头孢呋辛钠在Beagle犬体内的毒代动力学研究

孙晶晶 凌 珊

头孢呋辛钠在Beagle犬体内的毒代动力学研究

孙晶晶 凌 珊

目的 探讨头孢呋辛钠在Beagle犬体内的毒代动力学，为临床用药提供参考。方法 选取Beagle犬7只，随机分为阴性对照组和注射用头孢呋辛钠（1.65 g/kg）组，以静脉滴注方式给药。血浆样品采用反相高效液相色谱法测定头孢呋辛浓度，用DAS计算毒代动力学参数。结果 头孢呋辛钠在Beagle犬体内的毒代动力学主要参数为：血浆药时曲线下面积（AUC0-t）为（4 745±1 607）mg（L·h），峰浓度（Cmax）为（2520±407）mg/L，平均滞留时间（MRT0-t）为（1.8±0.3）h，清除率（CL）为（0.38±0.16）L（h/kg），分布容积（Vd）为（0.56±0.15）L/kg。结论 头孢呋辛在Beagle犬体内消除较快，基本分布于血浆，提示应无明显毒性蓄积。

头孢呋辛；毒代动力学；Beagle犬

头孢呋辛钠（cefuroxime）为半合成第 2代头孢类抗菌素，可抵抗大多数的β-内酰胺酶，并对多种革兰阳性和革兰阴性细菌有效，在临床中应用广泛。头孢呋辛钠在胃肠道吸收不佳[1]，故临床常采用肌内注射、静脉注射或静脉滴注的方式给药。本研究依照相关规范[2]，测定注射用头孢呋辛钠在Beagle犬体内的单次给药血药浓度，研究注射用头孢呋辛钠在毒性剂量下的药代动力学特征，为进一步阐明其毒性结果提供参考，为临床试验设计提供有力的依据。

1 材料与方法

1.1 受试物与试剂 注射用头孢呋辛钠（广州白云山天心制药股份有限公司，批号：130493-201105），对照品：头孢呋辛、头孢唑啉（内标）（广州白云山天心制药股份有限公司提供）；乙腈（OCEANPAK Sequence），三水合乙酸钠（广州化学试剂厂，批号：20100401-2），0.9%氯化钠注射液（紫光古汉集团衡阳制药有限公司，批号：1305064-01）。

1.2 仪器与色谱条件 Waters高效液相色谱仪；色谱柱 Diamonsil C18（4.6×200，5 μm）；流动相为0.05 mol/L醋酸钠溶液（磷酸调pH为2.69）：乙腈（83:17，v/v）；流速1.0 ml/min；柱温为室温；检测波长273 nm。

1.3 动物实验 选取5～6月龄Beagle犬7只，4只雌性，3只雄性，体质量7～10 kg，由广州医药研究总院有限公司实验动物研究开发中心提供。按1.65 g/kg静脉滴注给药，于给药前，给药开始后5 min、15 min、30 min及给药结束时，给药结束后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h采集静脉血2.0 ml。血样用12 μl肝素钠抗凝，4 000 r/min、离心15 min（离心半径30 cm），取血浆置于－20 ℃左右保存待检。

1.4 血样处理[3]精密移取血浆180 μl，加入10 μl内标溶液和10 μl超纯水涡旋1 min后，加400 μl乙腈沉淀蛋白，超声5 min，涡旋混合4 min；13 000 r/min离心10 min，移取上清液300 μl在50 ℃氮气流下吹干；吹干的离心管加醋酸钠溶液200 μl复溶，超声2 min，涡旋2 min，13 000r/min离心8 min（离心半径5 cm），移取上清液进样分析。

1.5 参数计算及统计学分析 采用Excel软件对待测样品进行定量处理，采用药代动力学软件DAS 2.0对试验数据进行处理。

2 结果

2.1 血浆测定方法的建立 Beagle犬血浆样品色谱图见图 1。头孢呋辛和内标头孢唑啉在该色谱条件下无杂质干扰，得到良好分离。标准曲线线性范围为2.5～150.0 μg/ml，定量下限为2.5 μg/ml。头孢呋辛第1天低、中、高浓度的相对标准偏差（RSD）分别为7.19%、2.21%、3.27%；第2天低、中、高浓度的RSD分别为10.89%、5.72%、7.85%；第3天低、中、高浓度的RSD分别为5.62%、3.34%、2.41%，均小于 15%，批内精密度和批间精密度结果符合要求[4]；头孢呋辛低、中、高浓度的回收率的RSD分别为4.96%、4.48%、3.26%，均小于15%；头孢呋辛低、中、高浓度冻融稳定性结果的RSD分别为 13.25%、5.22%、8.29%，均小于 15%，符合要求。

