补阳还五汤药理学研究概况*

李文彬，王宇红，谭 琥，李 峰，蔡光先△

（1.湖南中医药大学，湖南 长沙410000；2.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙410000）

补阳还五汤源自清代医学家王清任的著作——《医林改错》，它主要由黄芪、川芎、红花、赤芍、当归尾、桃仁、地龙等7 味药物组成，具有补气、活血、通络的效果，主治中风之气虚血瘀证，为中风后遗症的常用方。方中重用黄芪，以补益元气，意在气旺则血行，瘀去络通为君药；当归尾活血通络而不伤血，为臣药；赤芍、川芎、桃仁、红花协同当归尾以活血祛瘀；地龙通经活络，力专善走，周行全身，以行药力，为佐药[1]。该方自问世以来，由于临床效果显著，受到了许多医家的推崇，故一直沿用至今。近年来，越来越多的中医药工作者从不同角度探寻补阳还五汤的功效，并通过实验研究使得补阳还五汤的临床药理研究得到不断完善。本文主要从有效药物成分、药效机制、药物剂量变化等方面对补阳还五汤的研究资料进行简单的梳理，希望在现有研究的基础上，寻找到更适合临床运用的最佳配方、剂型。

1 主要有效成分药效机制的研究

中药复方是一个比较复杂的系统，它通过多成分、多靶点发挥多层次的效应，而任何药物的效应都来自于该药的一些特定药物分子组成，因此中药复方也有其一定的药效物质基础[2]。现代药理学研究表明补阳还五汤具有改善血液流变学、抗血栓形成、抗动脉粥样硬化、抗脑缺血及在灌注损伤等作用[3]。为了弄清楚补阳还五汤中哪些物质发挥效应、提高有效物质加工含量，越来越多的中医药工作者在中医药理论的指导下，结合现代的药理学，选用不同的实验方法、新的技术、新的理论思路对其进行了大量的研究[4]。

邓常青等研究组提取了该方的七类化学组分，证实生物碱、总苷、多糖、苷元和挥发油类组分对小鼠抗脑缺血具有显著作用，并且按一定比例的配伍可发挥很好的效果[5-6]。同时该研究小组还对补阳还五汤抗脑缺血、抗血栓、抗血管内膜增生进行了研究。结果发现补阳还五汤当中一些物质参与了抑制脑缺血后炎症反应和细胞凋亡途径，如生物碱可抑制髓质区白细胞介素1β 表达的升高[7]，苷可抑制脑组织半胱氨酸蛋白酶1 和半胱氨酸蛋白酶3 表达的升高，并可抑制其mRNA 表达的升高[8-9]；补阳还五汤通过抑制凝血酶原激活蛋白激酶C 信号途径从而对血管内皮细胞抗凝、纤溶和表达粘附发挥作用，如通过凝血酶原刺激培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304，使细胞组织型纤溶酶原激活物增多、TF、TFPI、ICAM-1 与E-选择素的mRNA 表达升高[10-11]；补阳还五汤可抑制平滑肌细胞增殖、增生内膜中细胞外基质的合成，促进ECM 降解[12-13]。并且该实验小组还通过采用血浆药理学证实了补阳还五汤当中的总生物碱和苷可抑制VSMC 增殖，增加G0/G1 细胞数量，下调PCNA 和c-fos 基因表达，抑制cyclinD1 和周期蛋白依赖性激酶4、P21 蛋白的表达[14-15]。吴常青等采用MCAO 模型和血清药理学验证了补阳还五汤当中的总苷和黄酮类物质可抑制LDH 活性，降低MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6 的水平从而保护脑缺血再灌注损伤、降低脑组织的炎症反应[16]。补阳还五汤是治疗中风后遗症的经典明方，随着中医药的发展越来越多的科研工作者对其抗脑缺血的作用机制展开了探寻。周赛男等采用MCAO 模型观察了补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠TLR4 的表达，其机制可能是补阳还五汤通过调节TLR4 介导的炎症信号传导通路而降低TLR4 蛋白表达减轻脑缺血后损伤，实现脑保护作用[17]。同时还验证了补阳还五汤可能通过促血管生成、扩血管、抗凝、溶栓等改善脑缺血局部微循环，减轻脑水肿及氧自由基损伤，保护脑组织，从而促进神经功能恢复减小梗死面积[18]。刘志婷等通过观察补阳还五汤对小鼠局灶性脑缺血后生长相关蛋白43 和突触素表达的影响证实了补阳还五汤能促进小鼠缺血周边区轴突芽生标记GAP-43 和突触发生标记SYP 表达从而促进脑缺血后神经功能恢复可能和缺血周边区神经轴突再生和突触可塑性[19]。刘芳等通过观察补阳还五汤对大鼠脑缺血后蛋白激酶B1和c-Jun 氨基末端激酶1/2 表达的影响验证了补阳还五汤可能通过AKT/JNK 通路来激活细胞转录因子细胞周期蛋白D1 促进细胞周期G0/G1 期的转换，达到促进细胞增殖的作用减少脑缺血后梗死面积，减轻脑组织的水肿，从而达到脑保护的作用[20-22]。邓常青研究组采用线栓法建立大鼠MCAO 模型，研究了补阳还五汤对脑缺血再灌注后脑组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶蛋白表达的变化，并验证补阳还五汤当中生物碱、多糖、苷及苷元有效成分对再灌注诱导的PMNL 浸润的影响[23-24]。

