窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者外周血干扰素诱导的T细胞α趋化因子表达的影响

樊 卓，覃静净，王丹丹，党 云

银屑病是一种免疫诱导的红斑鳞屑性慢性炎症性皮肤病，病因复杂，确切发病机制尚不明确。随着对其免疫炎症机制的研究，趋化因子在其发生发展中的作用成为研究热点。趋化因子是具有募集细胞定向迁移的细胞因子，已发现在银屑病皮损中存在多种趋化因子及其受体的表达异常[1]。干扰素诱导的T 细胞α 趋化因子（I-TAC）属于CXC 类趋化因子，主要对T 淋巴细胞有趋化作用，特别是Th1细胞。银屑病被证实是一种以Th1 细胞介导为主的免疫炎症性疾病。本研究采用夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测NB-UVB 治疗前后30 例银屑病患者血清I-TAC 的含量，并与银屑病皮损面积严重度指数（PASI）评分进行相关性分析，探讨NBUVB 是否涉及对银屑病患者血清I-TAC 的影响。

1 材料与方法

1.1 临床资料

30 例银屑病患者男 18 例，女12 例；平均年龄38.9 岁（18 ～57 岁），均来自我科门诊。纳入标准：①经临床和组织病理确诊，符合进行期寻常性银屑病；② 3 个月内未进行过维A 酸类、糖皮质激素及免疫抑制剂等系统治疗及紫外线光疗，1 周内未行局部治疗；③无皮肤肿瘤史，无光敏史；④年龄18 ～65 岁。排除标准：并发有严重心、肝、肾、肺、甲状腺等疾病；妊娠期、哺乳期妇女；未按规定治疗及资料不全者。疾病严重程度采用PASI 评分法。正常对照来自我院体检科的30 名健康体检者，男16 例，女14 例，平均年龄37.5 岁（18 ～55 岁）。两组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂和仪器 I-TAC 试剂盒（美国R&D公司，批号RK-E10061）；NB-UVB 光疗仪（上海希格玛公司，SS-03 型）；酶标仪（芬兰雷勃公司）；离心机（上海医疗器械厂）。

1.2.2 NB-UVB 治疗 采用NB-UVB 光疗仪（峰值311 nm，辐照强度3.42 mW/cm2，照射间距20 cm）。首次剂量400 mJ/cm2，以后每次增加100 mJ/cm2，最大剂量＜300 mJ/cm2，每周照射3 次，总疗程平均36 次。照光时患者佩戴专用紫外线防护镜，男性穿内裤并用黑布遮盖生殖器进行保护。治疗过程中，出现明显红斑时剂量维持；出现鲜红斑时减上次剂量的10%～20%；出现痛性红斑、水疱者停止治疗，并按日光性灼伤治愈后从初始剂量开始照射。治疗过程中患者除NB-UVB 治疗外，仅局部外涂雅漾三重修护霜（皮尔法伯雅漾护肤化妆品研制公司）。

1.2.3 血清I-TAC 检测 自肘正中静脉抽取正常对照组和治疗前、后银屑病患者外周静脉血2 ml，注入空白试管中，4 ℃，1 000 r/min，离心10 min，提取上层血清，并置于-80 ℃恒温冷冻保存（避免反复冻融），以备统一检测。采用ELISA 检测血清中I-TAC 含量，具体操作由专人严格按照试剂盒说明书同一批次完成，建立标准曲线，用酶标仪读取450 nm 处的吸光度（A）值，根据标准曲线查出各孔I-TAC 浓度。

1.2.4 疗效判定标准[2]根据PASI 评分标准，病情严重程度按无、轻、中、重、极重分别计0 ～4 分。病情改善率(%)=[(治疗前PASI 评分－治疗后PASI评分)∕治疗前PASI 评分]×100%。临床疗效则根据病情改善率分为4 种，即治愈（病情改善率≥90%）、显效（病情改善率60%～89%）、好转（病情改善率25%～59%）及无效（病情改善率＜25%）。有效率=治愈率+显效率。

1.3 统计学方法

采用SPSS17. 0 统计软件对数据进行处理，两组资料均数比较采用t 检验及直线相关分析，数据以均数±标准差（±s）表示，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床疗效

经NB-UVB 治疗36 次后，有效率为83.33 %，其中治愈9 例，显效16 例，好转6 例，无效0 例。银屑病患者治疗后的PASI 评分明显低于治疗前 （t=13.16，P ＜0.05）（表1）

