CIK细胞结合复方苦参注射液治疗中晚期肾脏肿瘤

CIK细胞结合复方苦参注射液治疗中晚期肾脏肿瘤

赵俊峰李保东1张林超2陈瑞庭崔洪泉罗宏伟3

(河南省中医院河南中医学院第二附属医院泌尿外科，河南郑州450002)

摘要〔〕目的探讨杀伤细胞(CIK)细胞结合复方苦参注射液对中晚期肾脏肿瘤患者的治疗效果。方法随机将98例中晚期肾脏肿瘤患者分成对照组(CIK治疗组35例、复方苦参注射液治疗组33例)和实验组(CIK+复方苦参注射液治疗组30例)，分别观察不同分组患者治疗前后生存质量及瘤体变化并计算有效率。结果治疗前后各组生存质量及瘤体变化均有统计学差异(P<0.05)；实验组生存质量及瘤体变化与两个对照组均有统计学差异(P<0.05)。实验组的有效率明显高于其他两组，在改善生存质量及缩小瘤体方面CIK组、复方苦参注射液组都有一定效果，但实验组优于复方苦参注射液组和CIK组。结论CIK细胞结合复方苦参注射液治疗中晚期肾脏肿瘤效果较好。

关键词〔〕CIK细胞；肿瘤；肾脏；复方苦参注射液

中图分类号〔〕R737.11〔文献标识码〕A〔

基金项目：郑州市科技攻关项目 (No.10PTGS486-9)

通讯作者：罗宏伟(1966-),男,主任医师,主要从事肿瘤的基础及临床研究。

1河南省肿瘤医院2郑州市中心医院3郑州市中医院

第一作者：赵俊峰(1966-)，男，主任医师，主要从事肾脏肿瘤的RNA干扰以及临床方面的研究。

手术是肾癌唯一具有肯定疗效的手段，中晚期肾癌因此丧失手术机会，造成中晚期肾脏肿瘤的治疗效果较差，生存期短。目前主要通过增强机体免疫提高患者生存率，但是总体有效率不尽人意，其中细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)过继治疗可能成为目前此类肾脏肿瘤免疫治疗中最有效的方法之一，而中药复方苦参注射液疗法可能通过改善造血功能、增加机体免疫力抑制肿瘤细胞扩散，有效地抑制肿瘤进展。本文采用CIK细胞过继治疗以及复方苦参注射液治疗中、晚期肾脏肿瘤患者，观察临床疗效。

1对象与方法

1.1研究对象中、晚期肾脏肿瘤患者98例，男65例，女33例，年龄30～75〔平均(54±13.4)〕岁，随机分为CIK治疗组、复方苦参注射液治疗组、CIK+复方苦参注射液治疗组(联合组)。肾透明细胞癌64例，乳头状肾细胞癌21例，嫌色细胞癌11例，集合管癌2例，均为中、晚期患者(TNM分期法)：Ⅲ期61 例，Ⅳ期37 例。预计生存期>3个月，治疗前行心电图、彩超、CT、磁共振成像(MRI)及生化、肿瘤标志物等检查，重要脏器(心、肝、肺、肾)功能正常，采血前2 w及治疗期间未同时行放化疗并常规化验血常规、免疫球蛋白以及外周血淋巴细胞等，所有自愿接受该治疗者，同时签署《患者知情同意书》。禁忌用于对生物制品敏感者。

1.2方法

1.2.1外周血细胞分离及CIK细胞的制备治疗当日晨在患者空腹状态下抽取自体外周血50 ml，采用1∶1或1∶2淋巴细胞分离将人外周抗凝血的淋巴细胞分离，吸取单个核细胞层，磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3遍，用含10%人AB血清的RPMI1640培养液，调细胞浓度为1.0×106/ml∶第1天加入干扰素(IFN)-γ 1 000 U/ml，24 h后加入白细胞介素(IL)-1α 100 U/ml、IL-2 500 U/ml、CD3单抗50 ng/ml，此后每隔3 d换液1次，并补加IL-2及CD3单抗。第7天取样显微镜下计数，测定增殖速率。第10～13天细菌、霉菌培养阴性收获细胞，用生理盐水洗涤3次后混悬于250 ml生理盐水中制成CIK混悬液备用。

