天冰调督胶囊对激怒应激模型大鼠食欲口味、情感行为的影响

天冰调督胶囊对激怒应激模型大鼠食欲口味、情感行为的影响

丁梅裴林1李胡广1马学伟1马宗敏1苗文丽1

(唐山市第九医院，河北唐山063000)

摘要〔〕目的观察天冰调督胶囊对激怒应激模型大鼠食欲口味、情感行为的影响。方法60只Wistar雄性大鼠随机分6组，除正常组外，其余5组采用长海绵钳夹尾、捆绑及捆绑后合笼的综合方法制造大鼠肝胃不和证模型，连续造模14 d。自造模第7天起药物干预治疗，并测量大鼠食量，两瓶法测摄入液体总量。治疗第7天开始矿场实验和拒俘行为观察，抬高迷宫试实验和Y迷宫测试。结果与模型组相比，各治疗组食量上升、饮水量增多；各治疗组旷场活动性积分下降，拒俘反应积分明显改善；开放臂中逃避时间减少；Y迷宫实验各治疗组选择错误数明显减少。结论天冰调督胶囊能改善大鼠焦虑抑郁状态。

关键词〔〕天冰调督胶囊；激怒应激；肝胃不和；情感行为

中图分类号〔〕R285.5〔

基金项目：国家中医药管理局科研

通讯作者：裴林(1961-)，男，主任医师，硕士生导师，主要从事神经精神疾病研究。

1河北省中医药研究院

第一作者：丁梅(1963-)，女，副主任医师，主要从事临床药学研究。

随着社会的发展，人们生活节奏的加快，压力加大，精神情绪应激引起的疾病逐年增多，天冰调督胶囊对精神情绪应激引起的疾病具有很好的疗效，本研究探讨其可能的作用机制。

1材料与方法

1.1实验动物清洁级雄性Wistar大鼠60只，购于河北医科大学动物中心(合格证编号：2006140)，起始体重(200±20) g，适应性喂养1 w，分为6笼，每笼10只。实验前自由饮食进水，温度控制在22℃～25 ℃，12 h光照/黑暗条件。

1.2药物天冰调督胶囊组成为柴胡、桂枝、天麻、全蝎、黄连、绞股蓝等。批准文号为冀药制字Z20050746，按照国家标准〔1〕配制。柴胡疏肝散各药饮片由河北省中医药研究院饮片厂提供。黛力新：丹麦灵北医药公司(国药准字H20020474)，规格：糖衣片，含0.5 mg氟哌噻吨以及10 mg美利曲辛。各药临用时用10%阿拉伯胶配成悬浊液，灌胃时温服。

1.3实验仪器交替电刺激Y迷宫(北京硕林苑科技有限公司)。矿场行为观察箱：按文献方法〔2，3〕自制，为无顶木盒规格为60 cm×60 cm×60 cm，箱底用墨线分成36个等份小方格。抬高迷宫〔4〕：由两个开放臂和两个环绕臂相互垂直组成，环绕臂由15 cm高涂黑的臂环绕，每臂宽15 cm，长50 cm，黑色橡胶覆盖在仪器底部，此迷宫抬高距离地面70 cm。

1.4实验方法

1.4.1造模方法60只Wistar雄性大鼠随机分6组，即正常组、模型组、黛力新组、天冰调督低量组、天冰调督高量组。除正常组外，其他各组大鼠参考并综合有关激怒刺激法〔5〕：①长海绵钳夹大鼠尾远端1/3处，令其暴怒，每次30 s刺激，隔3 h刺激1次，2次/d。为避免炎症，控制感染，用0.5%强力碘涂擦受伤部位。②捆绑：将鼠两前肢及后肢分别捆绑放置，每鼠每次30 min，1次/d；③捆绑松解后合笼，大鼠寻机与其他大鼠厮打，以激怒其他大鼠，30 min后取出，单笼饲养观察，连续造模14 d。

1.4.2给药方法于造模第7天开始， 正常组和模型组给予蒸馏水灌胃(10 ml/kg)，柴胡疏肝组给以(0.6 g/kg)浓缩液，黛力新组用(5 mg/ml)混悬液,天冰调督低量组、高剂量组用0.4、0.8 g/kg混悬液。1次/d，持续至第14天。常规喂养，自由进食饮水。