2.2 毒代动力学研究 经 DAS软件自动进行算法、模型、权重选择，选择最佳条件进行血药浓度-时间曲线的拟合（图 2），并给出毒代谢动力学参数（表1）。Beagle犬以1.65 g/kg单次静脉滴注给予注射用头孢呋辛钠后，其血浆药时曲线下面积（AUC0-t）为（4 745±1 607）mg/（L·h），峰浓度（Cmax）为（2 520±407）mg/L，平均滞留时间（MRT0-t）为（1.8±0.3）h，清除率（CL）为（0.38±0.16）L/（h·kg），分布容积（Vd）为（0.56±0.15）L/kg。

3 讨论

图1 高效液相色谱法测得Beagle犬血浆中头孢呋辛专属性研究

图2 拟合的血药浓度-时间曲线

表1 注射用头孢呋辛钠单次给药头孢呋辛毒代动力学参数

毒代动力学主要是研究在毒性剂量下，药物进

入体内后的吸收、分布及代谢排泄的全过程。在这一过程中，药物都将通过多种生物膜屏障系统进入组织和细胞，产生各种毒性反应，其与药物动力学的区别重点在于剂量。本实验药物剂量参考正常人的常用剂量，推算毒性剂量，在此剂量下研究该药物的毒代动力学，结果发现，注射用头孢呋辛钠给药后t1/2值为1.093 h，表明其在Beagle犬体内消除较快；MRT0-t为1.771 h，表明其在Beagle犬体内平均驻留时间较短。Vd为（0.56±0.15）L/kg，相对较小，表明该药物大部分分布于血浆。根据注射用头孢呋辛钠急毒伴随毒代试验结果可知，注射用头孢呋辛钠单次给药在Beagle犬体内消除较快，药物大部分分布于血浆，单次给药无明显毒性蓄积。由结果可知，试验所得毒代参数t1/2值和Vd值与头孢呋辛药代动力学文献参考值基本一致[5]。得出结论：在此毒性剂量下，头孢呋辛在Beagle犬体内分布消除动力学特征无明显改变。

[1]郑映,鲍仕慧,李菁.头孢呋辛与氧氟沙星治疗下尿路感染的成本-效果分析[J].实用药物与临床,2008,11(2):115-117.

[2]中华人民共和国国家药品食品监督管理局.药物毒代动力学研究技术指导原则[S].北京,2014.

[3]王萍,胡晓,李文.RP-HPLC用于人血浆中头孢呋辛浓度的测定及其药代动力学的研究[J].江西医学院学报,2009,49(7):25-27.

[4]中华人民共和国国家药品食品监督管理局.化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则[S].北京,2014.

[5]姜芳,徐海燕,徐萍蔚.头孢呋辛钠与头孢呋辛钠复方制剂在Beagle犬体内的药动学考察[J].沈阳药科大学学报,2011,59(1):65-68.

Toxicokinetics of Cefuroxime sodium in Beagle dogs

Sun Jingjing Ling Shan

Objective In order to study the toxicokinetics of cefuroxime sodium in Beagle dogs,and provide scientific basis for clinical use.Methods The concentrations of plasma cefuroxime in Beagle dogs after single intravenous infusion in dose of 1.65 g/kg were determined by HPLC-UV.The toxicokinetic parameters were computed by using DAS program.Results The main toxicokinetic parameters were as follows:AUC0-t=(4745±1607)mg/（L·h）,Cmax= (2520±407)mg/L,MRT0-t=(1.8±0.3)h,CL=(0.38±0.16)L/（h·kg）,Vd=(0.56±0.15)L/kg.Conclusion Cefuroxime is rapidly eliminated and distributed mainly in plasma.The result shows no obviously accumulation toxicity.

Cefuroxime;Toxicokinetics;Beagle dog

R965

A

1673-5846(2015)07-0014-03

广州医药研究总院有限公司药物非临床评价研究中心，广东广州 510240