Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大肠癌肝转移模型中表达及意义

卢喜 郑军霞 刘晓梅 张瑾熔

Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大肠癌肝转移模型中表达及意义

卢喜1郑军霞2刘晓梅1张瑾熔1

目的 研究Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大肠癌肝转移模型中的表达及意义。方法 采用近交系BALB/C小鼠脾内种植法建立大肠癌肝转移模型，用免疫组化方法检测肝转移瘤及血清中IL-17、Treg细胞和Th 17细胞的分布，比较其在肝转移初期和晚期的差别。结果 晚期结肠癌肝转移瘤组织中Th 17低于早期肝转移瘤，P＜0.05，差异具有统计学意义，而IL-17、Treg细胞在晚期肝转移瘤组织中高于早期，P＜0.05，差异具有统计学意义。结论 IL-17、Th 17/Treg细胞在大肠癌肝转移瘤中的表达，可能对评估病情进展有一定意义。且早期肝转移瘤中Th 17细胞增高，并具有抗肿瘤活性，这可能是大肠癌免疫治疗的新策略。

Th 17；Treg；大肠癌；肝转移

大肠癌是常见的消化道肿瘤之一，肝转移为主要死因。IL-17、Treg细胞和Th 17细胞作为新发现的具有独立调节机制的免疫细胞，其在转移瘤中的表达及意义在国内未见报道。通过建立BALB/C小鼠结肠癌肝转移模型，比较大肠癌肝转移瘤组织中IL-17、Treg细胞和Th 17细胞的表达，为大肠癌肝转移的发生发展提供更多的研究证据。

1 材料与方法

1.1 材料

将80只采用脾内种植法制备近交系BALB/C小鼠脾内种植小鼠结肠癌细胞株的大肠癌肝转移模型小鼠随机分为两组，另取20只健康BALB/C小鼠为空白组，第1组于第16天处死，第2组及空白组于第23天处死。所有小鼠均于处死后取转移瘤及血清标本，用免疫组化方法检测与肝转移癌IL-17、Treg细胞和Th 17细胞的表达。

1.2 统计学方法

2 结果

2.1 两组小鼠外周血中Th 17、Treg及Treg/Th 17的细胞水平

出现肝转移小鼠血清中Treg细胞、及Treg/Th 17的水平高于对照组，P＜0.05，差异具有统计学意义，Th 17细胞水平低于对照组，P＜0.05，差异具有统计学意义。Th l7 阳性细胞数在小鼠外周血中低空白组，且在23天组中的表达低于16天组。见表1。

2.2 两组肝转移瘤中Th 17细胞、IL-17、Treg细胞水平与对照组比较

IL-17、Treg细胞水平在小鼠大肠癌肝转移肿瘤组织中高于空白组，P＜0.05，差异具有统计学意义，且与肝转移瘤进展呈正相关。Th 17细胞水平在肝转移瘤组的表达低于空白组。

3 讨论

免疫微环境与肿瘤的关系密切，机体依赖体内T细胞对抗肿瘤细胞。Th l7细胞是一种新发现的辅助性T细胞亚群，分化发育机制独特，可分泌相关细胞因子IL-17、IL-21等。在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用。Kryczek 等[1]发现Th l7细胞具有抗肿瘤效应，而与肿瘤浸润的Treg细胞负相关。Chen等[2]发现IL-17存在于肺癌组织中，在晚期患者组织中的表达更高。研究发现[3]IL-17主要起到促进肿瘤生长作用。本次研究结果表明，Th l7细胞在结肠癌肝转移微环境中的聚集发生在肿瘤的早期阶段，随着病程进展，Th l7细胞的聚集程度逐步降低；IL-17的细胞水平与肝转移瘤进展呈正相关。Treg细胞在人类肿瘤微环境中数量增多，发挥着一定的促进肿瘤生长的作用。小鼠实验模型中发现Treg细胞可抑制肿瘤浸润的淋巴结及外周血效应T细胞群的免疫应答。通过抗体抑制Treg细胞的表面分子来抑制Treg的功能或数目能够增强机体抗肿瘤活性,进一步证明了Treg在肿瘤免疫系统中的负向调节作用。可考虑从免疫治疗的角度控制肿瘤的进展，负向调节Treg细胞是非常重要的治疗靶点。

表1 第1组及第2组小鼠外周血中Th 17、Treg及Treg/Th 17的细胞水平

表2 第1、2组肝转移瘤中Th 17细胞、IL-17、Treg细胞水平与对照组比较

总之，本研究通过免疫组织化学方法证实了Treg细胞、IL-17在大肠癌肝转移瘤中表达增加，且与肝转移瘤进展呈正相关，这可能对评估病情进展有一定意义。且早期肝转移瘤中Th 17细胞增高，并具有抗肿瘤活性，这可能是大肠癌免疫治疗的新策略。

[1]Kryczek I，Banerjee M，Cheng P，et al.Phenotype distribution，generation and functional and clinical relevance of Thl7cells in the human tumor environments[J].Blood，2009，114（6）：1141-1149.

[2]Chen X，Wan J，Liu J，et al.Increased IL-17-producing cells correlate with poor survival and lymphangiogenesis in NSCLC patients[J].Lung Cancer，2010，69（3）：348-354.

[3]魏文，李娟娟，孙圣荣，等.乳腺癌小鼠动物模型中白细胞介素-17的表达及其意义[J].中华实验外科杂志，2011，28（5）：673-675.

The Expression and Significance of Th 17/Treg and IL-17 in Model of Liver Metastasis of Colorectal Cancer in BALB/C Mice

LU Xi1ZHENG Junxia2LIU Xiaomei1ZHANG Jinrong11 The Affiliated Tumor Hospital Department of Radiotherapy of Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China.2 The Affiliated Tumor Hospital The First District of Palliative Treatment Department of Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China

Objective To study the Th 17/Tregm and IL-17 expression and significance in inbred BALB/C mice with colorectal cancer liver metastasis model.Methods The method of planting inbred strains of cancer cells within the BALB/C mouse spleen established colorectal liver metastases model using immunohistochemical method to detect the distribution of IL-17，Treg cell and Th 17 cells in colorectal liver metastases and normal liver tissue，compared the difference in the early and late liver metastasis.Results Th 17 in advanced colorectal cancer liver metastases tissue was significantly lower than early liver metastases，P＜0.05，had difference statistically significance.IL-17 and Treg in advanced colorectal cancer liver metastases tissue was significantly higher than liver metastases，P＜0.05，had difference statistically significance.Conclusion The expression of IL-17 and Th 17/Treg cells in the liver metastasis of colorectal carcinoma may have some significance meaning.Th 17 was increased in the early stage of liver metastasis，and it has anti-tumor activity，which may be a new strategy for the treatment of colorectal cancer.

Th 17，Treg，Colorectal Cancer，Liver metastasis

R735.3+4

B

1674-9308（2015）29-0030-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.29.021

1830054乌鲁木齐，新疆医科大学附属肿瘤医院胸腹放疗科；2830054乌鲁木齐，新疆医科大学附属肿瘤医院姑息治疗一病区

新疆医科大学科研创新基金项目（项目编号：XJC2013101）

张瑾熔，E-mail：16428614@qq.com