胃炎饮对胃溃疡大鼠血清内皮素-1和一氧化氮含量的影响

胃炎饮对胃溃疡大鼠血清内皮素-1和一氧化氮含量的影响

于文涛邓国兴杨牧祥方朝义王少贤

(河北中医学院基础医学院，河北石家庄050091)

摘要〔〕目的探讨胃炎饮对胃溃疡模型大鼠血清内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量的影响。方法采用冰醋酸腐蚀法建立实验性胃溃疡大鼠模型，以奥美拉唑为对照，观察胃炎饮对实验性胃溃疡大鼠胃粘膜溃疡面积和血清ET-1、NO含量的影响。结果与假手术组相比，模型组的血清ET-1含量明显升高，NO含量明显降低(P<0.01)；与模型组相比，各用药组溃疡面积均明显缩小(P<0.01或P<0.05)，血清ET-1含量明显下降(P<0.01)，胃炎饮高、低剂量组的血清NO含量明显升高(P<0.01或P<0.05)。结论胃炎饮可调节血管舒缩因子，改善胃黏膜循环，从而促进溃疡愈合。

关键词〔〕胃炎饮；实验性胃溃疡；内皮素-1；一氧化氮

中图分类号〔〕R256.33〔文献标识码〕A〔

基金项目：国家中医药管理局全国名老中医传承工作室建设项目〔国中医药人教发(2011)41号〕；河北省中医药管理局科研计划资助项目(No.2011008)

通讯作者：邓国兴(1971-)，男，医学硕士，教授，主要从事消化系统疾病的中医证治研究。

第一作者：于文涛(1971-)，男，医学博士，副教授，硕士生导师，主要从事消化系统疾病的中医证治研究。

胃溃疡是由于胃酸分泌过多、幽门螺杆菌感染和胃黏膜保护作用减弱等多种因素导致胃酸和胃蛋白酶消化自身的胃壁，致使黏膜组织受损的疾病。课题组前期研究表明，该方药治疗多种慢性胃病均取得了理想疗效〔1，2〕。为进一步探讨其治疗胃溃疡的作用机制，本文观察该药对胃溃疡大鼠血清内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量的影响。

1材料与方法

1.1 动物、药物及仪器、试剂选取清洁级雄性Wistar大鼠50只，体重200～220 g，由河北医科大学实验动物中心提供。动物合格证编号：1205094。胃炎饮方：由柴胡、香附、川楝子、元胡、炒白术、茯苓、炙甘草、川连、陈皮、枳壳、姜半夏、姜竹茹等药物组成，使用前水煎分别浓缩成含量为2.14 g生药/ml(高剂量组)和1.07 g生药/ml(低剂量组)的药液。奥美拉唑肠溶胶囊：由哈药集团三精制药诺捷有限责任公司生产，生产批号：1111304，批准文号：国药准字H20064032，规格：每粒20 mg。使用前用蒸馏水配制成浓度为0.368 mg/ml的药液。HM-200电子天平(日本生产)；1-15K高速冷冻离心机：美国Sigma公司；FJ-2021γ-放射免疫计数器：西安二六二厂。ET-1、NO试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2方法

1.2.1 模型建立50只大鼠随机抽取8只作为假手术组，其余参与正式造模。造模参照文献〔3〕。大鼠术前禁食24 h，10%水合氯醛按每3 ml/kg体重腹腔注射麻醉，待大鼠失去意识后，于剑突下腹中线打开腹腔，暴露出胃，在胃前壁近幽门处，用浸有100%冰醋酸、直径为5 mm的圆形滤纸接触2次(注意避开血管)，每次30 s，棉签吸干，生理盐水冲洗，逐层缝合切口，手术过程按无菌操作。假手术组麻醉开腹，暴露胃壁，用生理盐水代替冰醋酸浸湿滤纸接触2次，每次30 s，缝合切口。

1.2.2 分组及给药在造模术后第3天，剔除死亡大鼠，将造模成功存活大鼠随机抽取32只，分为模型组、胃炎饮高剂量组、胃炎饮低剂量组、奥美拉唑组，每组8只。各药物治疗组按体重分别灌胃给药，胃炎饮高剂量组灌服浓度为2.14 g生药/ml的胃炎饮方药液10 ml/kg(相当于21.4 g生药/kg体重)，胃炎饮低剂量组灌服浓度为1.07 g生药/ml胃炎饮方药液10 ml/kg(相当于10.7 g生药/kg体重)，奥美拉唑组灌服浓度为0.368 mg/ml(相当于3.68 mg/kg体重)。各用药组从造模术后第3天开始治疗，假手术组、模型组灌胃等容积的生理盐水，1次/d，治疗天数为14 d。

1.3 检测指标及方法

1.3.1 溃疡面积检测最后1次灌胃给药后禁食24 h，断头处死，无菌操作剖腹取胃，沿胃大弯剪开，冰生理盐水漂洗胃内容物，把胃黏膜展平于平板上，滤纸吸干，肉眼观察胃前壁近幽门的冰醋酸腐蚀处大体形态，用游标卡尺测量溃疡的最大长径和垂直最大宽径，计算溃疡面积和溃疡抑制率。

1.3.2 血清ET-1和NO检测大鼠断头取血3 ml，加入消炎痛EDTA-Na2液0.2 ml，颠倒混匀，3 500 r/min离心5 min提取上清。用于放射免疫法测定血清ET-1的含量，采用硝酸还原酶法测定NO含量。

