猴头菌对酒精造成的胃粘膜损伤和肝损伤保护作用的评价*

魏 巍，许晓燕，余梦瑶，江 南，罗 霞

（四川省中医药科学院中药细胞与分子生物学实验室，四川 成都 610041）

猴头菌对酒精造成的胃粘膜损伤和肝损伤保护作用的评价*

魏 巍，许晓燕，余梦瑶，江 南，罗 霞**

（四川省中医药科学院中药细胞与分子生物学实验室，四川 成都 610041）

评价猴头菌H10的水提物对酒精造成的胃粘膜损伤和肝损伤的保护作用。采用95%乙醇造成大鼠急性胃粘膜损伤，测定胃粘膜损伤指数；采用50%乙醇造成小鼠急性肝损伤，测定小鼠血清甘油三脂、极低密度脂蛋白、门冬氨酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶含量，测定小鼠肝组织中丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶含量。猴头菌中剂量组和大剂量组能明显降低乙醇造成的大鼠胃粘膜损伤指数；猴头低剂量组能明显降低小鼠肝损伤动物血清VLDL含量，中剂量能够降低ALT、VLDL、MDA含量，高剂量组能够降低ALT、AST、VLDL、TG、MDA含量及提高SOD、GSH-Px活性。猴头菌对酒精造成的胃粘膜损伤和肝损伤具有保护作用。

猴头菌；胃粘膜损伤；肝损伤；保护作用

Key worlds:Hericium erinaceus;gastric mucosal injury;liver injury;protective effect

随着我国人民生活条件的不断提高，人均酒精的消费量显著增加。然而过量饮酒对消化、心血管和中枢神经系统等均会造成严重的损伤，其中最先损伤的器官就是胃和肝。胃是乙醇最先接触的重要脏器，过量饮酒或长期饮酒后可以引起胃黏膜急性或慢性损伤，临床上常引起急性胃炎、慢性胃炎或是胃溃疡。乙醇经胃肠吸收后绝大部分在肝脏进行代谢，长期或是反复的肝损伤可致使肝脏脂肪发生变性引起肝硬化甚至肝癌。虽然大多数人知道过度饮酒对人体的危害，但是由于我国悠久“饮酒文化”的影响，以及工作的需要，很多人“被迫”饮酒，酒精造成的胃病、肝病成为了某些行业的职业病，发病率呈逐年上升趋势，因此开发一个能保护因过量饮酒造成肝、胃损伤的功能产品具有重要意义。

猴头菌 [Hericium erinaceus(Rull ex F.)Pers.]是担子菌门猴头菌科真菌，是我国传统的药食两用真菌。《中华本草》记载猴头菇性平味甘，利五脏，助消化，主治消化不良、神经衰弱、身体虚弱[1]，临床上有用于治疗胃病[2-3]、肝病[4]的报道。猴头菌H10是四川省中医药科学院中药细胞与分子生物学实验室课题组经多年选育获得的农艺性状和内在品质均较为优异的新材料，本研究以H10为研究对象，评价其提取物对酒精造成的胃粘膜损伤和肝损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1实验材料

1.1.1 试验药物

猴头菌H10，为实验室选育的新材料，产自四川省德阳市，洗净烘干后，粉碎过10目筛。回流提取3次，合并滤液，减压浓缩后喷雾干燥，得率为29.1%，采用硫酸-蒽酮法测定提取物中多糖含量为22.5%。

1.1.2 试剂

甘油三脂测定试剂盒、门冬氨酸转移酶测定试剂盒、丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒购自四川麦克生物技术科技股份有限公司；小鼠极低密度脂蛋白ELISA试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司；丙二醛测试盒、超氧化物歧化酶测试盒、谷胱甘肽过氧化物酶测试盒购自南京建成生物工程研究所。

乙醇、甲醛等为市售分析纯。

1.1.3 实验动物

SD大鼠和昆明种小鼠由四川省中医药科学院实验动物中心提供，合格证号：SK（川）2013-19。

1.2实验方法

1.2.1 酒精引起的大鼠胃黏膜损伤

SD大鼠40只（180 g～200 g），随机分为空白组、模型组和给药组（猴头菌低、中、高剂量组分别给予猴头菌提取物0.87 g·kg-1、1.74 g·kg-1和3.48 g·kg-1，相当于原猴头子实体3 g·kg-1、6 g·kg-1、12 g·kg-1），每组8只，雌雄各半，空白组和模型组给予同等体积的蒸馏水，连续灌胃30 d，实验前一天禁食不禁水24 h，除正常组外各组灌胃95%乙醇1 mL·只-1，1 h后处死动物，暴露完整胃，结扎幽门，灌注5 mL10%甲醛溶液，固定20 min，然后沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，在肉眼下用游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度，按表1标准进行评分，计算损伤抑制率（P），公式[5]为：

