鸡卡氏住白细胞病病原学研究和防治技术
2015-12-18酒雅丽信阳市畜产品检验检测中心河南信阳464000
酒雅丽 (信阳市畜产品检验检测中心,河南信阳 464000)
卡氏住白细胞(Leucocytozoon caulleryi),寄生在鸡的白细胞和红细胞内,由此引起的一种鸡血液寄生虫病,称为鸡住白细胞病。此病近年来在信阳地区养鸡场的蛋鸡、育成鸡及雏鸡中时有发生和流行,对养鸡业有严重危害,特别是雏鸡感染后出现高死亡率,给养鸡户造成巨大经济损失,严重威胁养鸡业的发展。为摸清该病在豫南鸡血液内生长发育时虫体各阶段形态特征及其给组织器官造成的变化,进而探究此病的流行规律,对自然发病鸡场抽样采血600只,分别作涂片,同时实验室人工接种健康鸡10只发病作血片共1 000多张。对自然发病鸡和人工接种发病鸡采集脾、肝、心、肾、肺等制作组织印片960张,组织学切片260多张。通过实验室观察研究,对信阳地区病鸡体内各期病原体形态变化和组织切片中病原形态变化此病流行规律、典型症状及诊断等进行了总结,并提出了一些防治技术。
1 材料与方法
1.1 材料来源 信阳市郊区李某鸡场自然发病鸡和健康鸡分别采血,作血液涂片和组织印片,作为对病原体观察的材料。
1.2 方法
1.2.1 血液涂片检查。2013年9月,李某鸡场饲养的3 600只蛋鸡,50 d以后有一半以上的鸡出现精神不好,鸡冠发白,严重拉绿色稀粪而死亡。对严重和不严重的病鸡分别在翅下静脉和鸡冠处采血涂片,用姬氏和瑞氏涂片后在油镜下观察病原体和鸡组织细胞的变化。
1.2.2 病理剖检。取病鸡的心、肝、脾、肾、肺、脑和骨髓,制成组织印片并用姬瑞氏染色,油镜观察病鸡各组织中虫体形态及细胞的变化。
1.2.3 人工接种试验。将发病严重的鸡采血共20 ml,加入抗凝剂分别给10只健康的鸡接种,每天观察临床症状和血液涂片,观察裂殖子和配子体在外周血液中出现的时间及虫体形态变化和鸡细胞的变化。
1.2.4 组织学切片检查。取肝、脾、肺、肾、心、胰,用石蜡包埋切片,H.E染色镜检,观察不同裂殖体的形态变化。
2 结果与分析
2.1 血液涂片检查结果 血液涂片中,可明显看到虫体在鸡血液内发育时各阶段形态和细胞的变化。①在血浆中可看到圆点状的裂殖子染色呈兰紫色,其直径为0.4~1.0 μm,侵入红细胞和白细胞的胞浆中的裂殖子直径约1.1 μm,侵入红细胞的虫体一般为1~2个,多则可达16个以上,虫体侵入少时虫体在细胞核旁侧,红细胞的变化不大,但虫体侵入多时胞浆显示出许多网状不着色的空泡。②位于鸡细胞内的球形虫体,逐渐发育变大已形成雏形配子体,虫体核着染深兰紫色,胞浆淡红色,其大小约2~3 μm,鸡细胞核发生移位。③在鸡细胞内发育的配子体比前期明显变大,将细胞核挤到边缘,其着色变淡,核变大,胞体变大,配子体保留在鸡细胞内。配子体着色情况,核着色较淡,胞质较多,着色淡红。在血浆中见到配子体形状不规则,形态多样,其大小可达7~9×9~10 μm。④在鸡细胞及血浆中发育的配子体形状近似圆形,其大小约10~12 μm,因配子体增大将鸡细胞核挤到极边缘,快要被挤掉的状态。⑤在鸡细胞内发育成熟的配子体,可明显看到大配子体呈圆球形,有丰富的细胞质,着染深兰色。细胞核小而明显,着染淡红色,核仁呈红色,其直径大小为13~26 μm。小配子细胞质较少,着色浅兰色,细胞核占大部分,紫红色,其直径大小为8~17 μm。
2.2 病理剖检及组织印片观察结果 通过剖检和肉眼观察发现,肾脏肿大出血,肝脏上有豆类大、圆形、灰白色的坏死灶。气管、粘膜有轻微的炎症,部分病鸡的肺部有红色肝样的坏死灶。将这些病灶剪下制成压片并染色,在油镜下可看到许多小点状的裂殖子。