2 药代动力学的研究

随着中医药现代化的进程的加快，运用中药药代动力学理论研究中药复方的有效药物成分及有效机制、改良剂型、促进中药新药的开发已成为当前医药行业的热门领域，为中医药走向国际奠定基础。

我国的中药药代动力学始于上世纪六十年代，其发展大致经过了三个时期，进入新世纪，中药药动学开始迅速发展成为一门新兴的热门学科，新的理论和学说极大地丰富了中药药动学。当前中药药动学的研究方法主要分为两类：一种是用于有效成分明确、可定量分析检测中药及中药复方，被称之为“血药浓度法”；另一种则比较适用于组方较复杂并且药物的有效成分不明确的中药及其制剂，主要采用毒理效应法、药理效应法和微生物法等检测方法[25]。

近几年来，随着对单味中药的有效成分提取技术的成熟，中医药研究者根据药效-浓度的理论[26]，开始逐渐探索中药复方的药代动力学。补阳还五汤作为临床治疗中风后遗症治疗的经典方，随着其治疗机制的不断完善，越来越多的科研开始涉足于探索其在体内的药效-浓度变化的关系。贺福元等实验研究组采用总量统计矩原理与指纹图谱多信息分析相结合创立了总量统计矩方法，并整合了补阳还五汤的三大有效部位不同成分、不同药物动力学参数，表达了多成分药物动力学行为，更合理、更真实的揭示了中药“黑匣子”的内幕[27-29]。同时该实验小组还采用RP-HPLC（反向高效液相色谱法）对补阳还五汤当中的多种有效成分（黄芪甲苷、川芎嗪、芍药苷、阿魏酸等）在体内的含量及药物动力学进行了研究。结果显示在大鼠血浆当中黄芪甲苷峰在保留15min 左右可完全分离；芍药苷在体内中央室代谢速度稳定且快，在波长为230nm 处产生较大吸收峰，峰可保留11.5min 左右完全分离；川芎嗪在波长278nm 处产生较长吸收峰，峰可保留18.5min 左右可完全分离，房室模型当中代谢稳定，；阿魏酸在波长为322nm 处产生较大吸收峰，峰可保留21.1min 左右基本全部分离[30-35]。同时通过结合HPLC 指纹图谱、药物动力学、药物动力学代谢时间、药物浓度、效应偶联的保留时间该研究小组还探索了补阳还五汤的谱效动力学，完整表征多成分体系生物效应的动力学行为，获得了补阳还五汤的半衰期。实验结果显示补阳还五汤在大鼠体内代谢的一阶距为13.14h，总量二阶距为82.12h2即补阳还五汤水醇提沉液灌胃大鼠后，经9.108h 代谢50%，经（9.108±1.96）×9.0625h 后95%的有效成分被排除出体外，其中补阳还五汤当中的黄芪甲苷、芍药苷与苦杏仁苷3 成分总量半衰期为（120.3±5.503）min，在0～502.2min 代谢95%的浓度[36-38]。