P= (V1-V2)/V1×100%

式中：V1表示模型组损伤分值；V2表示给药组损伤分值。

表1 评分标准Tab.1 Grading standard

总积分=出血点分值+长度分值+（宽度分值×2）。

1.2.2 酒精引起急性酒精性肝损伤

昆明种小鼠50只（18 g～22 g） 随机分为空白组、模型组和给药组（给药组剂量与实验1.2.1相同），每组10只，雌雄各半，空白组和模型组给予同等体积的蒸馏水，连续灌胃30 d，末次经口给予受试物20 min后，除正常组外其余各组一次灌胃给予50%（w·w-1）乙醇，剂量为12 mL·kg-1体重，空白组给予同等体积的蒸馏水，禁食16 h后，取血清和肝脏，按照试剂盒方法测定各指标[6]。

1.2.3 数据统计

数据分析采用t检验，P＜0.05有统计学意义。

2 结果

2.1猴头菌提取物对酒精引起的大鼠胃黏膜损伤的影响

空白组大鼠胃粘膜光泽红润，无损伤。乙醇灌胃后模型组，黏膜表面出现糜烂、出血、条索状坏死（如图1箭头所示），与胃纵轴平行。预先给予不同剂量胃猴头菌提取物后，粘膜损伤明显减轻，见图1。

猴头菌提取物中剂量组和大剂量组能明显降低乙醇造成的大鼠胃粘膜损伤指数，其中中剂量组与模型组比较P＜0.05，大剂量与模型组比较P＜0.01，见图2。

图2 大鼠胃粘膜损伤指数Fig.2 The rat gastric mucosal lesion index

2.2猴头菌提取物对急性酒精肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性和VLDL、TG含量的影响

猴头水提液对小鼠急性酒精肝损伤血清中ALT、AST活性和VLDL、TG含量的影响见表2。

表2 猴头水提液对小鼠急性酒精肝损伤血清中ALT、AST活性和VLDL、TG含量的影响（x±s,n=10）Tab.2 Effects on serum ALT and AST activities,VLDL and TG contents in ethanol-induced mouse liver injury

小鼠注射乙醇造模后，血清中ALT和AST活性明显升高，模型组与空白组比较均有极显著差异（P＜0.01），血清中VLDL、TG含量明显升高，与模型组比较分别具有显著性和极显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）。猴头菌低剂量组血清VLDL含量明显降低，与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05），猴头菌中剂量组ALT活性和VLDL含量降低，与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）；猴头菌高剂量组ALT、 AST活性和VLDL、TG含量均降低，与模型组比较AST活性的降低具有极显著差异（P＜0.01），VLDL、TG含量降低具有显著性差异（P＜0.05）。

2.3猴头菌提取物对急性酒精肝损伤小鼠肝匀浆MAD含量、SOD和GSH-Px活性的影响

猴头水提液对小鼠急性酒精肝损伤肝匀浆中MAD含量、SOD和GSH-Px活性的影响见表3。

表3 猴头菌提取物对小鼠急性酒精肝损伤肝匀浆中MAD含量、SOD和GSH-Px活性的影响（x±s,n=10）Tab.3 Effects on liver MAD content,SOD and GSH-Px activities in ethanol-induced mouse liver injury

小鼠注射乙醇造模后，小鼠肝匀浆液中的SOD和GSH-Px活性明显降低，模型组与空白组比较具有显著性差异（P＜0.05），小鼠肝匀浆中MAD含量明显升高，模型组与空白组比较具有极显著性差异（P＜0.01）。猴头菌中剂量组能够使小鼠匀浆液中明显升高的MAD含量降低，与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）。猴头菌高剂量组能使小鼠匀浆液中明显降低SOD和GSH-Px活性升高，与模型组比较有显著性差异（P＜0.05），且能使明显升高的MAD含量降低，与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）。

3 讨论

高浓度的酒精能直接引起胃黏膜上皮细胞的变性坏死，另外乙醇分子中既有疏水性的烃基，又含亲水性的羟基，可以破坏黏膜的防御系统[7]，引起胃粘膜下血管内皮损伤，使血管扩张，小血管破裂，粘膜下出血。粘膜上皮和血管内皮损伤后会产生大量炎症介质，引起中性粒细胞浸润，进一步加重粘膜损害[8]。有报道表示猴头菌临床上用于治疗慢性萎缩性胃炎、慢性浅表性胃炎、胃窦炎等的效果显著，本文从动物实验上也证明了这一点，但是对于其在胃粘膜损伤的保护作用基质上的研究还较少，还需要深入研究。

机体大量摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧化，导致三羧循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，造成α-磷酸甘油增多而促进TG合成[9]，ALT和AST主要存在于肝细胞的胞浆和线粒体内，当肝细胞受到损伤或是细胞膜通透性增加时AST和ALT会释放进入血液造成其在血清中浓度增加[10]，因此乙醇造成的肝损伤主要表现为TG和VLDL含量增加以及AST和ALT水平的升高。本文研究发现猴头菌提取物能降低血清TG和VLDL含量，以及AST和ALT水平，说明猴头菌具有调节乙醇造成的脂代谢紊乱的作用以及保护肝细胞的作用。另外乙醇在肝脏的代谢过程会引起细胞的脂质过氧化反应，削弱抗氧化系统[11]，造成肝组织的氧化损伤，而猴头菌多糖在体内具有较好的抗氧化作用[12-13]，对乙醇造成的氧化损伤具有保护作用。

综上，猴头菌H10的提取物，在保护酒精造成的胃粘膜损伤和肝损伤两方面均具有较好的保护作用，具有开发成为养胃保肝保健品和药品的潜力。

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[3]胡洪勇，李正修.猴头菌提取物颗粒治疗药物性胃炎56例临床疗效观察[J].中国医药指南，2012，10(21)：51-52.

