人参对睡眠促进作用的实验研究
2015-12-16董佳佳王雪贡济宇
董佳佳 王雪 贡济宇
(长春中医药大学 吉林长春 130117)
随着对人参研究的深入和发展,人参的化学成分和药理作用已逐渐被发现。人参须根中人参皂苷以Rb1,Rc,Rd和Re居多,含量约为8%,对中枢神经系统、循环系统、内分泌系统等均有药理作用。本文采用水和不同浓度乙醇提取的人参提取液,通过小鼠翻正反射实验[1],研究人参改善睡眠作用。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
人参(购自于长春宏检药材公司),其产地均为吉林省,由长春中医药大学中药鉴定教研室蔡广知老师鉴定为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根;戊巴比妥钠(国药集团化学试剂有限公司,临用时以蒸馏水配制,阈剂量:配制成5.0mg/ml的溶液,阈下剂量:配制成3.5mg/ml的溶液);地西泮片(2ml:10mg;,江苏济川制药有限公司);甲醇(北京化工厂)。
1.2 实验动物
人参ICR小鼠,清洁级,18-22g,雌雄各半,由吉林大学实验动物中心提供。
1.3 药液的制备
1.3.1 50%醇提液的制备
称取一定量的人参药材,用8倍量50%乙醇加热回流提取3次,每次0.5h,合并提取液,滤过浓缩至折合生药5g/ml,即得人参50%醇提液。
1.3.2 75%醇提液的制备
按照“1.3.1”项下方法,采用75%乙醇,即得人参75%醇提液。
1.3.3 90%醇提液的制备
按照“1.3.1”项下方法,采用90%乙醇,即得人参90%醇提液。
1.3.4 水提液的制备
称取一定量的人参药材,用12倍量蒸馏水煎煮提取3次,每次1h,合并提取液,滤过浓缩至折合生药5g/ml,即得人参水提液。
表1 不同浓度醇提与水提药液对戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间影响(min,±s)
1.4 实验方法与指标
将60只实验动物放置实验室适应环境,一周后随机分为6组,每组10只,随机分为空白对照组、A组(50%醇提液)、B组(75%醇提液)、C组(90%醇提液)、D组(水提液)、阳性对照组6组。A-D组为实验动物组,经灌胃途径按照50g/kg剂量给药,空白对照组和阳性对照组给予相同体积蒸馏水,连续灌胃给药7d。末次给药30min后,其余经腹腔注射给予50mg/kg的戊巴比妥钠(注射体积为0.2ml/20g体重),以腹腔注射时间至翻正反射消失时间记为睡眠潜伏期,以翻正反射消失的持续时间记为睡眠时间为指标,分别记录睡眠潜伏期时间和睡眠时间。
2 实验结果
水提液和不同浓度醇提液对戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间影响,见表1,图1。
实验结果显示,阳性对照组比与空白对照组能明显缩短小鼠睡眠潜伏期且显著延长睡眠时间(p<0.05),表明该试验方法可靠。与空白对照组比,A组(50%醇提液)和B组(75%醇提液)对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期与睡眠时间均有明显差异, B组(75%醇提液)明显缩短了睡眠潜伏期和延长睡眠时间,差异具有显著性意义(p<0.05)。因此,75%醇提的人参改善睡眠作用效果最佳。
3 讨论
人参总皂苷提取方法较多,如浸渍法、回流提取法、超声波提取法等[2-3]。人参须根对中枢神经系统、循环系统、内分泌系统等均有药理作用。本文采用水和不同浓度乙醇提取的人参提取液,通过小鼠翻正反射实验,研究人参改善睡眠作用。本文采用水提和不同浓度醇提的人参提取液,通过小鼠翻正反射实验,研究人参改善睡眠作用,为后续开发具有改善睡眠功能和记忆功能的中药复方制剂提供了科学依据。
[1]张博,李廷利.天然冰片与合成冰片对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响[J].中华中医药学刊,2013,11,11(31):2512~2514.
[2]谢丽玲,任理,赖县生,曹俊辉,莫全毅,陈蔚文.红参中人参总皂苷的提取纯化工艺研究[J].中药材,2009,10,32(10):1602~1605.
[3]毛祖林,李晓波,龚文明,范薇.人参皂苷提取工艺优选.时珍国医国药,2008,19 (11):762~2763.