1.4.3大鼠进食量的测定每日上午9:00各组发放一定量鼠食，次日同时称量剩余鼠食，计算平均值。

1.4.4矿场实验观察和抬高迷宫实验矿场实验：将各组大鼠置于观察箱中央小方格内，记录30 s内各组大鼠的行为活动情况，并按文献方法〔6〕记分，以此来了解其情感行为改变。抬高迷宫实验：大鼠放于开放臂末端，面朝环绕臂方向，利用大鼠怕高而开阔地特性，会主动向环绕臂移动。观察并记录各组大鼠5 min内大鼠四足离开开放臂的时间及进入的次数，作为大鼠情感行为变化指标。

1.4.5交替电刺激Y迷宫试验以Ⅰ臂为目标臂，Ⅱ臂为错误臂，Ⅲ臂为起始臂，按此交替顺序进行30次尝试，每次间隔均为30 s。第1天为学习训练阶段，第2天为记忆保持阶段，记忆保持阶段操作与第1天相同，试验规定大鼠受电击后从起始臂直接逃至安全臂(红灯亮)为“正确反应”，先进入通电臂则为“错误反应”，并记录为1次错误，以动物选择错误次数作为评价大鼠学习与记忆能力指标，通过左右交替电刺激检测大鼠学习记忆能力。

1.5统计学方法采用SPSS13.0进行单因素方差分析。

2结果

2.1大鼠进食量和液体摄入量造模期间正常组进食量和液体摄入量比较稳定，各模型组进食量和液体摄入量均明显下降；经治疗后第7天，各治疗组进食量和液体摄入量均明显改善与模型组相比差异显著(P<0.05)。见表1。

2.2旷场试验和拒俘反应治疗7 d后各实验组与正常组相比，在矿场活动性和拒俘反应性均有显著差异(P<0.01)；各治疗组与模型组相比，旷场活动性积分明显改善(P<0.05或P<0.01)，且以黛力新组和天冰调督高量组改善尤为明显(P<0.01)；拒俘反应性积分柴胡疏肝散组和天冰调督高量组与模型组相比明显改善(P<0.05)。见表2。

2.3抬高迷宫实验治疗7 d后各实验组与正常组相比，均有显著差异(P<0.01)；各治疗组与模型组相比，开放臂中逃避时间和进入开放臂次数均明显改善，且以天冰调督高剂量组改善尤为明显(P<0.05或P<0.01)。见表3。

2.4Y迷宫实验治疗结束后进行Y迷宫实验，正常组与模型组相比，在第1天和第2天选择错误数均有显著差异(P<0.01)；各治疗组选择错误数比模型组有所减少，且以天冰调督高剂量组改善尤为明显(P<0.05)。见表4。

表1　各组大鼠进食量和液体摄入量比较 ± s, n=10)

与模型组比较：1)P<0.05

表2　各组大鼠旷场活动性和拒俘反应性比较 ± s, n=10)

与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01，下表同

表3　各组大鼠抬高迷宫实验比较

表4　各组大鼠Y迷宫实验比较

3讨论

应激致肝胃不和证的造模方法有夹尾激怒法、捆绑激怒法、颈部带枷单笼饲养法和药物注射法等〔5，7〕。采用综合激怒刺激法制造肝胃不和证的理论基础源于中医“怒则伤肝”的理论，郁怒伤肝，肝木横逆克脾犯胃，导致肝胃不和证。实验证明〔8，9〕，这种造模方法较好的人类肝胃不和证状态。

交替电刺激Y迷宫通过用不同程度的电击刺激大鼠足底，建立逃避性条件反射，使大鼠学会左右交替的工作记忆模式，从而测定其学习记忆并对完成空间记忆敏感。通过矿场活动性、拒俘反应性指标比较大鼠面对新环境的刺激，其活动水平、探索能力及焦虑状况。抬高迷宫也是利用开场和增高的区域刺激大鼠恐惧和焦虑，使动物出现防护性情感反应。矿场试验与抬高迷宫试验在量化与分析动物恐惧、焦虑等方面已得到专家认同〔10〕，并且在以往多的实验中得到了验证〔3，11，12〕。

本结果表明，夹尾刺激模型大鼠具有典型焦虑、恐惧防护性情感反应，应用不同剂量调督化浊方药干预可改善大鼠的焦虑、恐惧状态，改善活动能力与警觉水平，结合中医理论中有肝主疏泄，调畅情志，肝失疏泄，则出现焦虑、抑郁等情志异常，表明该方药可能在一定程度上改善应激模型大鼠的情感行为异常，对治疗情感行为障碍具有积极作用。

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〔2012-12-10修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)