[4]杨鉴英，张淑杰.鲜猴头治疗慢性乙型肝炎研究初报[J].中国食用菌，1989（3）：6-7.

[5]国家食品药品监督管理局.对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法[Z].2012-05-01.

[6]国家食品药品监督管理局.对化学命性肝损伤有辅助保护功能评价方法（修订稿）[Z].2011-09-30.

[7]罗霞，魏巍，余梦瑶，等.尖顶羊肚菌对急性酒精性胃黏膜损伤保护作用研究[J].菌物学报，2011，30（2）：319-324.

[8]张金卓，刘改芳.胃黏膜防御机制的研究现状与进展[J].中华临床医师杂志（电子版），2007，1（5）：441-443.

[9]赵敏，黄俊明，谭剑斌，等.小鼠急性酒精性肝损伤模型的动态研究[J].毒理学杂志，2010，24（5）：378-380.

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[11]雷红伟，杨伟峰.葛花对酒精性肝损伤保护作用的研究[J].时珍国医国药，2010，21（2）：489-490.

[12]杜志强，王建英.猴头菇多糖抗氧化活性及耐缺氧功能的研究[J].江苏农业科学，2011，39（5）：398-399.

[13]杜志强，杨晨晨，王建英.猴头菇多糖对小鼠血清抗氧化能力的影响[J].食品研究与开发，2011，32（9）：56-58.

野生菌电商节探索“互联网＋”新模式

当下正是野生菌上市高峰，“野生菌王国”云南计划为野生菌举办电商节，通过多个电商平台销售云南牛肝、松露、虎掌菌等野生菌。此举旨在通过改变传统营销模式，探索云南野生食用菌产业“互联网＋”发展模式上的突破，推动云南野生菌产业的提质升级。据了解，云南野生菌资源丰富，全省野生食用菌种类达882种，2014年产量达8万t，实现产值67.8亿元。2014年当地主产区农民人均野生菌收入超过1000元，最高的农户达到12万元，主产区农户野生菌收入占家庭收入的30%～70%。在“互联网＋”时代，云南食用菌产业紧跟时代发展步伐，实现线上线下共同发展，着力发挥产业富民效应，打造云南特色野生菌亮点产业。

中国食用菌商务网 2015.07.03

Protective Effect Study of Hericium erinaceus on Ethanol-induced Gastric Mucosal Lesion and Liver Injury

WEI Wei,XU Xiao-yan,YU Meng-yao,JIANG Nan,LUO Xia
（Cellular and Molecular Lab of Chinese Materia Medica,Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences,Chengdu 61000,China）

The protect effects of Hericium erinaceus water extract on ethanol-induced gastric mucosal lesion and liver injury were investigated.The gastric mucosal lesion of rat was induced by 95%ethanol,and the lesion index was measured.The liver injury of mice was induced by 50%ethanol,and the triglycerides(TG),very low density lipoprotein(VLDL),aspartate transaminase(AST),alanine aminotransferase(AST)content in serum were measured,the malondialdehyde (MDA),superoxide dismutase(SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px)content in liver tissue were measured.The middle dose and high dose of H.erinaceus could reduce the lesion index of gastric mucosal.The low dose of H.erinaceus could reduce VLDL content.The middle dose of H.erinaceus could reduce ALT,VLDL,MDA content.The high of H.erinaceus could reduce ALT,AST,VLDL,TG, MDA content and improve the activities of SOD and GSH-Px.Hericium erinaceus water extract can protective gastric mucosal and liver from ethanol damage.

S646.9

A

1003-8310（2015）04-0072-04

10.13629/j.cnki.53-1054.2015.03.017

菌类药材研究与开发四川省科技创新团队（2011JTD0021）；以精深加工为核心的食药用菌产业关键技术集成与产业化（成财教〔2013〕265）；四川省精深加工研究岗位建设项目（川农业（2009）75号）；四川省十二五育种攻关项目（2011NZ0098-12-04）；四川省重大科技计划项目（2012NZ0003）；四川藏区和攀西地区名贵食药用菌可持续利用关键技术研究与应用（2013NZ0029）。

魏巍（1982-），男，博士，助理研究员，主要从事药用菌研究。E-mail:21822546@qq.com

**通信作者：罗霞（1974-），女，博士，研究员，主要从事药用菌研究。E-mail:lx1443_cn@sina.com

2015-05-15