APP下载

盐酸阿霉素及其制剂的荧光分析

2015-12-24李妮妮南叶飞张洵立唐璇

应用化工 2015年1期
关键词:阿霉素蒸馏水容量瓶

李妮妮,南叶飞,张洵立,唐璇

(西安石油大学 化学与化工学院,陕西 西安 710065)

阿霉素(ADM)是一种抗癌抗生素,其结构中含有糖苷和蒽环,广泛用于治疗肿瘤疾病。临床研究表明,它对白血病、骨肉瘤、乳腺癌及小细胞肺癌具有很好的疗效[1-3]。在这些相关研究和药物质量控制工作中,阿霉素检测方法有高效液相色谱法、放射免疫法等[4-5],操作步骤复杂、价格昂贵。本文利用ADM 本身有天然荧光,采用荧光分光光度计建立直接荧光分析方法,检测盐酸阿霉素原料药及其注射制剂的含量。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

盐酸阿霉素原料药(>99.5%),工业品;注射用盐酸阿霉素;去离子水。

F97 荧光分光光度计;BSA224S 型分析天平。

1.2 溶液配制

盐酸阿霉素80.0 mg,用蒸馏水溶解至100 mL容量瓶中,作为盐酸阿霉素储备液,其浓度为2.76×10-3mol/L。

1.3 实验方法

取盐酸阿霉素储备液,加水稀释,配制不同浓度的溶液,用荧光分光光度计测定阿霉素的荧光激发波长和荧光发射波长。仪器参数为:扫面速度1 000 nm/min,扫面间隔1.0 nm,激发带宽10 nm,发射带宽10 nm,增益设为中。

2 结果与讨论

2.1 测定波长选择

盐酸阿霉素储备液加水稀释到6. 98 ×10-5mol/L,用硫酸调pH =6.3[6],测定荧光激发波长和荧光发射波长,结果见图1。

由图1 可知,盐酸阿霉素的最大激发波长λex=469 nm,最大发射波长λem=593 nm。

图1 盐酸阿霉素的荧光光谱Fig.1 Fluorescence spectrum of doxorubicin hydrochloride

2.2 盐酸阿霉素的荧光强度和浓度的关系

盐酸阿霉素储备液加水稀释,测定荧光强度,结果见表1。

表1 盐酸阿霉素浓度与荧光强度的关系Table 1 The relationship of doxorubicin hydrochlorideconcentration and fluorescence intensity

由表1 可知,盐酸阿霉素的浓度在6. 98 ×10-5mol/L时荧光强度最大,只有在一定的浓度范围内,盐酸阿霉素的浓度与其荧光强度呈正相关的关系。故选择药物浓度低于6.98 ×10-5mol/L 的溶液进行盐酸阿霉素的标准曲线的研究。

2.3 标准曲线的绘制

盐酸阿霉素储备液加水稀释成0.99 ×10-7,2.46 ×10-6,4.91 ×10-6,9.82 ×10-6,1.29 ×10-5,1.97 ×10-5mol/L 浓度的溶液,测定荧光值,盐酸阿霉素荧光强度-浓度标准曲线,见图2。

图2 盐酸阿霉素的标准曲线Fig.2 The standard curre of doxorubicin hydrohloride

由图2 可知,浓度在9. 90 × 10-8~1. 97 ×10-5mol/L范围内具有较好的线性关系,线性方程为y=12.124x+104.81,R2=0.994 5。

2.4 盐酸阿霉素的检测限

配制浓度9.82 ×10-10mol/L 的盐酸阿霉素溶液,以二次蒸馏水作为空白对照,测定荧光强度,结果见表2。

表2 盐酸阿霉素的检测限Table 2 The determination of detection limit of doxorubicin hydrochloride

由表2 可知,9.82 ×10-10mol/L 盐酸阿霉素的荧光强度的平均值F =2.14,标准偏差S =0.032。

其检测限[7]。

2.5 盐酸阿霉素的稳定性

对9.82 ×10-5mol/L 盐酸阿霉素溶液在不同时间内进行荧光检测,结果见表3。

表3 盐酸阿霉素稳定性Table 3 Doxorubicin hydrochloride stability

由表3 可知,不避光保存条件下,盐酸阿霉素溶液荧光强度在1 h 内略有下降,10 d 后明显减弱,一个月后减弱了近1/2 多。避光保存时,荧光强度相对稳定,符合药物含量检测的要求。

