33例(13.6%)，热郁血瘀型24例(9.9%),肾虚血瘀型43例(17.8%)以及气虚血瘀型19例(7.8%)。后续检测根据中医证型进行分组。

2.2不同中医证型患者血清中IGF-Ⅰ含量不同证型组患者血清中IGF-Ⅰ含量表达不同，除气虚血瘀组患者血清中IGF-Ⅰ含量与正常对照组无差异外,其他各组均高于正常对照组(P<0.05)；气滞血瘀组、肾虚血瘀组患者血清中IGF-Ⅰ含量明显高于其他组(P<0.05)。见表1。

2.3免疫组化检测内膜组织中IGF-Ⅰ表达免疫组化检测结果显示,不同中医证型患者组织IGF-Ⅰ阳性表达率相对于正常对照组具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)；气滞血瘀型组IGF-Ⅰ阳性表达率高于痰湿瘀阻组、热郁血瘀组(P<0.05)；此外，气滞血瘀组在9～12分(+++)项中表达高于其他各组(P<0.05)。见表2和图1。

表1　不同中医证型患者血清中IGF-Ⅰ含量 ± s)　ng/mL

注：与正常对照组相比较，# P<0.05，## P<0.01；与气滞血瘀组比较，△ P<0.05，△△ P<0.01；与痰湿瘀阻组比较，▲ P<0.05；与寒凝血瘀组比较，* P<0.05;与热郁血瘀组比较，◆ P<0.05；与肾虚血瘀组比较，■■ P<0.01

注：与正常对照组相比较，#P<0.05，##P<0.01；与气滞血瘀组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与痰湿瘀阻组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01;与寒凝血瘀组比较，**P<0.01；与热郁血瘀组比较，◆◆P<0.01；与肾虚血瘀组比较，■■P<0.01

注：A图为正常对照组；B图为气滞血瘀组；C图为痰湿瘀阻组；D图为寒凝血瘀组；E图为热郁血瘀组；F图为肾虚血瘀组；G图为气虚血瘀组 图1　免疫组化检测内膜组织中IGF-Ⅰ表达

3讨论

子宫内膜异位症临床主要表现为继发性痛经进行性加重，腰骶疼痛、不孕以及月经失调等[8]。流行病学研究显示[9]，育龄期是该病发病高峰。目前对于该病的病因病机尚未完全阐明，较为认可的是经血逆流种植学说。这一学说能够解释子宫内膜异位症的临床特点，但却不能解释正常妇女均出现经血逆流现象，而为什么只有少数妇女发生子宫内膜异位症[10]。现代研究也证实痛经与子宫内膜异位症的发生有着密切的关系。《针灸甲乙经》“女子无血、血不血在内不下”，指出了瘀血是导致女性不孕的原因。通过古代文献以及现代研究证实，子宫内膜异位症可能是由于痛经、劳累以及外感伤寒导致内膜异常增生，进而导致不孕、性交痛等恶性循环的产生。

历代医家均有子宫内膜异位症的论述，其中《景岳全书·妇人规经期腹痛十一》[11]中指出子宫内膜异位症的病因病机：“经行腹痛，证有实虚，其虚者或有因血虚，或因气虚；其实者或因血滞，或因气滞。”其他医家对子宫内膜异位症的病因病机的论述也基本认为是“气滞血瘀、气虚血虚、寒凝血滞”。因此本文根据相关文献以及中医对子宫内膜异位症病因病机的论述，将该病分为本文阐述的6种中医证型。研究显示,子宫内膜异位症患者中气滞血瘀、肾虚血瘀型患者居多，且具有统计学意义(P<0.05),这一研究结果与中医所阐述的病因病机基本一致。

胰岛素样生长因子(IGFs)对细胞的生长、分化以及代谢具有显著的调节作用。现代研究[12]显示，IGFs对于子宫内膜异位症患者内膜的异常增生存在复杂的调节作用，目前其异常表达与子宫内膜异位症的发生发展成为研究的热点。IGFs主要包括IGF-Ⅰ、Ⅱ,其中IGF-Ⅰ与子宫内膜细胞的增殖、分化有着更为密切的关系。有研究显示,雌激素能够促进IGF-Ⅰ在子宫内膜中表达,其表达量水平基本可以评估子宫内膜分子水平雌孕激素反应[13-14]。以往研究[15-16]显示,IGF-Ⅰ与子宫内膜异位症发生密切相关，但是不同中医证型与IGF-Ⅰ关系如何鲜为报道。通过本研究显示,子宫内膜异位症患者中气滞血瘀型、肾虚血瘀型以及寒凝血瘀型患者IGF-Ⅰ含量相对于正常对照组以及其他证型组均显示出统计学意义,这一结果提示上述中医证型患者出现的临床症状与IGF-Ⅰ的异常升高有着密切的关系。但是需要指出的是，气虚血瘀型、热郁血瘀型以及痰湿瘀阻型与哪些因素有关值得进一步探讨。免疫组化研究结果显示,异常内膜组织中各组IGF-Ⅰ阳性表达率均高于正常对照组，这一结果显示异常内膜的出现与IGF-Ⅰ的表达仍有一定关系。此外,气滞血瘀型患者组织中IGF-Ⅰ呈阳性强表达，与其他各组相比较，均显示统计学意义(P<0.05,P<0.01)。但为何血清检测不一致有待进一步研究。

总之,子宫内膜异位症患者中医证型中气滞血瘀、肾虚血瘀以及寒凝血瘀型与IGF-Ⅰ的高表达有关。

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