1.2.2CIK细胞输注依照卫生部“人体细胞治疗临床研究质控要点”和中国免疫学会制定的“过继性免疫治疗癌症规范”，CIK细胞混悬液均为新鲜配制，每位患者治疗4个疗程，每个疗程需要输注新鲜配制的CIK细胞4次(1～2次/w)，输注新鲜配制的CIK细胞数不低于(1.6～6.5)×109次，间隔28 d。

1.3评定指标治疗结束1个月后按照国际抗癌联盟(UICC)和世界卫生组织制定的实体瘤客观疗效评定标准进行评价：完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、轻度缓解(MR)、稳定(SD)和进展(PD)，CR+PR+MR为有效，而且评价的临床疗效各项指标持续4 w以上。不良反应评价：按世界卫生组织(2005年)抗癌药物毒性分类标准：0-N度进行评估。疾病控制率(有效率)=〔(CR+PR+ MR)/治疗总人数〕×100%。所有患者均通过CT测量肿瘤大小的变化。生活质量采取Karnofsky百分法，包括患者的一般情况和不良反应，一般情况观察患者食欲、体力、睡眠、疼痛、体重的变化；不良反应观察患者治疗过程中畏寒、发热、皮疹、脉搏、呼吸困难等的发生情况。

1.4统计学方法应用SPSS18.0软件行和χ2检验、t检验。

2结果

2.1治疗效果联合组、CIK组、复方苦参注射液组的治疗有效率分别是63.33%、51.43%、48.48%，联合组显著高于其他两组(均P<0.05)，其中CR 2 vs 1 vs 1例，PR 8 vs 7 vs 6例，MR 9 vs 10 vs 9例，SD 8 vs 12 vs 11例，PD 3 vs 5 vs 6例。三组治疗效果及治疗前后生存质量、瘤体变化见表1。

组别n生存质量治疗前治疗后瘤体长(cm)治疗前治疗后瘤体宽(cm)治疗前治疗后联合组3070.80±3.7791.58±4.466.51±3.254.42±1.824.97±1.853.09±1.44CIK组3569.98±3.4582.82±5.911)6.86±1.584.56±2.031)4.56±1.763.72±1.261)复方苦参注射液组3370.96±3.1481.93±6.011)2)6.44±3.044.70±1.991)2)4.35±0.993.40±1.211)2)

与联合组比较：1)P<0.05；与CIK组比较：2)P<0.05

2.2不良反应联合组与CIK组中8例(12.31%)出现畏寒、发热，经简单处理后均在1 d内自行缓解，其中6例发生在输注的6 h以内，2例为输注当天但是超过6 h；出现皮疹2例，未予特殊处理，其余均无明显不良反应。

3讨论

肾肿瘤是泌尿系最常见的恶性肿瘤，2013年美国统计新发肾肿瘤占所有新发实体肿瘤的3%〔1〕。由于起病隐袭，死亡率高〔2〕，所以有大约20%的患者在初次就诊时有转移，而肾癌根治术的患者将有50%出现远处转移〔3〕。因此肾癌患者中有30%～50%最终将发展成为转移性肾癌〔4〕，肾癌一旦出现转移，5年生存率不到10%，平均存活时间<2年。由于肾癌对放化疗均不敏感，手术后需要进一步治疗或者出现进展的患者往往需要继续进行其他治疗(免疫治疗)，可是免疫治疗肾癌总的有效率不超过25%〔5〕。因此近年很多学者开始关注中药治疗肿瘤的可行性，其中复方苦参注射液已经应用于临床，但关于肾癌的报道还很少〔6〕，而实验研究也不多〔7〕。目前研究显示它能抑制肿瘤细胞生长或诱导其凋亡，增强机体抵抗力，防止转移，达到控制或治愈肿瘤的目的。另外在此之前有学者利用自体CIK细胞过继性免疫治疗肿瘤取得一定效果〔8〕，它通过体外扩增激活自体免疫效应细胞，然后再输注给患者，以杀伤患者体内肿瘤细胞，由于CIK细胞具有增殖能力强、杀瘤活性高、杀瘤谱广等特点，尤其对细胞免疫功能低下的患者效果更好。