2.3 人工接种试验结果 9月6日进行接种试验,9月13日分别采血涂片,可见到红细胞及血浆中有少量的裂殖子,第2天红细胞染虫率明显上升,9月16日、9月18日、9月19日鸡出现精神沉郁、不食、拉绿色稀粪。分别采集鸡血液,制作血片检查发现红细胞染虫率达高峰,可看到配子体的出现。试验中有1只鸡9月17日死亡,2只鸡9月18日死亡,3只鸡9月20日死亡,其余4只鸡未死,到月底剖杀,剖检时血液涂片和组织器官压片发现有裂殖子和配子体。
2.4 组织学切片观察结果 ①未成熟型的裂殖体近似圆形,直径约140 μm,其体内的包囊,囊壁光滑,胞质粉红色,壁厚14 μm,内层色浅,囊内看到有不规则裂片,裂殖子胚,颜色浅紫或暗红色,其上有深红色粒状核2~10个;表层裂殖子胚与囊壁紧接,形状似锯齿,中部裂殖子胚间常有空泡或颜色较表层深。壁外有7~10 μm宽的空环。②成熟型的裂殖体呈圆形比较大,壁厚3~9 μm,囊内含较小裂殖胚或分化为1~2个粒核的小个体,即裂殖子。③破裂型囊壁厚3~8 μm,囊壁上有1破口,内含物由破口处流出,排空后囊壁萎缩变形,壁外有圆形或椭圆形细胞分布。④吸收型囊壁界限模糊不清,囊腔内有多团兰染组织细胞,肥大细胞和成纤维细胞分片占据。⑤初生型在肾、脾、心组织切片中看到裂殖体呈椭圆形暗红色,其直径约14~16 μm,有的内含有深色团,无囊壁,位于鸡细胞内,鸡细胞核或有或无,周围有组织细胞团。⑥在肾远曲管壁中见到21 μm×22 μm的裂殖体,其内均有很多紫红色的圆小颗粒点,鸡细胞核被挤到一旁,胞体变大,胞质着色变淡。肺脏中的裂殖体多位于近小叶间之呼吸毛细血管处。
3 防治方法
(1)在流行季节,鸡舍内外可用7%马拉硫磷、敌杀死等药物进行喷洒1次,门窗要钉上纱窗,防止此病的传播者蠓进入鸡舍。
(2)盐酸二奎宁,每支 1 ml(0.25 g),每只鸡肌注 0.25 ml,每天1 次,连用 5 d。
(3)氯喹拌料200 mg/kg,连用3 d,隔2 d后再喂3 d。
(4)常山、苦参、青蒿、黄芩、地榆炭、木香、白芍、墨旱莲各200 g,打碎后拌入500 kg饲料中,再加入少量的磺胺类药物,效果更佳。
4 讨论与结论
(1)通过实验室对鸡卡氏住白细胞病病原学的研究,发现信阳市近年来鸡卡氏住白细胞虫体在血液细胞内发育各期形态变化与国内外有关资料报道的各阶段虫体形态变化基本相同。大配子平均大小为14.86 μm,小配子体平均大小为12 μm。大配子体的数量比小配子体的数量多。
(2)通过病变组织印片观察发现,在鸡细胞内外除看到第3和4期的配子体外,裂殖子。
(3)从自然发病的鸡和人工接种健康鸡发病分别采血涂片,通过观察感染后的症状发现裂殖子和配子体在鸡血液中寄生时间较长,引起鸡体消瘦、精神沉郁、喜卧、不愿站立、贫血严重、生长缓慢、饲料利用率降低,给养殖户带来经济损失。
(4)通过病理切片检查发现,可见到圆形大裂殖体,同时还能看到成熟的裂殖体呈圆球形,着染淡红色,内有紫红色小点状观病变程度相同。肾、脾内裂殖体数量最多,有128个/cm2,聚集或散在,最多一丛达18个,裂殖体直径为27~68 μm,而肺、肝、心、胰脏器上的裂殖体数量较少。
(5)信阳市位于河南省南部,雨水偏多。以种水稻为主,水源丰富,传播者蠓分布广泛在流行季节,鸡场一定加强饲养管理,鸡舍内外要定期消毒,喷洒驱虫药物,鸡场周围要铲除杂草,垫平臭污水沟,门窗钉上纱窗,饲料中加入杀虫、清热、补血的中西药物来预防和治疗此病。
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