B淋巴细胞刺激因子对慢性特发性荨麻疹患者产生抗Fcε RI抗体和抗IgE抗体的影响

李正学

B淋巴细胞刺激因子对慢性特发性荨麻疹患者产生抗Fcε RI抗体和抗IgE抗体的影响

李正学①

目的：探讨慢性特发性荨麻疹患者血清B淋巴细胞刺激因子（BlyS）对抗IgE抗体和抗FcεRI抗体的影响。方法：选取慢性特发性荨麻疹患者100例作为疾病组，选取同期体检健康者100例作为健康组。检测两组受试者血清BlyS、抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平；分离培养疾病组患者外周血中的B淋巴细胞，分为两份保存，在其中一份培养液中加入有效水平的BlyS，检测抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平，作为试验组，将另一份作为空白对照组。分析血清BlyS与抗IgE抗体及抗FcεRI抗体之间的关系。结果：疾病组血清BlyS、抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平明显高于健康组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。试验组培养液中抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；试验组中抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平与BlyS呈正相关（r=0.765、0.722，P＜0.05）。结论：慢性特发性荨麻疹患者血清BlyS可刺激B淋巴细胞产生抗IgE抗体和抗FcεRI抗体，这可能与慢性特发性荨麻疹的发病机制有关。

慢性特发性荨麻疹； 免疫反应； B淋巴细胞刺激因子； 抗IgE抗体； 抗FcεRI抗体

慢性荨麻疹（Chronic urticaria，CU）是一种常见的皮肤病，由各种因素致使皮肤黏膜血管发生暂时性炎性充血与大量液体渗出，造成局部水肿性的损害。慢性特发性荨麻疹（Chronic idiopathic urticaria，ICU）是病因和发病机制不明的慢性荨麻疹。研究发现，ICU属于自身免疫性荨麻疹，患者体内存在抗IgE抗体和抗高亲和力IgE受体（FcεRI）抗体是其发生的重要原因。B淋巴细胞刺激因子（B lymphocyte stimulator，BlyS）一种重要的肿瘤坏死因子（TNF）超家族成员，能够特异性地刺激B淋巴细胞增殖分化，在不需抗原的条件下产生抗体，有报道称BlyS水平升高ICU患者症状加重，原因可能与其刺激B淋巴细胞生成抗IgE抗体和抗FcεRI抗体有关。本研究分析ICU患者血清BlyS与抗IgE抗体和抗FcεRI抗体的关系，旨在了解血清BlyS能否刺激B淋巴细胞生成抗IgE抗体和抗FcεRI抗体，导致ICU发病，希望能为明确ICU患者发病机制提供一定的帮助，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取慢性特发性荨麻疹患者100例作为疾病组，其中男64例，女36例；年龄24～64岁，平均（45.82±13.29）岁；病程1.2～8.6个月，平均（4.73±3.22）个月。选取同期体检健康者100例作为健康组，其中男61例，女39例；年龄27～70岁，平均（46.64±14.93）岁。两组在性别、年龄方面比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

纳入标准：（1）ICU诊断符合《皮肤病学》相关诊断标准；（2）自体血清皮肤试验阳性；（3）风团反复发作，病程超过6周；（4）过敏性特异性IgE检测阴性；（5）既往无哮喘、特应性皮炎、鼻炎等过敏性疾病及自身免疫性疾病史；（6）入选前1个月未使用糖皮质激素，1个周内未使用抗组胺药物者。排除标准：荨麻疹性血管炎、皮肤划痕症、遗传血管性水肿、胆碱能性荨麻疹、药物或感染等引起的荨麻疹及其他能找到过敏源和物理因素等确切病因的荨麻疹。