本研究提示细胞治疗将是中晚期肾脏肿瘤患者的一种重要辅助治疗手段，它通过帮助促进患者免疫系统的修复、微小病灶的清除从而改善患者的生活质量。由于CIK细胞其具有较强的增殖能力和细胞毒性且杀瘤谱广已在临床上显示出良好的应用效果〔8〕，而且CIK细胞抗肿瘤作用主要是CD3+CD56+细胞和CD8+细胞的直接杀伤作用，这种杀伤作用不受组织相容性复合体(MHC)限制，因此它可以用来治疗众多的肿瘤患者，同时CIK细胞自身还能分泌IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等细胞因子〔9〕，提高细胞毒性，这就大大增加了其抗肿瘤活性。

复方苦参注射液是一种纯中药复方抗肿瘤制剂，由苦参和土茯苓两味中药经现代工艺提取而成，具有止血、止痛、抑制肿瘤细胞扩散，同时还可改善造血功能、增加机体免疫力、保护肝功能等作用，对正常细胞无抑制作用。现代药理实验证明，苦参中含有的苦参碱可抑制端粒酶活性，阻止肿瘤细胞进入S期，抑制DNA复制，抑制肿瘤细胞增殖能力，抑制肿瘤细胞与内皮细胞的黏附，阻止肿瘤的转移，抑制肿瘤新生血管生成，对肿瘤细胞有直接杀伤作用，能诱导肿瘤细胞分化和促进肿瘤细胞凋亡，苦参碱也是一种免疫调节剂，能提高肝微粒体细胞色素P450含量，增加乙基吗啡N-脱甲基酶，为细胞色素P450的诱导剂，减少肿瘤患者在化疗中所引起的白细胞减少〔10〕。

4参考文献

1Siegel R，Ma J，Zou Z，etal.Cancer statistics，2014〔J〕.CA Cancer J Clin，2014；64(1):9-29.

2Mulders P，Figlin R，de Kernion JB，etal.Renal cell carcinoma: recent progress and future directions〔J〕.Cancer Res，1997；57(22):5189-95.

3Janzen NK，Kim HL，Figlin RA，etal.Surveillance after radical or partial nephrectomy for localized renal cell carcinoma and management of recurrent disease〔J〕.Urol Clin North Am，2003；30(4):843-52.

4Ljungberg B，Hanbury DC，Kuczyk MA，etal.Guidelines on renal cell carcinoma〔J〕.Eur Assoc Urol，2008;58(1):10-2.

5Lam JS，Shvarts O，Leppert JT，etal.Renal cell carcinoma 2005:new frontiers in staging，prognostication and targeted molecular therapy〔J〕.J Urol，2005；173(6):1853-62.

6张湘平.复方苦参注射液加直线加速器放疗中、重度癌痛68 例临床观察〔J〕.山西中医，2009；25(S1):45-6.

7种铁，牛建强，王子明，等.苦参碱抑制人肾癌细胞系GRC-1细胞株增殖和促凋亡的实验研究〔J〕.中西医结合学报，2006；4(4):388-91.

8Schmidt-Wolf GD，Negrin RS，Schmidt-Wolf IG.Activated T cells and cytokine-induced CD3+ CD56+ killer cells〔J〕.Ann Hematol，1997；74(2):51-6.

9Yu YY，Si CW，Tian XL，etal.Effect of cytokines on liver necrosis〔J〕.World J Gastroenterol，1998；4(4):311-3.

10刘鲁明，杨宇飞.肿瘤科中西药物手册〔M〕.北京:人民卫生出版社，2003:208-9.

〔2013-12-06修回〕

(编辑袁左鸣)