2结果

2.1 大体形态观察模型组大鼠胃黏膜溃疡处呈圆形或椭圆形凹陷，状若火山口，边缘整齐，溃疡底部覆盖有灰白色炎性渗出物和坏死物，溃疡周围黏膜组织皱襞变粗，部分溃疡组织与周围组织存在粘连。各治疗组大鼠溃疡形态与模型组相似，但面积较小，渗出物和坏死物较少。假手术组大鼠胃黏膜未见异常。

2.2 各组大鼠溃疡面积及溃疡抑制率比较与模型组比较，各用药组溃疡面积均明显缩小(P<0.01或P<0.05)；与奥美拉唑组比较，胃炎饮高剂量组溃疡面积明显缩小(P<0.05)；与胃炎饮低剂量组比较，胃炎饮高剂量组溃疡面积明显缩小(P<0.05)；胃炎饮高剂量组溃疡抑制率为62.7%，高于胃炎饮低剂量组和奥美拉唑组，说明高剂量胃炎饮对溃疡疗效优于低剂量组和奥美拉唑。见表1。

组别大鼠溃疡面积(mm2)溃疡抑制率(%)假手术组--模型组26.8±9.99-胃炎饮高剂量组10.0±4.622)3)62.7胃炎饮低剂量组19.5±6.022)4)27.2奥美拉唑组17.5±6.181)34.7

与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与奥美拉唑组比较：3)P<0.05；与胃炎饮高剂量组比较：4)P<0.05

2.3 各组大鼠血清ET-1、NO含量比较与假手术组相比，模型组的血清ET-1含量明显升高，NO含量明显降低(P<0.01)。而与模型组相比，各给药组的血清ET-1含量明显减少(P<0.01)；胃炎饮高、低剂量组的血清NO含量明显升高(P<0.01，P<0.05)。与奥美拉唑组相比，胃炎饮高剂量组的NO含量有明显升高(P<0.05)。见表2。

组别ET-1(pg/ml)NO(μmol/ml)假手术组64.58±9.102)26.83±4.832)模型组78.57±13.4118.56±3.31胃炎饮高剂量组67.59±17.412)26.23±5.202)3)胃炎饮低剂量组67.73±15.852)23.64±3.691)奥美拉唑组66.91±15.012)22.13±2.18

与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与奥美拉唑组比较：3)P<0.05

3讨论

胃溃疡，按照其临床表现属于中医“胃痛”病症范畴。中医学认为，本病多由于饮食所伤，情志不遂，外邪侵袭，脾胃虚弱等因素所致。胃溃疡的病位在胃，与肝脾等脏腑功能失调密切相关，主要病机为肝郁脾虚，胃失和降，故以疏肝健脾，和胃降逆为主要治法。“胃炎饮”由柴胡、香附、川楝子、元胡、炒白术、茯苓、炙甘草、川连、陈皮、枳壳、姜半夏、姜竹茹等药物组成。方中柴胡疏肝解郁，理气止痛，为君药；香附、川楝子、元胡行气止痛，并增强柴胡疏肝解郁作用，为臣药；炒白术、茯苓、炙甘草健脾益气，扶土抑木，川连善清胃火，兼清肝火，并佐制香附辛烈太过，四药共为佐药；枳壳、陈皮理气和中，姜竹茹、姜半夏和胃降逆，四药共为使药。诸药合用，共奏疏肝健脾，和胃降逆等功效。

ET-1是一种具有强烈、持久的缩血管和促血管平滑肌增殖的作用的活性多肽。ET-1的缩血管作用可导致胃黏膜血流量下降，具有强烈的致溃疡性〔4〕。该作用可被血管内皮分泌的舒血管小分子活性物质NO拮抗。NO舒血管作用与ET的缩血管作用构成了胃肠黏膜局部血流动力学重要的平衡机制。临床研究表明，老年活动性胃溃疡患者血清NO水平明显低于健康体检者，提示在溃疡的形成和愈合过程中存在NO的黏膜保护作用不足〔5〕。刘俊平等〔6〕报道，胃溃疡患者血清ET-1水平高于无溃疡患者，运用星状神经节阻滞技术能使胃溃疡患者的ET-1降低，使其血清水平接近无消化溃疡者，同时胃溃疡的临床治愈率、总有效率显著增加，说明ET-1水平异常升高在胃溃疡的形成和复发机制中占据重要作用。

本研究表明血管舒缩因子ET-1和NO的失衡参与了胃溃疡的形成；与模型组比较，胃炎饮高、低剂量组均能升高NO含量，降低血清ET-1含量，说明该药可调节血管舒缩因子，改善胃黏膜循环，从而促进溃疡愈合。

4参考文献

1杨牧祥，于文涛，王秉岳，等.胃炎饮治疗胆汁反流性胃炎116例临床疗效观察〔J〕.中国现代药物应用，2009;3(15)：73-4.

2田元祥.杨牧祥教授对胃脘痛的认识及诊治经验〔J〕.河北中医，2007;29(4)：293-6.

3鄢顺琴. 胃痛灵保护胃黏膜作用及对胃溃疡愈合质量的影响〔J〕.中国中西医结合杂志，1998；15(10)：612-4.

4冯好彬.中医药对胃黏膜细胞因子调节作用的研究进展〔J〕.白求恩军医学院学报，2009;7(3):175-6.

5尹会格，孟惠茹，黄一茜，等.大黄对老年胃溃疡患者血清一氧化氮的影响〔J〕.中国药业，2012;21(8)：27-8.

6刘俊平，王岩英，郭青梅，等.星状神经节阻滞对胃溃疡患者血浆ET-1、CGRP水平的影响〔J〕.山东医药，2009;49(40)：77-9.

〔2013-09-03修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)