3 中药剂量的研究

在复方的应用当中，不仅要考虑好单味药的剂量还要考虑好各药物之间剂量的配比，因此药物剂量的不同可直接影响临床疗效。补阳还五汤中，黄芪为君药且使用量大，因此历代医家对此持有不同的观点。为了了解黄芪的最佳剂量，科研工作者进行了大量的实验研究。如朱丽等发现不同的黄芪使用剂量可以改变补阳还五汤对缺血性脑卒中患者血液流变学及疗效，以黄芪剂量30g，60g，120g 组成补阳还五汤A、B、C 方来治疗缺血性脑卒中恢复期患者，结果发现以120g 黄芪的补阳还五汤对血流变指标的影响最明显，对血粘度、红细胞刚性指数、红细胞变形指数均有显著调节作用，提高血液流动性，改善微循环、减轻血瘀证，还能降低患者血纤维蛋白原的作用，具有一定的抗血液高凝状态的作用[39]。俞天虹等MCAO 模型，于大鼠缺血24h 后分别给予黄芪剂量为120g，60g，30g，15g 的补阳还五汤，采用BrdU／Nestin 免疫荧光双标检测室下区神经干细胞增殖情况，结果显示黄芪剂量为120g 组的补阳还五汤显著改善神经症状评分和减少大鼠右转次数，减慢VZ 内神经干细胞（Neural stem ceils，NSCS）增殖、向缺血周边区迁移、分化为特定的神经元表型，显著促进室下区神经干细胞增殖[40]。张林等以30g，60g，120g，180g，240g 黄 芪 的 补 阳 还 五 汤 来 观 察MCAO 大鼠脑缺血的改善情况，结果显示180g 的补阳还五汤能显著降低大鼠血清IL-1 和IL-6 含量、增加IL-l0 含量。但当补阳还五汤中黄芪用量达到240g 时，对局造性脑缺血大鼠血清中IL-6 含量的影响反而减弱[41]。

从大量实验当中我们可以得出，对于不同的评价指标，当黄芪的剂量改变时，可以使补阳还五汤的临床疗效发生变化，但是黄芪的剂量也应该保持在一定范围内，并不是剂量越大越好，这些实验数据为临床医生选择黄芪剂量提供了有用的理论指导。

4 结语

综上所述，现代中医药研究者通过采用现代中药实验方法证实了补阳还五汤中含有的生物碱、总苷、多糖、苷元和挥发油类等成分通过抑制脑缺血后炎症反应和细胞凋亡途径、抑制凝血酶原激活蛋白激酶C 信号途径、抑制LDH 活性、激活细胞转录因子细胞周期蛋白等药效机制参与促血管生成、抗血栓、扩张血管等减轻脑水肿、促进神经再生来改善脑缺血、保护脑组织，从而达到抗脑缺血再灌注损伤；同时运用统计学相关原理，整合相关数据探索了补阳还五汤的在体内的血药浓度随时间变化的吸收情况，有利于建立补阳还五汤的时-效-量三维模型；同时相关研究者还通过实验对比了方中君药黄芪剂量的改变对药效的影响，结果显示黄芪剂量为120g 组的补阳还五汤能够显著改善神经症状评分，减慢VZ 内神经干细胞的增殖、向缺血周边区迁移、分化为特定的神经元表型，显著促进室下区神经干细胞增殖。展望未来，作为中医药工作者我们还可以从以下方面对补阳还五汤进行深入研究，从而为新药的开发及其临床用药剂量选择作出一点贡献：①从药物代谢动力学角度对该方在体内吸收、分布、代谢、排泄和毒性动态变化规律及其体内的时-量、时-效关系进行研究[42]；②对方中主要药效成分药代动力学特征变化进行研究，通过建立药动-药效结合模型获得有效成分与药效的量效关系。

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