1.2 方法 抽取所有受试者空腹肘静脉血10 mL，置于不加抗凝剂的试管内，室温静置15 min，以3000 r/min高速离心15 min，取上层血清，置于-30 ℃的冰箱中待测。（1）采用温控全自动定量酶标仪（奥地利Anthos公司型号：ZA23-Zenyth 340ST），以酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定血清BlyS、抗IgE抗体、抗FcεRI抗体，试剂盒由美国强生公司提供，按说明书进行操作。（2）疾病组患者中取新鲜抗凝血2 mL，采用密度梯度离心法和尼龙毛柱法分离提取外周血中的B淋巴细胞。将分离提取的B淋巴细胞计数后，接种于含小牛血清的培养基中，置于37 ℃的CO2培养箱中，培养72 h，待细胞增长至对数生长期，取第4～6代细胞，分为两份，一份中分别加入浓度为2、4、6、8 ng/mL的BlyS（美国强生公司），作为试验组；另一份中不加BlyS作为空白对照组，检测培养液中抗IgE抗体和抗FcεRI抗体的水平（试剂盒由美国强生公司提供）。

1.3 统计学处理 采用SPSS 20.0版统计学软件进行处理，计量资料采用（±s）表示，比较采用t检验，计数资料采用 χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 疾病组和健康组血清BlyS、抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平比较 疾病组血清BlyS、抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平明显高于健康组，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 疾病组和健康组血清BlyS、抗IgE抗体及抗Fcε RI抗体比较（±s）

表1 疾病组和健康组血清BlyS、抗IgE抗体及抗Fcε RI抗体比较（±s）

抗FcεRI抗体（IU/mL）疾病组（n=100）3.76±0.69113.45±12.425.11±1.19健康组（n=100）0.68±0.1442.43±5.391.23±0.78 t值2.3272.9512.579 P值0.0210.0190.018组别Blys（ng/mL）抗IgE抗体（IU/mL）

2.2 试验组和对照组B细胞培养液中抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平比较 加入BlyS后，试验组培养液中抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平明显高于空白对照组，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；试验组中抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平与BlyS呈正相关（r=0.765、0.722，P＜0.05），见表2～3。

表2 加入不同浓度BlyS后两组B细胞培养液中抗IgE抗体水平比较（±s）

表2 加入不同浓度BlyS后两组B细胞培养液中抗IgE抗体水平比较（±s）

组别2 ng/mL4 ng/mL6 ng/mL8 ng/mL试验组（n=100）1.16±0.351.38±0.461.86±0.642.26±0.76对照组（n=100）0.64±0.140.63±0.150.64±0.150.49±0.14 t值2.1732.2692.5772.890 P值0.0430.0370.0320.026

表3 加入不同浓度BlyS后两组B细胞培养液中抗Fcε RI抗体水平比较（±s）

表3 加入不同浓度BlyS后两组B细胞培养液中抗Fcε RI抗体水平比较（±s）

组别2 ng/mL4 ng/mL6 ng/mL8 ng/mL试验组（n=100）1.04±0.251.23±0.321.45±0.471.74±0.56对照组（n=100）0.54±0.140.56±0.150.54±0.170.53±0.15 t值2.2682.3522.5152.734 P值0.0410.0360.0320.024

3 讨论

BLyS属肿瘤坏死因子（TNF）家族，是Shu等学者首先发现并克隆的一种新的细胞因子，随后多位学者对BLyS进行了进一步的研究[5]。BLyS主要由嗜中性粒细胞和巨噬细胞分泌，其作为一种B淋巴细胞的刺激因子，能专一地刺激B细胞增殖分化，在维持生发中心B细胞的增殖和抗原特异性IgM的分泌，调控机体免疫应答中起着重要的作用，研究发现其在体内的过量表达与自身免疫性疾病关系密切[6]。Marasoğlu等[7]研究发现类风湿关节炎和红斑狼疮患者血清BLyS水平明显高于健康对照组人群，并且相关免疫指标和病情与BLyS水平相关。