2.6 盐酸阿霉素的回收率

对浓度分别为1.24 ×10-5,4.31 ×10-6,4.97 ×10-7mol/L 的阿霉素溶液测定荧光值,每组测5 次,取平均值,其平均回收率见表4。

表4 盐酸阿霉素的回收率Table 4 The recovery rate detection of doxorubicinhydrochloride

2.7 样品分析

2.7.1 制剂含量的检测 准确称取盐酸阿霉素制剂2.1,3.0,3.5 mg 分别置于50 mL 的容量瓶中,用蒸馏水溶解、定容,测定荧光值,平行5 次,扣除空白对照,由标准曲线计算浓度、分别为8. 79 ×10-6,1.27 ×10-5,1.49 ×10-5mol/L,含药率,结果见表5。

表5 阿霉素制剂的含药量Table 5 The including the dosage of detection of ADM doxorubicin hydrochloride injection

2.7.2 加标回收率 准确称取盐酸阿霉素注射剂6.5 mg,置100 mL 容量瓶中,用蒸馏水溶解、定容。称取阿霉素3.9 mg,用蒸馏水溶解在50 mL 的容量瓶中,其浓度为1.34 ×10-4mol/L。按低、中、高三个不同水平将其加入待测样品溶液,测定加标回收率,见表6。

分别量取10 mL 盐酸阿霉素注射剂溶液,置于3 个50 mL 容量瓶中,分别加入0.5,1.0,1.5 mL。

浓度1.34 ×10-4mol/L 的阿霉素溶液,用蒸馏水定容,测其荧光强度,平行3 次,取平均值,然后计算回收率。

表6 盐酸阿霉素的加标回收率Table 6 Standard addition recovery rate test of doxorubicin hydrochloride

3 结论

采用荧光分光光度计检测盐酸阿霉素的含量,在 盐 酸 阿 霉 素 浓 度9. 90 × 10-8~1. 97 ×10-5mol/L,荧光强度和浓度呈良好的线性关系,相关系数R 为0.994 5,回收率98.91% ~101.0%,注射用盐酸阿霉素的含药量12. 24%,加标回收率100.32% ~102.19%。荧光分析法测定盐酸阿霉素具有操作简单、精密度高、检出限低等优点,能够用于盐酸阿霉素原料药及其制剂的检测。

[1] Liu X,Chen Z,Chua C C,et al.Melatonin as an effective protect-tor against doxorubicin-induced cardiotoxicity[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2002,283(1):H254.

[2] 韩锐.肿瘤化学预防及药物治疗[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1994:266-272.

[3] 国家医药管理局,医药工业情报站编.新药指南[M].北京:中国医药科技出版社,1990:458-459.

[4] Gilbert C M,Filippich L J,MoGeary R P,et al.Pharmacokinetics of doxorubicinol in dogs[J]. J Vet Pharmacol Ther,2006,29(5):433-438.

[5] Lewis A L,Taylor R R,Hall B,et al.Pharmacokinetic and safety study of doxorubicin-eluting beads in a porcine model of hepatic arterial embolization[J]. J Vasc Interv Radiol,2006,17(8):1335-1343.

[6] 李桂云. 荧光分析法测定注射用的盐酸阿霉素含量[J].中国药物与临床,2013(13):26-27.

[7] Hernandez F H,Escriche J M. Fluorimetric detemination of aluminium with morin after extraction with isobuty methyl ketone[J].J Analyst,1984,119(2):1585-1592.

猜你喜欢

阿霉素蒸馏水容量瓶
热压式蒸馏水机和多效蒸馏水机制备注射用水的质量比较
谈如何降低容量瓶的容量误差
配制一定物质的量浓度的溶液实验要点剖析
对容量瓶几个实验问题的探讨
高中化学实验探究教学设计实践
影响DSQ型水管倾斜仪资料的蒸馏水问题研究
叶酸对阿霉素诱导心脏毒性的拮抗作用研究
心复力颗粒对阿霉素致心力衰竭大鼠PPAR-α及ET-1的影响
柚皮苷保护H9c2心肌细胞对抗阿霉素诱导的心肌毒性
白藜芦醇通过上调SIRT1抑制阿霉素诱导的H9c2细胞损伤