2.2 血清I-TAC比较

银屑病患者治疗前的外周血血清I-TAC 含量明显高于正常对照组（t=21.37, P ＜0.05)；治疗后的外周血血清I-TAC 含量明显低于治疗前（t=18.23，P ＜0.05）（表1）。

表1 正常对照者和银屑病患者治疗前、后 I-TAC及PASI评分比较 （±s）

表1 正常对照者和银屑病患者治疗前、后 I-TAC及PASI评分比较 （±s）

注：治疗后PASI评分与治疗前比较，*P<0.05；治疗后I-TAC含量与治疗前比较，**P<0.05；治疗前I-TAC含量与正常对照组比较，***P<0.05

组 别 n I-TAC (pg/ml) PASI(分)对照组 30 63.48±19.72银屑病组治疗前 30 248.52±82.42*** 17.25±2.01银屑病组治疗后 30 97.85±31.69** 9.23±2.35*

2.3 不良反应

所有患者均出现不同程度的肤色加深，经3 ～10个月自行恢复正常肤色。出现光刺激性反应2 例，经对症处理后不影响继续治疗。

2.4 相关性分析

NB-UVB 治疗银屑病患者的外周血I-TAC 水平与PASI 评分呈正相关（r=0.293，P ＜0.05）。

3 讨论

银屑病是一种免疫介导的慢性炎症性皮肤病，发病机制复杂，涉及诸多细胞因子和免疫分子。免疫异常被认为是银屑病发病的中心环节，其中主要与Th1 淋巴细胞异常密切相关，Th1 细胞分泌的INF-γ 引起角质形成细胞过度增生、异常分化及炎症反应[3]。在银屑病的发生和发展中，Th1 细胞的活化及其触发的后续免疫炎症反应是关键环节。

趋化因子是一类在免疫细胞募集过程中发挥关键作用的细胞因子，可以介导靶细胞定向迁移至效应部位。趋化因子目前分为CXC 类、CC 类、C 类及CX3C 类，其 中I-TAC 属 于CXC 类。I-TAC 在T 淋巴细胞介导的免疫性疾病的发病中起重要作用，可以特异性地趋化表达其受体CXCR3 的Th1 细胞，而Th1 细胞是银屑病发病中的主要免疫细胞。已有研究发现，在以Th1 介导为主的皮肤病如银屑病、扁平苔藓皮损的角质形成细胞（KC）高表达I-TAC[4]，而真皮中大部分的T 淋巴细胞均表达I-TAC 的受体CXCR3[5]，提示I-TAC 及其受体CXCR3 在此类皮肤病发病机制中的T 淋巴细胞募集、浸润及维持过程中发挥着重要作用。此外，I-TAC 最强的诱导因子干扰素(IFN)-γ 和肿瘤坏死因子(TNF)-α[6]，在Th1 型皮肤病的皮损中也高表达[7]。

近些年在银屑病的治疗中， NB-UVB 以其疗效肯定，不良反应少，成为国内外普遍认可和应用的物理疗法。研究发现，在NB-UVB 作用下Thl/Th2反应逆转，Thl 免疫反应被抑制，Th2 免疫反应则上调[8]，推测其中的细胞因子途径可能是其重要的干预途径；NB-UVB 还可有效诱导银屑病真皮中大量T 淋巴细胞调亡；银屑病患者经NB-UVB 治疗后皮损中的IFN-γ 水平下降[9]，而I-TAC 主要是由IFN-γ 诱导角质形成细胞合成的。

本研究显示，与正常对照组相比，银屑病患者外周血I-TAC 水平显著升高，但经NB-UVB 治疗36 次后，外周血I-TAC 含量较治疗前明显降低，且患者的PASI 评分也较治疗前明显下降。本文结果提示，I-TAC 可能在银屑病的发病机制中起重要作用；NB-UVB 对银屑病的治疗作用可能与降低I-TAC的表达有关。推测其可能的机制：NB-UVB 可能是通过抑制IFN-γ 过度表达从而下调趋化因子I-TAC的表达，进而使趋化至皮损的Th1 细胞数量减少，导致银屑病皮损的炎症反应减轻。此研究将为进一步探讨NB-UVB、趋化因子与银屑病的关系奠定基础和提供思路。然而，银屑病的发病机制绝不是某个单一因子对靶细胞的作用， NB-UVB 对其他趋化因子及受体的作用，NB-UVB 与I-TAC 及其受体CXCR3 之间的具体作用机制，以及NB-UVB 治疗后I-TAC、IFN-γ 和疗效之间的相关性还有待进一步深入探讨。

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