CIU的发病机制目前尚未完全明确。尽管CIU与急性荨麻疹（AU）在临床表现上非常相似，但是两者的发病机制完全不同[8]。AU是由IgE介导的一种Ⅰ型变态反应；而CIU却是一种自身免疫性疾病[10]。Morgan等[11]报道CIU的发病主要与体内自身抗体引起的自身免疫反应有关，如甲状腺抗体、抗HP抗体、抗IgE抗体及抗FcεRI抗体，尤其与后两种自身抗体关系密切。B淋巴细胞在自身抗体和自身免疫反应的产生中起着关键作用，而BLyS能刺激B细胞增殖分化，其与B细胞表面的成熟分子结合，通过激活激酶和磷酸化酶诱导活化的B细胞增殖分化成浆细胞并分泌各型抗体[12]。Magen等[13]报道BLyS可能对CIU患者体内的抗IgE抗体及抗FcεRI抗体的产生具有一定的影响。Sun等[14]认为CIU患者体内可能存在针对IgE受体的记忆性B细胞，其在高水平BLyS刺激下产生抗IgE抗体及抗FcεRI抗体可能是导致CIU迁延难治的重要原因。本研究通过体内和体外实验分析CIU患者BLyS与抗IgE抗体及抗FcεRI抗体的关系，探讨BLyS在CIU发病中的作用。笔者分别抽取100例CIU患者和100例健康人群的静脉血，分离血清后进行检测，结果显示：CIU患者血清BLyS、抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平明显高于健康人群，并且血清BLyS水平越高，血清抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平越高，血清BLyS水平分别于血清抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平呈正相关；在体外实验中笔者分离培养CIU患者外周血中的B淋巴细胞，分别加入不同浓度的BLyS后检测抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平，结果显示：加入BLyS的B淋巴细胞培养液中的抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平明显高于没有加BLyS的空白对照组，并且随着加入BLyS浓度的升高，抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平也不断升高，BLyS浓度分别与抗IgE抗体及抗FcεRI抗体水平呈正相关。以上结果提示：BLyS能够刺激CIU患者体内B淋巴细胞产生抗IgE抗体及抗FcεRI抗体，并且两种自身抗体的产生与BLyS水平有关。

综上所述，BLyS与CIU发病机制中起着重要作用，与其通过刺激B淋巴细胞参与抗IgE抗体及抗FcεRI抗体等自身抗体的产生有关，以BLyS为靶点的药物研发可能为难治性CIU提供新的有效治疗手段。

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The Affect of the Serum B Lymphocytes Stimulating Factor（BlyS） on the Anti-IgE Antibody and Anti-Fcε RI Antibody of the Patients with Chronic Idiopathic Urticaria/

LI Zheng-xue.//Medical Innovation of China，2015，12（11）：032-034

Objective：To investigate the affect of the serum B lymphocytes stimulating factor（BlyS） on the anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibody of the patients with chronic idiopathic urticaria. Method： 100 cases of patients with chronic idiopathic urticaria were selected as disease group， 100 cases of healthy people in the same period were selected as the healthy group. The serum level of the BlyS， anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibodies were detected；the B lymphocytes from the peripheral blood of the disease group patients were isolated and cultured， and divided into two shares， add BlyS in one share as the experimental group，another share as blank control group，the level of the anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibodies were detected. The relationship among the BlyS，anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibodies were analyzed. Result：The serum levels of the BlyS，anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibodies of the disease group were significantly higher than the healthy group，the differences had statistical significance （P＜0.05）. The levels of the BlyS，anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibody of the experimental group were significantly higher than the control group， the differences had statistical significance（P＜0.05）. The levels of the anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibodies of the experimental group were positively correlated with the BlyS （r=0.765，0.722，P＜0.05）. Conclusion：BlyS can stimulate B lymphocytes to produce the anti-IgE antibody and anti-FcεRI antibodies of patients with chronic idiopathic urticaria， this may be related to the pathogenesis of chronic idiopathic urticaria.

Chronic idiopathic urticaria； Immune response； B lymphocyte stimulating factor； Anti-IgE antibody； Anti-FcεRI antibody

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.11.011

2014-12-16） （本文编辑：周亚杰）

①日照市卫生学校 山东 日照 276826

李正学

First-author’s address：Rizhao City Health School，Rizhao 276826，China