鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育作用研究

向秋玲 蒋锐 姜海斌

鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育作用研究

向秋玲 蒋锐 姜海斌

目的 研究鹿藿水提取物的抗雄性小鼠生育作用的影响。方法雄性小鼠分为4组，给药，然后与雌鼠合笼交配，观察雌鼠给药70 d、停药20 d妊娠率。结果 用药70 d作用较明显。停药20 d，与阴性对照组结果非常接近。结论 鹿藿水提取物具有良好的抗生育作用，停药后不影响后续生育能力。

鹿藿水提取物；抗生育作用；附睾；精子

鹿藿（Rhynchosia Volubilis Lour）是我国避孕经验方中的一味主药。王建刚等[1]用鹿藿根4种提取物对大鼠灌胃进行实验，发现对雄性大鼠有抗生育及抗菌作用。本实验深入研究鹿藿根水提取物的抗生育作用，为将其开发为新型外用避孕药提供实验依据。

1 材料

1.1 药品与试剂

鹿藿根（购于湖南怀化，由吉首大学陈功锡教授鉴定）；醋酸棉酚（北京中棉紫光生物技术有限责任公司，批号061116）。

1.2 动物

成年雌、雄性小鼠（湖南斯莱克景达实验动物有限司提供，动物许可证号：SCXK（湘）2013-0004，动物合格证号：NO43004700006140）。

2 方法

2.1 提取及实验用药的配制

干燥鹿藿根10 kg，粉碎，加入30 L纯净水，60℃浸泡24 h，提取2次，过滤，减压蒸馏浓缩，制得鹿藿水提取物浸膏，保存备用，实验时用生理盐水稀释成4%的溶液。

2.2 抗生育实验

70 d雄性小鼠80只，体重（28.2±1.4）g左右，分为4组：阴性对照组（生理盐水），阳性对照组给予醋酸棉酚450 mg/（kg·d），鹿藿水提取物低、高剂量的水浸膏150，450 mg/（kg·d）组，每组20只，给药组每次0.01 ml/g，灌胃，阴性对照组给予相同剂量的生理盐水灌胃，每天1次，连续给药70 d。

2.3 妊娠率和妊娠抑制率

雄鼠给药20 d后与雌性小鼠1：1合笼，合笼期间继续给雄鼠灌药，以雌鼠阴道涂片检查出精子为妊娠第1天，70 d后分笼，解剖雌鼠，计算妊娠率、平均活胎数、死胎数和着床点数。根据以上方法，记录给药70 d、停药10 d时实验结果。

2.4 统计学方法

所得数据使用SPSS15.0统计学软件进行分析，计量数据采用（均数±标准差）±s）表示，采用t检验，计数资料采用%表示，采用χ2检验，P＜0.05，差异具有统计学意义。

3 结果

3.1 用药后对雌鼠妊娠抑制的结果

用药70 d后，药物组抑制妊娠效果较用药20 d时降低，但仍很明显，尤其是高剂量组。见表1。

3.2 停药后对雌鼠妊娠抑制的结果

停药20 d后，妊娠率与生理盐水组接近，尤其是低剂量组，与生理盐水组比较，P＞0.05，差异不具有统计学意义。见表2。

4 讨论

精子的发生主要包括精原细胞的增殖分化，精母细胞的减数分裂和精子细胞的发育过程。而精子的成熟则依赖于附睾微环境[2]，抗生育药物可作用于以上任一环节。从上述结果可看出，连续用药后，鹿藿水提取物即能抑制妊娠率，尤其是连续用药20 d后，雌鼠妊娠率降低，说明鹿藿水提取物对雄性小鼠具有抗生育作用[3]。用药后小鼠生育率降低，精子总数减少，可以推测鹿藿跟水提取物能够抑制睾丸精子的产生。从实验结果又可以看出用药后精子活动受到影响，说明鹿藿抗雄性小鼠生育在也附睾部位，影响了精子的成熟。研究发现[4]，β-甲基2，4-二甲氧基-吡喃岩藻糖苷可能在附睾即与岩藻糖苷转移酶或岩藻糖苷酶结合，继而干扰在雌鼠体内的精卵结合。同时不排除鹿藿其他成分的作用或多种成分共同作用[5]。对用药后睾丸及附睾组织进行观察，发现鹿藿水提取物对睾丸及附睾仅有轻微影响，且从停药后的各项数据可知，鹿藿抗生育作用维持时间短，易恢复。因此，停药后不会影响雄性小鼠的生育能力。

综上所述，鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育能力强，毒性小，对睾丸影响很弱，不会影响生育能力，是安全有效的抗雄性生育能力的药物，且试验证明鹿藿提取物对生殖道常见致病微生物也有较好的抑制作用[6]。对于鹿藿抗生育作用的深人研究及化学成分的进一步分析，有可能发现比较理想的男性避孕药。

表1 用药70 d对小鼠妊娠的影响

表2 停药20 d对小鼠妊娠的影响

[1]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2003：1572-1573.

[2]唐运革，唐立新，王奇玲，等.广东地区男性精液质量的流行病学调查[J].广东医学，2014（9）：1402-1404.

[3]黄世兴，孟天庆，王骁，等.鹿藿正丁醇提取物体外杀精作用及机制探讨[J].中国计划生育和妇产科，2013，5（2）：35.

[4]胡廉，熊承良.中药鹿藿的抑菌实验研究[J].天然产物研究与开发，2006，18（3）：435.

[5]王建刚，熊承良，王学廷,等.鹿藿醇提取物的体外杀精及抗菌作用[J].时珍国医国药，2007，18（10）：2388.

[6]伏晓敏，励千里，金爱华.氯已定醋酸盐的体外杀精效果及抑菌作用的研究[J].中国现代应用药学杂志，2003，20（2）：97-99.

The Study of Rhynchosia Volubilis Water Extract Anti-male Mice Fertility

XIANG Qiuling JIANG Rui JIANG Haibin Changde Vocational Technical College Medicine Department，Changde 415000，China

Objective To study the anti-fertility effects of rhynchosia volubilis water extract anti-male fertility in mice.Methods Anti-fertility experiment，mice male were administered continuously，then mated with females，females pregnancy rate was observed.Results Continuously medicate rhynchosia volubilis water extract for 70 days，the effect was still evident.drug withdrawal for 20 days，the results are very close to the negative control group.Conclusion Rhynchosia volubilis water has a good anti-fertility effect，after the drug withdrawal，it does not affect subsequent fertility.

Rhynchosia volubilis water extract，Anti-fertility effect，Epididymis，Sperm

R364.7

B

1674-9308（2015）29-0031-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.29.022

415000常德职业技术学院医学系

湖南省普通高等学校科学研究项目（No：11C0164）